王娟
- 作品数：11 被引量：65H指数：3
- 供职机构：首都医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金北京市属高等学校人才强教计划资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 2007-2008年北京地区CA16VP1区系统进化分析被引量：23
- 2009年
- 目的了解2007-2008年北京地区柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CA16)流行情况及其种系进化规律和基因分型。方法收集北京地区2007-2008年133例手足口病病例临床标本,从中筛选CA16毒株,扩增部分毒株VP1区并进行序列测定和分析。结果共筛选得到39例45份CA16阳性标本,测定其中16株病毒的VP1区核苷酸序列,其同源性为91.43%～98.65%,氨基酸同源性为97.98%～100%。该16株病毒与GenBank中选取的24株CA16参考株的核苷酸同源性为78.13%～98.65%,氨基酸同源性为89.9%～100%。16株北京分离株中的9株与近年多数中国大陆分离株形成进化树上亲缘关系较近的一群,其余7株与我国台湾及周边国家的一系列分离株亲缘关系较近。结论CA16为北京地区手足口病的主要致病原之一,本地区毒株同源性较高,同GenBank中24株CA16参比毒株序列进行系统进化分析显示其属于B基因群,16株北京分离株在系统进化树上有分别归属于两支的趋势。
- 王娟罗珍范东瀛高娜朱俊萍安静
- 关键词：柯萨奇病毒A组16型手足口病系统进化分析
- 利用甲基纤维素改良的病毒噬斑技术被引量：3
- 2012年
- 目的探究病毒噬斑实验的方法寻找其改良之处,为实验操作提供方便。方法用甲基纤维素代替琼脂糖覆盖病毒感染后的细胞。结果改良后的新方法在进行登革病毒滴度检测时相较于传统方法,可形成均匀、清晰的噬斑,复孔重复性好,而且噬斑在实验后2年内仍保存完好,与背景形成明显对比,便于复查。结论利用甲基纤维素的病毒噬斑技术,省时省力节约成本且便于操作,是一个值得推广的有价值的实验方法。
- 盛子洋王娟吴江漫安静范东瀛
- 关键词：登革病毒甲基纤维素
- 登革2型病毒与整合素β3相互作用机制的研究
- 研究目的：为了探讨DV2与血管内皮细胞(VEC)相互作用的机制，本课题观察登革2型病毒(Dengue virus serotype 2. DV2)感染后及转染DV2各蛋白质粒后，EA.hy926细胞中整合素β3的表达规律...
- 明颖高娜陈辉王娟范东瀛吴江漫安静
- 关键词：登革2型病毒整合素Β3基因表达
- 登革热病毒SCID-LO2人鼠嵌合模型的建立与评价被引量：1
- 2012年
- 目的构建登革热病毒(DENV)感染的小动物模型,为阐明其致病机制提供实验材料。方法向严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠腹腔内接种人正常肝细胞(LO2)构建"人鼠嵌合体"动物模型,进而腹腔注射DENV,通过检查病毒在体内分布和主要器官的组织学改变,对DENV感染的动物模型进行评价。结果 SCID小鼠成功移植LO2,并且嵌合小鼠感染DENV后出现病毒血症及严重的器官损伤等表现,但无后肢麻痹等无关症状。结论成功构建了SCID-LO2人鼠嵌合模型,嵌合小鼠能够支持DENV复制,并表现出部分人类感染DENV的临床症状,该小鼠感染模型为研究DENV的致病机制提供了有价值的实验材料。
- 盛子洋陈艳雷王娟吴娜范东瀛王湘高娜安静
- 关键词：登革热病毒动物模型
- 登革病毒感染HepG2-严重联合免疫缺陷小鼠模型的建立
- 2013年
- 缺乏合适的动物模型严重限制了登革病毒(DENV)致病机制研究的进展。本研究旨在构建DENV感染小鼠模型,为阐明其致病机制提供实验材料。首先在严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠腹腔内接种人肝癌细胞株HepG2,构建人鼠嵌合体动物模型;移植后10d腹腔接种DENV,通过检测病毒在体内分布及主要器官的组织学改变,评价该动物模型的实用价值。结果显示,在SCID小鼠成功移植HepG2并感染DENV后,出现病毒血症及主要器官严重损伤等现象,但无后肢麻痹等人类登革热无关症状。本研究成功构建了HepG2-SCID人鼠嵌合模型,该模型能支持DENV复制,并表现出部分人类DENV感染的临床症状,为研究DENV的致病机制提供了有价值的实验材料。
- 陈艳雷王娟高娜范东瀛王一松安静
- 关键词：登革病毒
- 重组丙型肝炎病毒核心蛋白的原核表达、纯化和抗体制备被引量：1
- 2010年
- 本文旨在获得纯化丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白(HCV-C)及抗HCV-C多克隆抗体,为深入研究HCV-C与肝细胞相互作用的分子机制奠定基础。首先以HCV1b亚型HC-J4-91全基因组质粒为模板,聚合酶链反应(PCR)扩增HCV-C基因,构建重组质粒pQE31-HCV-C。融合蛋白经原核表达、纯化后,免疫BALB/c小鼠,制备抗HCV-C多克隆抗体。利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体效价,蛋白免疫印迹(Westernblot)和间接免疫荧光染色鉴定抗体特异性。结果显示,表达HCV-C的原核表达质粒pQE31-HCV-C构建正确,获得相对分子质量约22000的纯化融合蛋白。ELISA检测重组蛋白免疫小鼠的抗血清效价达1:12800。结果显示,自制的抗HCV-C多克隆抗体能特异性识别HCV-C。本研究获得了纯度较好、原核表达的HCV-C,并成功制备了抗HCV-C多克隆抗体,为深入研究HCV-C的致病机制提供了有实用价值的研究工具。
- 陈辉高娜范东瀛郑群王娟安静
- 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白原核表达抗体制备
- GM-CSF在登革热病毒和丙型肝炎病毒DNA疫苗诱导的免疫应答中的作用被引量：1
- 2012年
- 研究GM-CSF在DV、HCV等几种黄病毒DNA疫苗诱导的免疫应答中的作用,并分析其作为黄病毒DNA疫苗佐剂的可能性。构建各种真核表达质粒,抽提质粒DNA,分组免疫小鼠,通过ELISA及间接免疫荧光染色检测小鼠血清抗体的动态水平。DV1及DV2prM/E核酸疫苗与GM-CSF质粒共接种的佐剂组小鼠血清抗体水平低于无佐剂的疫苗组,即GM-CSF显示了一定的免疫抑制作用,其中以DV1prM/E核酸疫苗更为显著;而在HCVC及E1蛋白核酸疫苗中,GM-CSF则具有一定免疫增强作用。GM-CSF作为疫苗佐剂,其作用具有复杂的多样性,因抗原的不同可能会呈现免疫提升或免疫抑制,因此选择其作为核酸疫苗佐剂时需慎重。
- 吴江漫陈辉盛子洋王娟范东瀛高娜安静
- 关键词：粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子黄病毒DNA疫苗免疫增强
- 2007年北京地区儿童手足口病病原的初步筛查被引量：38
- 2009年
- 2007年4～6月儿童手足口病流行期间,对北京地区51例皮损症状典型、伴/不伴发热、无重症合并症的手足口病患儿采样,建立RT-PCR方法,以5'非编码区(5'UTR)肠道病毒通用引物、CA16和EV71 VP1区特异性引物直接对82份临床标本进行了初步筛查,肠道病毒阳性率达70.6%。检测病例中CA16阳性25例(25/51)、EV71阳性4例(4/51)、非CA16和EV71的肠道病毒阳性病例7例(7/51),三者比例约为6:1:2。2007年北京地区儿童轻症手足口病主要病原包括CA16和EV71,同时还存在一定比例其它肠道病毒。部分EV71毒株经测序验证及系统进化分析显示为C4基因亚型。
- 朱俊萍徐子刚陈辉张霞范东瀛王娟
- 关键词：手足口病柯萨奇病毒A组16型肠道病毒71型
- 登革2型病毒与整合素β3相互作用机制的研究
- 2011年
- 目的观察登革2型病毒(dengue virus serotype2,DV2)感染后及转染DV2病毒蛋白的质粒后,EA.hy926细胞中整合素β3表达规律及表达量的变化,以初步明确DV2与整合素β3的相互作用的可能机制。方法经噬斑法测定DV2在EA.hy926中的增殖规律,并通过间接免疫荧光染色检测DV2感染后及病毒蛋白质粒转染后整合素β3表达量的变化。结果 DV2能够在EA.hy926细胞中增殖,在感染复数为1的条件下,最高病毒滴度为105pfu/ml,出现在感染后第5天,以后随着感染时间延长病毒滴度逐渐下降。DV2感染后整合素β3的表达量增高,且随感染时间的延长有渐增趋势;转染DV2E蛋白可诱导整合素β3的表达,且E蛋白与整合素β3有明显的共存,而DV2的其他病毒蛋白无明显诱导整合素β3表达的作用,且与之无明显共存。结论 DV2感染可诱导EA.hy926细胞整合素β3的表达,而E蛋白可能是DV2与整合素β3相互作用、进而介导病毒进入细胞的重要分子。
- 明颖高娜张俊磊陈辉王娟范东瀛吴江漫安静
- 关键词：登革热病毒整合素类病毒包膜蛋白质类
- 登革病毒感染小鼠模型研究进展
- 2011年
- 登革病毒（DENV）是黄病毒属的单股正链RNA病毒,其基因组全长约为10.7 kb,包含一个开放读码框架,编码3种结构蛋白和7种非结构蛋白。依据E蛋白的抗原性不同,DENV分为4个血清型（DENV 1～4）。DENV主要以埃及伊蚊和白纹伊蚊为传播媒介,引起登革热（DF）和登革出血热（DHF）。
- 王娟高娜吴娜安静
- 关键词：登革病毒感染小鼠模型单股正链RNA病毒开放读码框架登革出血热黄病毒属
