王文杰
- 作品数：8 被引量：12H指数：2
- 供职机构：鄂尔多斯市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：内蒙古自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 一种重组螺旋藻超氧化物歧化酶制备工艺
- 一种重组螺旋藻超氧化物歧化酶及其制备工艺，属于超氧化物歧化酶制备技术，克隆钝顶螺旋藻超氧化物歧化酶的编码基因sod，构建原核表达载体pET30a-sod，并在大肠杆菌BL21(DE3)里表达重组SOD；建立重组菌的发酵罐...
- 高金亮王文杰姜晓杰
- 文献传递
- 钝顶螺旋藻超氧化物歧化酶的原核表达及纯化被引量：3
- 2013年
- 目的原核表达并纯化钝顶螺旋藻超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)。方法利用PCR技术扩增钝顶螺旋藻sod基因,克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,构建重组表达质粒pGEX-4T-sod,转化大肠埃希菌BL21(DE3)pLysS,IPTG诱导表达。表达的重组融合蛋白SOD-GST利用蛋白纯化树脂Glutathione SepharoseTM4 Fast Flow纯化后,采用改进的邻苯三酚自氧化法测定重组SOD的活性。结果重组表达质粒pGEX-4T-sod经双酶切和测序证实构建正确;表达的融合蛋白SOD-GST的相对分子质量约为49 000,表达量占菌体总蛋白的30.2%,在重组菌裂解上清和沉淀中均有融合蛋白的表达;纯化的融合蛋白纯度为82.4%,浓度为2.8 mg/ml,从可溶性表达产物中纯化的酶的比活性为1 440 U/mg。结论在大肠埃希菌中成功表达并纯化了具有生物学活性的钝顶螺旋藻SOD,为其产业化生产奠定了基础。
- 赫慧琛姜晓杰高金亮徐萌杰王英王文杰李炜祁美荣
- 关键词：钝顶螺旋藻超氧化物歧化酶原核细胞基因表达纯化
- 鄂尔多斯市出疹性疾病流行区人群麻疹风疹血清流行病学研究
- 2003年春季以来,我市麻疹监测系统报告大量出疹性疾病病例,表现为传播迅速、流行多呈点状暴发, 病例大多数集中在中小学、临床过程轻微等特点。我们于2004年6-8月进行了一次较大规模的血清流行病学调查研究。现将结果报告如...
- 王文杰张双一斯琴赵玉英
- 文献传递
- 钝顶螺旋藻sod基因真核表达载体的构建与表达被引量：1
- 2014年
- 目的:在毕赤酵母中表达钝顶螺旋藻超氧化物歧化酶SOD。方法:以质粒p ET30-sod为模板,采用PCR扩增sod基因,并将其与表达载体p PIC9K相连,构建重组表达质粒p PIC9K-sod。将重组质粒p PIC9K-sod用限制性内切酶PmeⅠ线性化,并电转化入毕赤酵母GS115。利用单菌落PCR筛选整合有重组质粒的阳性转化子,用甲醇进行诱导表达,并在5L发酵罐内进行发酵表达目的蛋白。用改进的邻苯三酚自氧化法测定重组SOD的活性。结果:成功构建了钝顶螺旋藻的sod的真核表达载体,并在毕赤酵母中表达了分子量为22k Da的重组蛋白SOD。发酵罐高密度发酵所获目的蛋白的平均浓度为0.36±0.4 mg/m L,比活性为409±17U/mg。结论:在毕赤酵母中表达了分子量为22k Da的钝顶螺旋藻SOD。
- 姜晓杰王文杰高金亮李炜祁美荣
- 关键词：钝顶螺旋藻超氧化物歧化酶(SOD)毕赤酵母发酵
- 钝顶螺旋藻别藻蓝蛋白α、β亚基基因的克隆及其原核表达被引量：2
- 2015年
- 目的克隆钝顶螺旋藻别藻蓝蛋白(allophycocyanin,APC)α、β亚基的基因序列,分别构建该蛋白的α和β亚基的原核表达载体,并在大肠埃希菌中进行表达。方法 PCR扩增钝顶螺旋藻APC基因(apc)序列,克隆至p GEM-T easy载体中,测序分析插入片段的正确性。以克隆的apc基因为模板,分别扩增APC的α和β亚基的编码基因apc A和apc B,测序分析正确后,分别克隆入表达载体p GEX-4T-1中,构建重组质粒p GEX-4T-apc A和p GEX-4T-apc B。将重组质粒转化入大肠埃希菌BL21(DE3)p Lys S感受态细胞中,IPTG诱导表达,表达产物经Glutathione Sepharose TM 4Fast Flow树脂纯化,Bradford法测定纯化蛋白的浓度。结果成功克隆了钝顶螺旋藻的APCα和β亚基的编码基因apc A和apc B,构建的重组质粒经测序证明构建正确,表达的融合蛋白α-APC-GST和β-APC-GST的相对分子质量均为43 000,其中α-APC-GST主要以可溶性形式存在,表达量占菌体总蛋白的32.1%,纯化后的蛋白纯度达85%,蛋白浓度为0.3 mg/ml;β-APC-GST主要以包涵体形式存在,表达量占菌体总蛋白的31.4%,纯化后的蛋白纯度达65.4%,蛋白浓度为0.1 mg/ml。结论已成功克隆并在大肠埃希菌中表达了钝顶螺旋藻APC的α和β亚基。
- 姜晓杰高金亮祁美荣徐萌杰王文杰李炜
- 关键词：钝顶螺旋藻基因原核表达
- 一种含氯消毒液杀菌效果观察被引量：6
- 2013年
- 目的观察一种以次氯酸为有效成分的消毒液的杀菌效果。方法用悬液定量杀菌试验方法对该消毒液进行了实验室杀菌效果观察。结果用有效氯浓度为100 mg/L的该消毒液作用5 min,对悬液内沙门菌、志贺菌、单增李斯特杆菌、绿脓杆菌、肠出血性大肠杆菌(O157∶H7)和耐热大肠菌群的平均杀灭对数值均大于5.00。结论这种含氯消毒液对试验所用6种细菌具有良好的杀菌效果。
- 姜晓杰王文杰祁美荣陈向红高金亮
- 关键词：次氯酸消毒液杀菌效果
- 鄂尔多斯市种子公司仓库鼠害防制
- 2007年
- 党丽祁爱民王文杰
- 关键词：鼠害防制种子灭鼠成果鼠密度溴敌隆
- 钝顶螺旋藻超氧化物歧化酶的原核表达
- 目的：构建钝顶螺旋藻超氧化物歧化酶(SOD)的原核表达载体并在大肠杆菌内表达螺旋藻SOD.
方法：利用PCR技术扩增钝顶螺旋藻的sod基因,将此基因克隆入表达载体pGEX--4T-1,获得重组质粒pGEX-4T...
- 高金亮王文杰姜晓杰李炜祁美荣
- 关键词：钝顶螺旋藻超氧化物歧化酶原核表达
- 文献传递
