王华南
- 作品数：6 被引量：6H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家科技基础性工作专项中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
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- 结核分枝杆菌csdA基因的原核表达及其免疫原性
- 2010年
- 以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出1 690 bp的csdA(cold-shock dead-box protein A)基因,经限制性酶切后,与pET28a载体连接,转化到大肠杆菌BL21中后,重组菌经0.2 mmol/L IPTG诱导表达了csdA蛋白及Ni-His-resin纯化蛋白,经Western-blot分析,鉴定了目的蛋白的反应原性。试验结果表明,重组质粒的双酶切鉴定和DNA测序均正确;SDS-PAGE和Western-blot分析结果显示,在64 ku处获得一目的条带,具有很好的免疫原性。证实,成功构建了重组表达质粒pET28a-csdA,获得了高纯度的重组蛋白,为深入研究csdA蛋白的功能奠定了基础。
- 王华南亓英芳杜艳芬刘慧芳司微于申业王加明杨盛李素兰冯拥军倪洪波王春来刘思国
- 关键词：结核分枝杆菌原核表达
- 抗结核分枝杆菌单克隆抗体及其识别的抗原表位和用途
- 本发明公开了抗结核分枝杆菌单克隆抗体及其所识别的抗原表位和用途。本发明提供了一株稳定分泌抗结核分枝杆菌CsdA的单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其微生物保藏号是：CGMCCNo.5077。本发明进一步提供了由该杂交瘤细胞株分泌...
- 刘思国王华南于申业朱婷于秀婷刘慧芳王秀梅司微
- 文献传递
- 结核分枝杆菌pdhA基因的原核表达及其免疫原性分析被引量：6
- 2011年
- 以结核分枝杆菌H37Rv菌株的基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出1 100bp的pdhA(pyruvate dehydrogenase E1component alpha subunit)基因,经限制性酶切后,与pET-28a载体连接,转化到大肠杆菌BL21中,重组菌经1mmol/L IPTG诱导表达了pdhA蛋白,并用Ni-His-resin纯化了目的蛋白,经Western-blot分析鉴定了目的蛋白的免疫原性。结果显示,重组质粒的双酶切鉴定和DNA测序均正确;SDS-PAGE和Western-blot分析结果显示,在44ku处获得一目的条带,且具有很好的免疫原性。本研究成功获得了高纯度的重组蛋白pdhA,为深入研究其功能奠定了基础。
- 王华南亓英芳朱婷于申业刘慧芳司微杨盛王加明冯拥军李素兰于秀婷王春来刘思国
- 关键词：结核分枝杆菌原核表达
- 结核分枝杆菌CsdA的原核表达及免疫性分析
- 为表达和纯化结核杆菌(MTB)冷休克蛋白CsdA,本研究根据GenBank登录的CsdA基因序列设计合成一对特异性引物,通过PCR扩增了H37Rv的CsdA基因,并将其克隆至pET-28a载体中,转化大肠杆菌BL21(D...
- 王华南亓英芳杜艳芬刘慧芳司微于申业倪洪波王春来刘思国王加明杨盛李素兰冯拥军
- 关键词：结核分枝杆菌原核表达
- 抗结核分枝杆菌单克隆抗体及其识别的抗原表位和用途
- 本发明公开了抗结核分枝杆菌单克隆抗体及其所识别的抗原表位和用途。本发明提供了一株稳定分泌抗结核分枝杆菌CsdA的单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其微生物保藏号是：CGMCCNo.5077。本发明进一步提供了由该杂交瘤细胞株分泌...
- 刘思国王华南于申业朱婷于秀婷刘慧芳王秀梅司微
- 牛分枝杆菌与鸟型分枝杆菌2型重组蛋白Ag85b的血清学交叉反应研究
- 2012年
- 牛分枝杆菌(M.bovis)是引起牛结核病的常见病原,而鸟分枝杆菌(M.avium)2型则通常交叉感染牛,但不会导致严重的病变。为鉴定M.bovis和M.avium的免疫交叉反应情况,本研究分别以M.bovis和M.avium2型的基因组为模板,扩增ag85b基因,分别构建了M.bovis和M.avium的原核和真核表达重组质粒进行表达。以原核表达纯化的两种重组蛋白Ag85b(rAg85b)分别作为包被抗原,交叉检测两种真核重组质粒免疫豚鼠制备的抗血清。结果表明,原核表达的M.bovis和M.avium rAg85b与真核重组质粒免疫豚鼠制备的两种抗血清之间存在较强的免疫交叉反应。研究结果揭示M.bovis和M.avium的Ag85b蛋白存在很强的血清学交叉反应,这将严重干扰M.bovis Ag85b作为候选疫苗的免疫监测。
- 朱婷王华南刘慧芳于申业王秀梅陈莉苹司微赵海玲刘思国
- 关键词：牛结核分枝杆菌
