王根平
- 作品数：12 被引量：69H指数：5
- 供职机构：中国农业科学院作物科学研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家重点基础研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 用于获得无标记转基因植物的农杆菌专用载体组合物及其应用
- 本发明公开了用于获得无标记转基因植物的农杆菌专用载体组合物及其应用。本发明提供了一种用于获得无标记转基因植物的农杆菌专用载体组合物，由独立包装的重组载体A和重组载体B组成；所述重组载体A为将目的基因插入pClean系列载...
- 夏兰琴王根平杜文明孙永伟
- 普通小麦新品种陕农33未成熟胚高频再生体系的建立被引量：1
- 2015年
- 陕农33是2012年审定的一个高产、稳产、强筋优质的小麦优良新品种。为了解陕农33组织培养特性,以科农199、H261为对照,研究陕农33未成熟胚愈伤组织的诱导和分化能力以及AgNO3、CuSO4对其组织培养的影响。结果表明:陕农33未成熟胚愈伤组织诱导率为98.11%、褐化率为2.48%、再生分化率为80.23%。差异显著性分析显示:陕农33与对照科农199(诱导率99.43%、褐化率2.25%、分化率71.18%)没有显著性差异(P>0.05),但显著(P<0.05)高于H261(诱导率96.24%、褐化率7.81%、分化率62.24%);说明陕农33具有较好的组织再生能力。另外,在培养基中添加4.0mg/L的AgNO3可以进一步提高愈伤组织诱导率至99.41%、分化率至82.35%,使褐化率降至1.68%;添加2.50mg/L的CuSO4可以提高绿苗分化率至84.17%。
- 刘洋王根平王超杰谢彦周许喜堂王怡王成社
- 关键词：未成熟胚AGNO3CUSO4
- 用于获得无标记转基因植物的农杆菌专用载体组合物及其应用
- 本发明公开了用于获得无标记转基因植物的农杆菌专用载体组合物及其应用。本发明提供了一种用于获得无标记转基因植物的农杆菌专用载体组合物，由独立包装的重组载体A和重组载体B组成；所述重组载体A为将目的基因插入pClean系列载...
- 夏兰琴王根平杜文明孙永伟
- 文献传递
- 麦长管蚜唾液蛋白C002的基因克隆与RNA干扰研究被引量：12
- 2014年
- 【目的】蚜虫唾液相关蛋白C002是一种水溶性唾液蛋白,在蚜虫取食过程中发挥着重要作用。本研究探讨了蚜虫唾液相关蛋白基因C002在麦长管蚜Sitobion avenae(F.)取食过程中的作用和功能。【方法】根据豌豆蚜基因C002序列,同源克隆了麦长管蚜C002基因,并应用荧光定量PCR和RNA干扰(RNAi)技术分别对该基因的表达规律和功能进行了研究。【结果】结果表明:麦长管蚜C002基因c DNA开放阅读框长663 bp,编码220个氨基酸,命名为Sv C002。转录水平的表达时序分析发现,Sv C002在蚜虫各个时期都有表达,在2龄若蚜时期表达量最高。ds RNA饲喂结果显示,麦长管蚜取食ds C002 4 d和6 d后,C002基因的表达量分别下降54%和69%,差异极显著(P<0.01),麦长管蚜存活率较对照组下降了32.2%和53.3%。将饲喂ds C002的麦长管蚜接种到感蚜小麦(北京837),蚜虫在短时期内出现大量死亡现象,第6天和第8天存活率分别为44.4%和35.6%,低于对照组并达到极显著水平。【结论】C002基因在麦长管蚜的取食行为中发挥着重要作用,可以作为麦长管蚜防治的潜在RNAi靶标基因。
- 李雪峰范佳孙永伟王根平陈红梅闫婷杜文明夏兰琴
- 关键词：麦长管蚜RNA干扰荧光定量PCR
- 植物安全转基因技术研究现状与展望被引量：22
- 2014年
- 转基因技术是进行基因功能研究和作物遗传改良的重要工具。根癌农杆菌介导转化法和基因枪轰击法是两种主要的遗传转化方法。从1996年首例转基因作物商业化种植以来,2012年全球有28个国家和地区种植转基因作物,种植面积已达1.7亿公顷。随着全球转基因作物的大面积商业化种植,转基因植物的安全性越来越多地受到公众关注。安全转基因技术的研发对于转基因植物的商业化生产具有重要意义。文章详细介绍了目前已报道的安全转基因技术原理及其应用现状。按其作用原理和目的将其分为4类:安全选择标记、标记基因删除及基因叠加、基因漂移防控法和基因定点编辑整合技术。其中,安全选择标记按其筛选原理分为糖代谢相关标记、氨基酸代谢相关标记、激素相关标记和抗逆相关标记。与抗生素和除草剂抗性标记相比,这类标记基因及其表达产物对人和其他生物更安全。标记基因删除及基因叠加技术包括共转化法、位点特异性重组法、转座子法、同源重组法以及基于位点特异性重组的基因叠加技术,其中共转化法又包括农杆菌介导的共转化法和基因枪介导的表达盒共转化法。基因叠加技术为复合性状转基因植物研发奠定了基础,有望成为未来多性状转基因植物研发的重要技术之一。基因漂流防控法包括叶绿体转化法和基因拆分法。基因定点编辑和整合技术包括锌指核酸酶、TALEN和CRISPR/Cas9系统介导的基因定点编辑和整合技术。其中,TALEN和CRISPR/Cas9技术,设计简单,成本低,易操作,靶点分布广泛,有望成为安全转基因研发和应用的重要技术。文章对这些技术原理及其应用现状进行了综述,讨论了其优缺点,并展望了安全转基因技术研发重点和发展趋势。
- 王根平杜文明夏兰琴
- 关键词：转基因植物安全标记基因
- 抗草甘膦基因、专用表达载体及其在获得抗草甘膦转基因小麦中的应用
- 本发明公开了抗草甘膦基因、专用表达载体及其在获得抗草甘膦转基因小麦中的应用。本发明提供的一种蛋白，是如下(a)或(b)：(a)由序列表中序列3所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(b)将序列表中序列3所示的氨基酸序列经过一个或...
- 夏兰琴王根平林敏陆伟
- 文献传递
- 红粒小麦Tamyb10单倍型检测及其与穗发芽抗性的关系被引量：9
- 2014年
- 穗发芽是影响小麦品质和产量的重要因素之一,通常红粒小麦比白粒小麦具有较高的穗发芽抗性。转录因子Tamyb10是R-1基因的强候选基因,其表达与否和表达水平决定小麦籽粒颜色。为阐明Tamyb10单倍型与红粒小麦穗发芽抗性的关系,利用已开发的Tamyb10基因分子标记,检测119份来自不同麦区的红粒小麦材料,发现Tamyb10基因(Tamyb10-A1、Tamyb10-B1和Tamyb10-D1位点)可分成7类单倍型,分别是baa、aba、bba、aab、bab、abb和bbb。Tamyb10-D1对穗发芽抗性影响最大,Tamyb10-B1次之,Tamyb10-A1作用最小。Tamyb10单倍型没有明显的地域分布特点,但在东北春麦区,Tamyb10单倍型bbb与红粒品种的高穗发芽抗性相关。
- 王根平毕惠惠孙永伟王成社夏兰琴
- 关键词：穗发芽麦区
- 一种用于获得无标记转基因植物的农杆菌转化载体组合物及其应用
- 本发明公开了一种用于获得无标记转基因植物的农杆菌转化载体组合物及其应用。本发明提供了一种用于获得无标记转基因植物的农杆菌专用载体组合物，由独立包装的重组载体和pClean系列载体的pClean-Soup载体组成；所述重组...
- 夏兰琴王根平杜文明孙永伟
- 文献传递
- 单子叶植物RNA干扰和过表达Gateway载体的构建被引量：11
- 2013年
- 基因枪和农杆菌介导的遗传转化是目前常用的两种单子叶植物遗传转化方法。载体的发展和改良是提高植物遗传转化效率的重要基础,RNA干扰载体和过表达载体是目前通过遗传转化研究植物基因功能的主要工具。Gateway克隆技术是一种基于lambda噬菌体特异位点重组特性的通用克隆技术,该技术可以将大批目的基因方便、快捷地连接到受体载体上。本文利用Gateway技术结合传统酶切、连接方法,构建了适用于单子叶植物基因枪和农杆菌转化的RNA干扰Gateway载体pAHC-PSK-RNAi、pClean-G185-RNAi和过表达Gateway载体pAHC-PSK-OE和pClean-G185-OE,为利用基因枪和农杆菌介导的遗传转化,在小麦和水稻等单子叶植物中进行规模化基因功能研究奠定了基础。
- 毕惠惠王根平王成社夏兰琴
- 关键词：单子叶植物RNA干扰过表达GATEWAY
- 抗草甘膦基因、专用表达载体及其在获得抗草甘膦转基因小麦中的应用
- 本发明公开了抗草甘膦基因、专用表达载体及其在获得抗草甘膦转基因小麦中的应用。本发明提供的一种蛋白，是如下(a)或(b)：(a)由序列表中序列3所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(b)将序列表中序列3所示的氨基酸序列经过一个或...
- 夏兰琴王根平林敏陆伟
- 文献传递
