王悦
- 作品数：21 被引量：12H指数：2
- 供职机构：西安交通大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金卫生行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- 一种用于外科ICU的管道清洗装置
- 本实用新型公开了一种用于外科ICU的管道清洗装置，包括设备柜、管道装配台和水泵，还包括液剂箱和蒸汽发生器，所述设备柜内底部一侧通过螺栓安装有支撑隔板，所述设备柜内另一侧通过螺栓安装有蒸汽发生器，所述设备柜顶部通过螺栓装配...
- 王悦申存毅吴培
- 文献传递
- 人促甲状腺激素受体A亚单位蛋白在昆虫细胞体系中的分泌性表达
- 2023年
- 目的拟构建昆虫细胞分泌表达体系,在草地夜蛾卵巢细胞分泌性促甲状腺激素受体(thyroid stimulating hormone receptor,TSHR)A亚单位蛋白。方法将TSHR A亚单位蛋白(22-289)和绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)基因连接到质粒,并通过转化、蓝白斑筛选获得重组杆粒,将其转染入sf9昆虫细胞收获重组杆状病毒,扩增并测定滴度。最终通过蛋白印迹实验鉴定重组蛋白的表达并优化表达条件。结果在蛋白表达体系的构建过程中,PCR鉴定和测序均证实了重组质粒和重组杆粒序列的正确性。将重组杆粒转染入细胞后观察到病毒出芽迹象,空斑实验鉴定P1代病毒的滴度为2×10^(7) pfu/m。蛋白印迹显示重组蛋白分子质量为55 ku,主要在培养基中。蛋白表达的最佳感染复数(multiplicity of infection,MOI)为1,最佳感染时程为72 h。结论本研究构建了TSHR A亚单位的昆虫细胞杆状病毒表达体系,该体系能够外泌性表达分子质量为55 ku左右的蛋白TSHR 22-289,且蛋白能够成功的糖基化修饰。该系统为其工业化平台的建设及生产提供前期基础,也针对日后TSHR蛋白的研究和Graves病的病因预防提供了有用的工具。
- 张萌张恺宁陈子怡王玲伍丽萍王悦刘冰施秉银
- 关键词：分泌型表达SF9细胞GRAVES病
- 耐性肽hCDR1诱发小鼠狼疮样病变的研究
- 2017年
- 目的探讨基于人dsDNA抗体分子互补决定区1(CDR1)的耐受肽(tolerizing peptide)hCDR1作为致病原诱发小鼠狼疮样病变的可能。方法 6-8周龄B6D2F1雌性小鼠40只,随机分为hCDR1 20μg组、100μg组、500μg组、阴性对照组和阳性对照组。完全弗氏佐剂乳化hCDR1,足跖及尾根部多点皮下注射免疫h CDR1组小鼠,间隔3周,不完全弗氏佐剂乳化hCDR1加强免疫1次;阴性对照组用不含hCDR1的佐剂皮下免疫,阳性对照组小鼠接受DBA/2小鼠脾脏及胸腺单细胞悬液尾静脉注射形成慢性移植物抗宿主样狼疮鼠(SLE-c GVHD)。尿蛋白试纸监测小鼠每周蛋白尿变化。首次免疫后9周采血,检测血液常规;ELISA法检测血清中h CDR1抗体、dsDNA抗体、组蛋白抗体及总IgG抗体;留取肾脏,直接免疫荧光检测肾脏免疫复合物沉积情况;HE染色观察肾脏病理改变。结果 hCDR1 100μg组和500μg组小鼠出现狼疮样改变。与阴性对照组相比,100μg组小鼠和500μg组小鼠血清dsDNA抗体、组蛋白抗体OD值增加(P<0.05);外周血血小板减少(P<0.05),白细胞增加(P<0.05);75%小鼠出现狼疮样肾脏改变,表现为尿蛋白阳性,肾小球增生以及肾小球基底膜IgG免疫复合物的沉积。20μg剂量组小鼠及阴性对照组小鼠未出现狼疮样改变。结论 hCDR1具有免疫原性,可以作为致病原诱发B6D2F1小鼠出现狼疮样病变。
- 孙玉石杨飞暴玲玉王悦赵凤仪焦翔杨静施秉银
- 关键词：移植物抗宿主病过继免疫小鼠
- Graves甲亢和Graves突眼治疗前后TBX21、GATA3、RORC、FOXP3 mRNA表达水平的变化被引量：1
- 2017年
- 目的探讨Graves甲亢和Graves眼病患者不同治疗方法治疗前后外周血单个核细胞中Th1、Th2、Th17、Treg细胞转录因子TBX21、GATA3、RORC、FOXP3 mRNA表达水平的变化及其意义。方法选择2014年9月至2016年5月就诊于西安交通大学第一附属医院内分泌门诊的新发未治的Graves甲亢患者12例,给予甲硫咪唑治疗(MMI);Graves眼病患者12例给予甲强龙冲击治疗(IVMP),采集患者治疗前后外周血,提取外周血单个核细胞RNA,通过实时荧光定量PCR检测Th1、Th2、Th17及Treg细胞转录因子(TBX21、GATA3、RORC及FOXP3)mRNA的表达情况。结果 Graves甲亢病组治疗缓解后与治疗前比较,RORC[(0.090 2±0.036 4)vs(0.292 6±0.198 6)]和FOXP3[(0.088 9±0.058 7)vs(0.148 6±0.072 6)]的表达均明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05);Graves眼病组治疗前后相比TBX21[(0.043 7±0.026 0)vs(0.043 6±0.019 6)]、GATA3[(0.040 5±0.023 3)vs(0.043 7±0.015 8)]、RORC[(0.184 4±0.094 9)vs(0.174 5±0.066 5)]及FOXP3[(0.1324±0.075 7)vs(0.187 0±0.059 5)]差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前Graves眼病组与Graves病组比较RORC[(0.184 4±0.094 9)vs(0.090 2±0.036 4)]的表达显著高,且差异有统计学意义(P<0.01)。结论 MMI和IVMP治疗会影响T细胞的分化;各T细胞亚群转录因子mRNA表达水平的变化与疾病的发展和治疗结果密切相关。
- 陈谱王悦施秉银
- 关键词：GRAVES甲亢GRAVES眼病GATA3RORCFOXP3
- Graves病和Graves眼病患者T细胞受体谱系研究被引量：2
- 2020年
- 目的通过对Graves病(Graves′disease,GD)和Graves眼病(thyroid associated ophthalmopathy,TAO)患者的T细胞受体(T cell receptor,TCR)测序,鉴定GD和TAO特异性TCR家族,为临床早期精确诊断提供依据。方法于西安交通大学第一附属医院门诊收集9例GD和6例TAO患者。对GD和TAO患者于诊断时采集外周血。收集20例与患者年龄和性别相匹配的健康对照外周血。分离外周血单个核细胞并提取RNA进行TCR免疫组库测序,并进行后续高通量数据挖掘分析。结果GD和TAO患者TCR多样性显著低于健康对照。挖掘TCR高通量测序数据,可分别构建GD和TAO两种疾病的特征性TCR数据库,分别包含157和116个VJ家族。这些VJ家族中存在两种疾病共有的家族,也存在两种疾病各自特有的家族。结论GD和TAO存在共同的发病基础,但是在某种程度上还是拥有不同的优势T细胞克隆,从而介导不同的免疫应答。因此,GD和TAO患者的特征性TCR可作为一种潜在的分子标志物。
- 王悦刘宇峰伍丽萍郭辉施秉银
- 关键词：GRAVES病GRAVES眼病高通量测序
- 雷帕霉素改善Graves眼病小鼠CD4^(+)T细胞亚群失衡的研究
- 2023年
- 目的本文从Graves眼病(Graves′ophthalmopathy,GO)的发病机制出发,旨在研究雷帕霉素对于GO小鼠CD4^(+)T细胞亚群紊乱的调节作用,进而探索其对于GO小鼠眼病及甲状腺功能亢进症(甲亢)表型的影响,为GO的病因治疗提供新的思路和可能。方法利用表达TSHR A亚单位的重组腺病毒肌肉重复9次注射Balb/c小鼠制备GO小鼠。通过在饲料中添加雷帕霉素(14 ppm)给予小鼠干预,末次免疫后4周安乐死小鼠,收集外周血、甲状腺、眼眶、脾脏等组织检测TT4、促甲状腺素受体抗体(TRAb)、甲状腺病理改变和眼眶病理改变,并通过流式细胞学分析、免疫组化等评估CD4^(+)T细胞亚群等免疫学相关指标。结果GO小鼠造模后不仅表现以球后纤维化和球后脂肪新生的眼部病变(80%~90%),还表现为自身抗体升高和血清总甲状腺素增高的甲亢病变(80%)。球后进一步的脾脏细胞流式细胞学、甲状腺免疫组化和眶后组织的免疫组化显示GO小鼠CD4^(+)T细胞亚群的偏移:Th1/Th2细胞平衡向Th1倾斜,并伴随有Treg细胞比率降低。雷帕霉素干预后的小鼠脾脏细胞流式细胞学显示Th1、Th17细胞比率回落和Th2、Treg细胞比率回升。甲状腺和眼眶组织免疫组化也显示Th1/Th2细胞失衡和Treg细胞降低得到了改善。结论GO小鼠模型表现了显著的CD4^(+)T细胞亚群失衡,而雷帕霉素不仅可以调节GO小鼠的CD4^(+)T细胞亚群紊乱,还能有效改善GO小鼠眼病及甲亢表型。因此,CD4^(+)T细胞亚群失衡是GO的病因干预环节之一,雷帕霉素是潜在的GO干预方式,未来可以进行随机临床研究进一步探索研究。
- 张萌王玲丁习何明倩陈子怡吴晓燕伍丽萍施秉银王悦
- 关键词：GRAVES眼病雷帕霉素BALB/C小鼠动物模型
- T细胞数据处理方法及装置
- 本发明实施例提供一种T细胞数据处理方法及装置，所述T细胞数据处理方法包括：获取多组样本数据，每组所述样本数据中包括不同特征对应的T细胞数据集；计算每一组T细胞数据集的T细胞受体统计量；将每一组T细胞受体统计量通过交叉验证...
- 施秉银王悦刘宇峰叶凯杨晓飞蔺佳栋
- 文献传递
- 雷帕霉素在难治性Graves病中的制药应用
- 本发明首次公开了雷帕霉素治疗难治性GD的制药应用，雷帕霉素+甲巯咪唑联合治疗可以改善难治性GD患者的TSH、TRAb水平；并且，患者体内的Treg/CD4+T比例升高，Th17/CD4+T比例以及Th17/Treg的比值...
- 施秉银王悦陈子怡胡诗倩
- 文献传递
- 一种基因免疫诱导的甲状腺相关性眼病动物模型的构建方法及雷帕霉素类药物的应用
- 本发明公开了一种基因免疫诱导的甲状腺相关性眼病动物模型的构建方法及雷帕霉素类药物的应用。构建方法为：1)将表达人促甲状腺激素受体的腺病毒的母液按照1：50的体积比用PBS稀释，得到Ad‑TSHR稀释液；2)在第0周的第1...
- 王悦施秉银张萌伍丽萍
- 文献传递
- Graves病动物模型研究进展被引量：4
- 2012年
- 近年Graves病(GD)动物模型的研究方法主要有:用稳定表达促甲状腺激素受体(TSHR)的细胞免疫小鼠;短暂表达TSHR的质粒免疫小鼠;转基因动物模型;单克隆抗体被动免疫诱导;用表达TSHR-A亚单位的腺病毒免疫小鼠。其中,用TSHR-A亚单位的腺病毒免疫是目前诱导GD发病率高且稳定的方法。在此基础上,还有BALB/c小鼠GD免疫耐受模型的建立。
- 王悦伍丽萍施秉银
- 关键词：GRAVES病促甲状腺激素受体动物模型
