王晓英
- 作品数：63 被引量：745H指数：13
- 供职机构：中国动物疫病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项科技部科研院所技术开发研究专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 鸡胴体空肠弯曲菌分离株的耐药性分析被引量：3
- 2016年
- 为分析并比较我国5省份屠宰场鸡胴体分离的空肠弯曲菌的耐药状况,采用琼脂稀释法测定鸡酮体空肠弯曲菌分离株对8类14组抗生素的耐药性。结果表明:72株空肠弯曲菌分离株对8类14组抗生素均有不同程度的耐药,其中对喹诺酮类、四环素类、头孢菌素类显示为高度耐药(环丙沙星98.6%、萘啶酸93.1%,四环素94.4%、多西环素90.3%,头孢他啶87.5%);对青霉素类、磺胺类显示为中等耐药(阿莫西林/克拉维酸45.8%,甲氧苄啶/磺胺甲噁唑44.4%);对大环内酯类、氨基糖苷类、林可酰胺类显示为低耐药(红霉素2.8%、阿奇霉素6.9%,庆大霉素18.1%、链霉素4.2%,克林霉素4.2%);对碳青霉烯类(美罗培南)和氯霉素均显示为全敏感。72株分离株均对4种及以上抗生素有耐药性,共产生31种耐药谱型,其中以TET-CIP-NAL-CAZ-DOX型最多,占比22.2%。各省份之间耐药状况差异不明显。说明我国5省份屠宰场从鸡酮体分离的空肠弯曲菌均有不同程度的耐药,多重耐药菌占比较高,应加强鸡场养殖环节抗生素使用的监管,防止药物滥用,保障动物和人类健康。
- 曲萍王明忠宋晓晖胡冬梅孙雨董浩赵柏林王晓英孙爱萍
- 关键词：屠宰场空肠弯曲菌药敏测定耐药谱
- 牛副结核病的流行病学特征与实验室诊断技术研究进展被引量：8
- 2015年
- 牛副结核病(bovine paratuberculosis)是由副结核分支杆菌引起的以牛慢性增生性、顽固性肠炎和进行性消瘦为特征的人畜共患传染病。其临床症状与病理变化是顽固性腹泻、渐进性消瘦、慢性肉芽肿回肠炎,肠粘膜增厚并形成皱褶。除常规的临床诊断外,牛副结核病的确诊依赖于实验室诊断方法,主要有病原学诊断、血清学诊断和分子生物学诊断等方法。牛副结核病给畜牧业造成很大的损失。由于本病潜伏期长,传播快,加之人工培养副结核分枝杆菌难度又高,因此加强对该病的病原学、流行病学特征的认识,加快实验室诊断方法的研究对其综合防控工作具有十分重要的意义。作者主要介绍了目前国内外牛副结核病流行病学特征和诊断方法的研究进展,并比较了各种方法的优点和缺点,为牛副结核病的临床快速诊断和深入研究提供科学依据。
- 孙雨马世春时建忠魏巍董浩徐一苏增华池丽娟马继红王晓英
- 关键词：牛副结核病流行病学
- 串珠镰刀菌伏马菌素产毒株聚合酶链反应检测方法的研究被引量：13
- 2003年
- 以伏马菌素生物合成所必需的多酮肽合成酶基因fum5为基础 ,设计了 3对特异性引物P1 P2、P3 P4和Fum5F2 1 Fum5 1,建立了串珠镰刀菌伏马菌素产毒株PCR检测方法。以 5株ATCC典型串珠镰刀菌及其他菌株为参考 ,其中ATCC 5 2 5 3 9为伏马菌素B1(FB1)产毒株 ,测定了PCR方法的特异性。ATCC 5 2 5 3 9扩增结果阳性 ,该 3对引物分别扩增出 880bp、70 2bp和 10 40bpDNA片段 ,非伏马菌素产毒株ATCC 3 8946、ATCC2 62 63、ATCC 12 763、ATCC 3 80 16及其他阴性对照菌株 (禾谷镰刀菌、梨孢镰刀菌、木贼镰刀菌、三线镰刀菌、黄曲霉、拟青霉和大肠杆菌O15 7)结果阴性 ,证明引物具有很好的特异性。同时以不同稀释度的ATCC 5 2 5 3 9DNA为模板 ,测定了 3对引物PCR的敏感性 ,P1 P2每PCR反应的检出限为 10 0pg ,P3 P4和Fum5F2 1 Fum5R1每PCR反应的检出限均为 10pg ,分别相当于每PCR反应检出 10 4和 10 3个孢子。 3对引物PCR检测国内不同地区分离的 3 2株串珠镰刀菌及交孢变种 ,2 6株为伏马菌素产毒株 ,6株为非伏马菌素产毒株。并对部分产毒株PCR(P3 P4)产物 ,应用内切酶EcoRV和BamHI,进行限制片段长度多态性 (RFLP)分析 ,分别产生 181bp、5 2 1bp 2个和 116bp、2 5 8bp、3 2 8bp 3个DNA片段 ,与文献报道值一致 。
- 王晓英刘秀梅
- 关键词：串珠镰刀菌聚合酶链反应
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒欧洲型、美洲型双重微滴数字PCR绝对定量检测试剂盒
- 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒欧洲型、美洲型双重微滴数字PCR绝对定量检测试剂盒。本发明提供了的引物探针组合由LV‑F1R1P1和VR2332‑F1R1P1组成；LV‑F1R1P1由LV‑F1、LV‑R1和LV‑...
- 原霖宋晓晖王传彬周智汪葆玥杨林吴佳俊倪建强韩焘訾占超王晓英毕一鸣王静陈亚娜
- 增菌-PCR法与传统方法检测猪肉中单增李斯特菌的比较研究被引量：6
- 2013年
- 目的比较增菌-PCR法与传统方法检测猪肉中单增李斯特菌的敏感性、特异性和时效性。方法以hlyA基因为基础,选择特异性引物,建立并优化单增李斯特菌PCR检测方法。选用CMCC54004,进行人工染菌实验,染菌量分别为每25 g样本1.3 CFU、13 CFU、1.3×102CFU、1.3×103CFU、1.3×104CFU、1.3×105CFU和1.3×106CFU。在总增菌的不同时间点上,取各染菌量下的培养液1 ml,提取DNA进行PCR检测。在总增菌46 h划线接种选择性平板,用传统方法进行分离鉴定,比较两种方法检测的敏感性和特异性。采集24份市售猪肉样本,应用这两种方法进行检测,进一步比较两者的阳性检出率。结果人工染菌样本在增菌46 h后,PCR法检出限可达每25 g猪肉样本1.3 CFU,与传统方法检出限一致,但比传统方法需时提前3 d^5 d。24份市售样本,增菌-PCR法的阳性率为70.83%(17/24),与传统方法结果一致。结论增菌-PCR法具有快速简便、敏感特异等优点,较传统方法大大缩短了检出时限。
- 闫琳王晓英郭云昌裴晓燕余东敏杨大进
- 应用Taqman实时PCR法检测禽肉中沙门菌的研究被引量：4
- 2014年
- 目的 建立敏感快速的检测禽肉中沙门菌的实时PCR法.方法 以invA基因为基础,建立RT-PCR法并验证其特异性.选用肠炎沙门菌CMCC 50041,制备不同浓度的纯菌液,用RT-PCR进行检测,制作标准曲线并计算扩增效率.进行人工染菌实验,染菌量分别为每25 g鸡肉样本1、10、102、103、104、105和106 CFU.分别在增菌0、4、8、12、18 h取1 ml培养液,提取DNA进行RT-PCR检测,并同时用PCR和传统方法进行检测,比较3种方法检测的敏感性和特异性.采集16份市售整鸡样本,用这3种方法进行检测,进一步比较三者的阳性检出情况.结果 建立的RT-PCR法特异性好,对纯菌液的最低检测限为5.2×103 CFU/ml,在5.2×103～ 5.2×1010 CFU/ml范围内,菌浓度的对数值和检测结果的Ct值线性关系良好,R2=0.999.人工染菌样本在增菌12 h后,RT-PCR法检出限可达l CFU/25 g,与PCR检测的敏感性一致,比传统方法的检出限敏感10倍.根据增菌12 h的检测结果,建立了RT-PCR样本标准曲线.采用RT-PCR检测16份禽肉样本,检出7份阳性,与PCR一致,高于传统方法（5份阳性）.根据样本标准曲线,对检测样本进行定量分析,确定了阳性样本中初始含量菌.结论 所建立的RT-PCR具有快速简便、敏感特异等优点,适用于禽肉中沙门菌的快速定量检测.
- 闫琳王晓英郭云昌裴晓燕余东敏杨大进
- 关键词：聚合酶链反应食品检查
- 猪流感病毒的流行病学特征与诊断防治措施被引量：2
- 2014年
- 猪流行性感冒以发生突然、潜伏期短、感染率高和死亡率低为主要特征。猪流感是一种人畜共患传染病,该病毒在全世界各国的猪群中普遍存在,近几年也有报道猪流感病毒感染人的病例。猪感染流感病毒后很容易与其他细菌病发生继发感染,造成严重的经济损失。因此,加强对该病的病原学、流行病学特征的认识、加快实验室诊断方法的研究对其综合防控工作具有十分重要的意义。主要介绍了目前国内外对猪流感病毒的流行病学特征及综合性防控措施的研究进展,以期为其防控提供一定的理论依据。
- 孙雨马世春魏巍肖开提.阿不都克里木徐一董浩王晓英
- 关键词：猪流感流行病学
- 产气荚膜梭菌多毒素融合蛋白的表达与纯化及基因工程亚单位多价疫苗的制备被引量：4
- 2017年
- 产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)的α、β2和ε毒素是病原的主要外毒素,也是制备预防该病基因工程亚单位多价疫苗的主要研究对象。本研究通过优化密码子、去除蛋白信号肽、选择亲水性与抗原性较好的序列、同时优化表达条件等方法的探索,在大肠杆菌表达系统中获得了高效表达的可溶性α-β2-ε融合蛋白;用该蛋白免疫小鼠后可产生较高水平的血清抗体,针对A、B、C和D型产气荚膜梭菌的免疫保护率分别为100%,100%,90%,100%;小鼠三免后7~14d的抗体效价达到峰值。本研究构建了多毒素融合蛋白表达载体Pet30a-α-β2-ε,并成功表达与纯化出了高效可溶性的目的蛋白,且表达出的融合蛋白具有良好的免疫原性,可以进一步用于羊三联四防基因工程亚单位疫苗的研制,具有较强的研究价值和应用前景。
- 孙雨翟新验董浩赵柏林王晓英曲萍胡冬梅杨天意石慧宋晓晖
- 关键词：产气荚膜梭菌融合蛋白基因工程亚单位疫苗
- 虎红平板凝集试验和胶体金免疫层析法诊断布鲁氏菌病效果的比较被引量：10
- 2016年
- 为了比较虎红平板凝集试验(RBPT)和胶体金免疫层析法(GICA)诊断布鲁氏菌病的效果,658份牛血清和365份羊血清进行了检测,并通过试管凝集试验(SAT)对两种方法筛选到的阳性样品进行了确证。RBPT法检测出103份阳性牛血清,44份阳性羊血清;GICA法检测出129份阳性牛血清,65份阳性羊血清。通过SAT法验证结果显示牛血清有84份为阳性,羊血清有44份为阳性。GICA法的敏感性要高于RBPT法,可以作为家畜布病初筛试验的一种比较理想的检测方法。
- 董浩孙雨王晓英马继红池丽娟徐一魏巍苏增华马世春宋晓晖
- 关键词：布病胶体金免疫层析法
- 产气荚膜梭菌外毒素基因与相关疫苗的研究进展被引量：13
- 2016年
- 产气荚膜梭菌也称魏氏梭菌,是引起气性坏疽、肠毒血症、出血性肠炎等反刍动物疾病的主要病原。该菌能够分泌α、β、ε、ι、γ、η、θ、κ、λ、μ、ν等多种外毒素,其中a、β、ε、ι毒素是主要的致病因子。产气荚膜梭菌引起的疾病通常发病急、死亡快,因此,疫苗免疫是预防该病的主要方法。近年来,随着对a、β、ε等毒素功能研究的深入,研究毒素相关的基因工程亚单位疫苗成为研究热点,并且有望弥补传统类毒素疫苗的安全性不高、稳定性差等缺点。文章从产气荚膜梭菌的病原学特点、主要外毒素的致病机制以及毒素相关疫苗的研究进展进行综述,以期为产气荚膜梭菌的综合防控和基因工程亚单位疫苗与核酸疫苗的研发提供一定的参考。
- 孙雨王晓英董浩曲萍胡冬梅赵柏林石慧宋晓晖
- 关键词：产气荚膜梭菌外毒素致病机制疫苗
