王望
- 作品数：20 被引量：41H指数：5
- 供职机构：首都医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金北京市优秀人才培养资助更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学农业科学更多>>
- 低氧对大鼠不同级别肺动脉平滑肌细胞功能的影响
- 2014年
- 目的培养鉴定大鼠不同级别肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs),探讨其对缺氧刺激反应性的不同。方法酶消化法分离大鼠不同级别PASMCs并分为3组:大肺动脉组,包括肺动脉干及肺内一级主干;中动脉组,包括肺内主干的第二级和第三级分支;小肺动脉组,包括肺内主干四级分支后的更细小分支。分别给予常氧(DMEM+2%FBS、5%CO2、21%O2、37℃)和低氧(DMEM+2%FBS、5%CO2、3%O2、37℃)培养48 h,用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法和Western blotting检测增生细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的蛋白表达水平的方法检测细胞的增生能力;应用伤口愈合实验检测细胞的迁移能力。结果倒置显微镜下PASMCs呈现长梭形,免疫荧光法检测平滑肌细胞标志物即平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)为阳性,生理情况下(常氧),3组肺动脉平滑肌细胞增生及迁移能力均较一致;低氧培养48 h后,中小肺动脉平滑肌细胞的增生与迁移能力均显著高于大动脉,PCNA结果与MTT结果一致,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论在低氧条件刺激下,不同级别肺动脉平滑肌细胞反应性不同,中小肺动脉平滑肌细胞的增生及迁移能力均显著高于大肺动脉平滑肌细胞。
- 国桓王望孙然刘杰王军
- 关键词：肺动脉平滑肌细胞低氧增生迁移
- 泌尿生理实验操作技术改进研究被引量：3
- 2016年
- 泌尿生理是《生理学》学习的重点和难点内容,《泌尿生理及利尿药物的作用》是医学机能学实验中重要的内容之一,本实验通过观察生理盐水、去甲肾上腺素、葡萄糖、抗利尿激素、利尿药及刺激迷走神经对尿液生成量的影响,使学生加深对尿液生成过程及利尿药物的作用机制的理解。为了提高实验成功率,我们在实验操作中用导尿管插管术代替膀胱插管术以记录尿量,并增加了颈静脉插管术以持续补液。改进后的实验操作吸收了现代实验手段,与临床实践更加接近,激发了学生的学习兴趣和主动性。
- 查旭王望黄海霞李丽娟
- 卵泡抑素样蛋白1促进肺动脉内皮细胞增生、黏附与血管生成被引量：4
- 2020年
- 目的探究卵泡抑素样蛋白1(follistatin-like 1,FSTL1)对人肺动脉内皮细胞(human pulmonary artery endothelial cells,HPAECs)的影响,完善FSTL1在肺动脉高压(pulmonary hypertension,PH)中的作用。方法以人肺动脉内皮细胞为对象,使用qRT-PCR和Western blotting法测定低氧刺激下HPAECs中FSTL1的表达水平。通过给予外源性FSTL1蛋白或小干扰RNA,MTT法观察FSTL1对细胞增生活性的影响。分别借助纤连蛋白、Matrigel基质胶观察FSTL1对内皮细胞黏附与血管形成能力的影响。结果低氧刺激HPAECs 12 h和24 h后,FSTL1的mRNA及蛋白质的表达量均提高(P<0.01)。常氧下外源给予FSTL1,250μg/L、500μg/L组的细胞增生活性与对照组相比明显增高(P<0.01);低氧条件下siRNA干扰组HPAECs增生活性与对照组相比明显降低(P<0.001)。常氧下外源给予250μg/L的FSTL1刺激24 h后HPAECs黏附数量增多(P<0.001),生成血管总长度及新生血管数目均增加(P<0.001)。结论FSTL1促进HPAECs增生、黏附与血管生成。
- 沙宇惠高阳刘杰齐先梅韩璐璐王望
- 关键词：低氧
- 大鼠不同级别肺动脉平滑肌细胞对血小板源性生长因子的反应性及其意义被引量：1
- 2014年
- 目的分离培养并鉴定大鼠不同分支级别肺动脉平滑肌细胞（PASMC），观察其对血小板源性生长因子（PDGF）反应性的差异，探讨相同刺激因素下，不同级别肺血管病理改变不同的细胞学机制。方法分离SD大鼠肺动脉并按解剖学分支分为3组：大动脉组，包括肺动脉干及肺内一级主干；中动脉组，指肺内主干二、三级分支；小动脉组，包括肺内动脉四级及以上分支。分离培养不同分支PASMC并用平滑肌细胞抗体进行免疫荧光染色鉴定。给予PDGF刺激，四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测细胞活性；Western blot方法测定增殖细胞核抗原表达水平变化以反映细胞增殖能力；伤口愈合实验检测细胞迁移能力的变化。结果不同分支PASMC在光学显微镜下观察无明显差别；免疫荧光染色结果显示，三种常用的平滑肌细胞标志物即平滑肌肌动蛋白（a-SMA）、钙结合蛋白（S100A4）和平滑肌调宁蛋白（calponin）抗体染色均呈阳性，各组间荧光强度无明显差异。正常培养条件下3组细胞增殖率分别为（137．0±12．1）％、（166．1±23．6）％、（156．8±2．5）％，Western blot检测PCNA表达灰度值分别为（0．41±0．10）、（0．55±0．18）和（0．48±0．28），迁移到空白区域的细胞个数分别为（49±14）、（68±13）和（71±7），组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。给予10ug/L PDGF干预48h后，中、小动脉组PASMC的增殖率分别为（215．7±17．8）％、（195．2±6．6）％，均高于大动脉组[（167．0±14．4）％，均P〈0．01]，干预后3组细胞内PCNA蛋白表达灰度值分别为（0．93±0．11）、（1．21±0．14）和（0．62±0．03），迁移到空白区域的细胞个数分别为（194±46）、（171±16）和（68±21），中、小肺动脉组与大动脉组相比差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结论尽管不同分支PASMC通常无明显差异，但
- 国桓杨汀王望刘杰孙然王军王辰
- 关键词：肺动脉平滑肌细胞血小板源性生长因子增殖迁移
- 抑制Notch3通过降低库容性钙内流抑制低氧诱导的人肺动脉平滑肌细胞增殖
- 目的:利用低氧诱导的人肺动脉平滑肌细胞(HPASMCs)模型,观察NotCh3信号对细胞增殖和钙离子通道的影响,探讨Notch3在低氧HPASMCs增殖中的作用及机制.方法:采用P3-P8代HPASMCs的培养细胞,饥饿...
- 梁燕王辰缪冉王望王颖黄骁舾冷冬刘杰贾艳军王军
- 关键词：增殖反应
- 雷帕霉素对野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压及肺血管重构的影响被引量：4
- 2013年
- 目的探讨雷帕霉素对野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压及肺血管重构的干预作用。方法雄性SD大鼠采用抽签法随机分为3组:对照组、野百合碱组和雷帕霉素干预组。采用经颈外静脉右心导管插管术检测右心室收缩压;计算右心室肥厚指数;采用HE染色,观察肺细小动脉结构改变情况。结果与对照组相比,野百合碱组大鼠体质量明显减轻,右心室收缩压显著升高,右心室肥厚指数明显增加,肺动脉重构显著。与野百合碱组相比,雷帕霉素干预组大鼠虽然体质量显著减轻,但右心室收缩压明显改善;右心室肥厚指数显著降低;肺动脉重构程度明显减轻。结论雷帕霉素有效干预了野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压及肺血管重构的形成。提示雷帕霉素有可能作为临床上预防和治疗肺动脉高压的新药。
- 刘杰杜雨轩王望国桓王军王辰
- 关键词：雷帕霉素野百合碱肺动脉高压肺血管重构
- 抑制Notch3通过降低库容性钙内流抑制低氧诱导的人肺动脉平滑肌细胞增殖
- 目的利用低氧诱导的人肺动脉平滑肌细胞(humanpulmonary arterial smooth muscle cells,HPASMCs)模型,观察Notch3信号对细胞增殖和钙离子通道的影响,探讨Notch3在低氧...
- 梁燕缪冉王望王颖黄骁舾王军王辰
- 小鼠急性自体血栓性肺栓塞后内皮型一氧化氮合酶及一氧化氮表达变化被引量：5
- 2013年
- 目的:建立操作简便、成功率高、耗资低廉的急性血栓性肺栓塞(acute pulmonary thrombo-embolism,APE)小鼠动物模型,并观察肺内内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)及血清一氧化氮(nitric oxide,NO)的表达变化情况。方法:雄性C57BL/6小鼠(n=234),随机分为三组,即正常对照组(n=39)、假手术组(n=66)和模型组(n=129),各组又随机分为1 h、1d和2d三个亚组。模型组自右颈静脉注入自体血栓栓子,假手术组以0.9%氨化钠偏代替自体血栓栓子注入。到指定时间点处死小鼠,取肺组织进行大体观察,苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织和肺血管结构的变化,Mallory氏磷钨酸苏木精(PTAH)染色显示血管内血栓中的纤维素。以试剂盒测定外周血NO水平,免疫组化观察肺组织中eNOS蛋白的表达情况。结果:模型组HE染色光镜下可见注入的血栓栓子,PTAH染色光镜下栓子中可见蓝紫色纤维素网状结构,且大多数栓子栓塞于肺动脉段水平。与1 h模型组相比,1 d和2 d模型组的栓子数目逐渐减少(分别约为1 h模型组的90%和30%)。另外,部分远端肺动脉中发现有大量红细胞聚集,可能是由于继发血栓的形成。注栓1 d后,模型组与正常让外周血NO水平(22.666±2.937)μmol/L与正常对照组[(50.596±5.799)μmol/L,P<0.01]和假手术组[(37.797±4.880)μmol/L,P<0.05]比较差异有统计学意义。与正常组及假手术组相比,1 d模型组肺动脉内皮eNOS蛋白表达有所增高。结论:用自体血栓栓子可成功诱导小鼠APE形成,APE后血清NO生成减少,肺动脉内皮eNOS表达升高。
- 缪冉卢丽瑾梁燕刘杰王望孙海梅万钧
- 关键词：肺栓塞内皮型一氧化氮合酶一氧化氮动物模型
- 雷帕霉素对小鼠慢性低氧性肺高压及肺血管重构的影响
- 目的研究慢性低氧对小鼠肺动脉压力及肺血管重构的影响以及雷帕霉素的干预作用。方法8周雄性的C57BL/6小鼠,随机分为常氧组和低氧组,各组又随机分为空白对照组、安慰剂组(羧甲基纤维素组)、雷帕霉素组(3mg/Kg*d,i....
- 王望刘杰缪冉李晶李积风于晓敏郭丽娟林媛王辰王军
- 文献传递
- 家兔呼吸运动不同记录方法的比较
- 2016年
- 反映呼吸运动的指标多种多样,医学机能学实验中常用的记录家兔呼吸运动的实验方法有膈神经放电、膈肌放电、膈肌收缩和呼吸流量。各种记录方法是否客观、准确、便于观察,直接影响实验的效果。就家兔呼吸运动的几种记录方法进行比较分析,探讨各个方法的利弊,以期能够选择适宜的记录方法并加以优化,为教师教学及同学们学习提供参考。
- 厉天李丽娟黄海霞王望
