王楷宬
- 作品数：88 被引量：225H指数：9
- 供职机构：中国动物卫生与流行病学中心更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项重大动物疫病防治关键技术引进项目国家科技基础性工作专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生政治法律生物学更多>>
- 等温扩增技术概述及其在动物病原检测中的应用被引量：3
- 2022年
- 等温扩增技术是一种可以在恒定温度下进行体外核酸扩增的技术,近几年其研究热度很高。本文从技术原理、优缺点及在动物病原检测应用等方面,对环介导等温扩增技术(LAMP)、重组酶等温扩增技术、依赖核酸序列扩增技术(NASBA)、交叉引物等温扩增技术(CPA)和赖解旋酶等温扩增技术(HDA)等5种常见等温扩增技术进行了综述。LAMP技术操作简单,不依赖特殊设备,但引物设计较为复杂,研发多重LAMP检测方法有很大困难。重组酶等温扩增技术不受场地条件约束,扩增时间短,但容易造成气溶胶污染,因此一般用于实验研究。NASBA技术扩增效率高,不易产生污染,但成本偏高,操作相对复杂,在目前疫病检测研究中的应用逐渐减少。CPA技术操作相对简单,灵敏度高,特异性好,但结果判断受主观因素影响易造成假阳性或假阴性。HDA技术引物设计相对简单,但反应体系较为复杂,因此不适合扩增长序列。不同的等温扩增技术需要根据实际需求和场景条件来选择。等温扩增技术作为一种新兴技术具备许多优点,但仍需要不断改进,未来与微流体芯片、纳米金、CRISPR等技术联合应用,将会实现更加快捷、准确、简便的检测,从而为动物疫病检测提供更好的服务。
- 禹兰平王楷宬潘俊慧张富友杨文静周凯钰太崔成都崔成都孙福亮
- H9亚型禽流感病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与应用被引量：1
- 2019年
- 为建立一种快速准确检测H9亚型禽流感病毒基因的检测方法,根据GenBank中H9亚型禽流感病毒血凝素编码基因进行荧光检测引物和探针设计,建立了一种针对H9亚型禽流感病毒的荧光RT-PCR检测方法。利用该方法进行灵敏度和特异性检测,并用本方法和国家标准中的荧光RT-PCR检测方法,同时对临床样本进行检测。结果显示,仅H9亚型禽流感病毒出现了正常荧光检测曲线,而其他病毒及阴性对照均未出现;检测灵敏度为RNA终浓度10-4 ng/μL(1.30×104 copies/μL);临床样本检测结果与国标方法一致,符合率为100%。结果表明,该方法特异性强、灵敏度高,可用于H9亚型禽流感病毒检测。
- 王楷宬王素春樊擎莹孙亚伟康京丽汪洋刘华雷黄保续
- 关键词：H9亚型禽流感病毒
- 禽流感病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量：9
- 2019年
- 为满足禽流感病毒高通量快速检测的需要,建立了一种能够检测各亚型禽流感病毒的实时荧光定量RT-PCR检测方法,并对该方法的特异性和灵敏度进行评估,使用该方法与农业行业标准NY/T772—2013中的禽流感病毒RT-PCR方法同时进行临床样品检测。结果显示,该方法检测耗时短、特异性好,检测下限达10-4 ng/μL,与传统的RT-PCR方法阳性符合率为100%。结果表明,本方法能实现对禽流感病毒的安全、特异、快速、灵敏、简单、高通量检测,从而弥补了现有传统检测技术的不足。
- 王楷宬王素春朱琳仲焕香黄保续
- 关键词：禽流感病毒实时荧光定量RT-PCR
- 猪链球菌精氨酸脱亚氨酸酶序列分析及其PCR检测被引量：1
- 2007年
- 对9株猪链球菌2型重庆分离株的精氨酸脱亚氨酸酶基因进行克隆测序,结果表明该基因长度为1231bp,与Genbank发表的该基因序列相比,核苷酸同源性高于99%,推导的氨基酸同源性高于96%。根据精氨酸脱亚氨酸酶基因的测序结果建立扩增片段长度为237bp的PCR检测方法,35株猪链球菌致病株中,30株精氨酸脱亚氨酸酶基因的PCR检测阳性,有5株精氨酸脱亚氨酸酶基因的PCR检测阴性;14株正常猪扁桃体分离株中,11株为精氨酸脱亚氨酸酶基因的PCR检测阳性,3株为精氨酸脱亚氨酸酶基因的PCR检测阴性;猪链球菌1型、7型、9型、13型、1/2型各一株,均能扩增出精氨酸脱亚氨酸酶基因的片段。
- 张东王楷宬汤明黄保续范伟兴
- 关键词：猪链球菌2型PCR检测
- 一种甲型流感病毒快速分型与分析流程
- 本发明属于生物技术领域，它确立了一种甲型流感病毒快速分型与分析流程，可以快速、准确对甲型流感病毒进行分型、分析和遗传进化研究，其包含3个技术要点：（1）筛选了适合进行甲型流感病毒分型的参考序列；（2）构建了甲型流感病毒分...
- 王楷宬王通陈继明庄青叶王素春彭程
- 一种通用型、H5亚型、H7亚型及H9亚型禽流感病毒检测方法
- 本发明的目的是提供一种通用型、H5亚型、H7亚型及H9亚型禽流感病毒的四重实时荧光RT‑PCR的检测方法，以实现对通用型、H5亚型、H7亚型及H9亚型禽流感病毒进行安全、特异、灵敏、快速、方便的检测。本发明提供一种基于分...
- 王楷宬王素春黄保续
- 文献传递
- 赤羽病的流行与防控研究进展被引量：1
- 2023年
- 赤羽病是由赤羽病病毒感染牛、羊引起的一种以流产、早产、死胎和胎儿先天性畸形为典型病理特征的虫媒传染病,蚊虫和库蠓是其主要传播媒介。赤羽病传播和流行具有明显地域性、周期性和季节性特征,可对流行地区的畜牧业造成较大经济损失。牛赤羽病被我国列为三类动物疫病,也被列入《中华人民共和国进境动物检疫疫病名录》,属于我国口岸检疫需重点防范的二类传染病。通过对赤羽病病原学、检测诊断技术、传播与流行病学特点、传播媒介、综合防控措施等流行和防控的研究进展进行综述,为探索建立赤羽病新型快速诊断方法,从而实现赤羽病的综合防控建立基础。
- 李超薛峰薛峰王楷宬马晓玲
- 关键词：赤羽病流行病学防控技术
- 一种甲型流感病毒快速分型与分析流程
- 本发明属于生物技术领域，它确立了一种甲型流感病毒快速分型与分析流程，可以快速、准确对甲型流感病毒进行分型、分析和遗传进化研究，其包含3个技术要点：（1）筛选了适合进行甲型流感病毒分型的参考序列；（2）构建了甲型流感病毒分...
- 王楷宬王通陈继明庄青叶王素春彭程
- 文献传递
- 一种新城疫病毒的荧光定量RT-PCR检测方法
- 本发明的目的是提供一种新城疫病毒荧光RT‑PCR检测方法，其中使用的检测新城疫病毒引物对和探针组，其特征在于，所述的引物对和探针组中，正向引物的序列为SEQ ID NO:1，反向引物的序列为SEQ ID NO:2；探针序...
- 王素春王楷宬黄保续庄青叶李昂
- 文献传递
- 一种RNA高通量测序文库构建方法
- 本发明属于生物技术领域，它确立了一种RNA高通量测序文库构建方法，构建的文库可在高通量测序仪进行测序并得到高质量序列信息，其含有两个技术要点：1.确立了构建文库所需要的引物；2.确立了操作流程和反应条件。该可用于转录组测...
- 王楷宬陈继明陈贵钱
- 文献传递
