王佩
- 作品数：7 被引量：15H指数：2
- 供职机构：河南师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：河南省基础与前沿技术研究计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 咪唑类物质KK-42对日本沼虾α2-巨球蛋白基因表达的影响
- 2014年
- 为探讨KK-42提高感染嗜水气单孢菌的日本沼虾幼虾成活率的机制，实验首次克隆了012M部分序列，研究了α2M基因的时空表达以及KK-42对其表达和活力的影响。将体长3．5-5．0cm的日本沼虾幼虾随机分为2组，分别用1．95×10^-4mol／L的KK-42溶液和不含KK_42的溶液浸泡处理1min，12h后，每组再分为2个亚组，分别向虾腹部注射嗜水气单胞菌菌悬液（菌攻毒实验组和菌攻毒对照组）或生理盐水（实验组-1和对照组-1），于不同时间点测定幼虾的成活率、α2M基因表达水平和活力的变化。结果显示，KK42预处理可显著提高感染嗜水气单胞菌的日本沼虾幼虾成活率。经BLAST比对，克隆的α2M部分mRNA序列与罗氏沼虾α2M具有90％以上同源性。实时荧光定量PCR实验显示，α2M基因表达水平在血细胞中最高，且以蜕皮前期最为显著。KK-42处理的幼虾血细胞012M基因的表达无显著性差异；嗜水气单胞菌刺激使血细胞α2MmRNA水平在3h比0h提高了580％，其活力在24h增幅为47．5％；而菌攻毒实验组mRNA水平在6-48h明显高于菌攻毒对照组，尤其在12h，增幅为511％，其活力水平也呈同样的变化趋势。研究表明，KK-42预处理能上调感染嗜水气单胞菌的幼虾血细胞α2M基因的转录水平，诱导α2M活力增强，这可能增强了幼虾的免疫水平，从而提高成活率。
- 王佩吕黎张哲亮吕艳杰杨洪宁黔冀
- 关键词：日本沼虾嗜水气单胞菌基因表达
- 采后处理对紫色菊花花瓣花青素吸收光谱及抗氧化活性的影响被引量：2
- 2012年
- 采用32℃烘干、-40℃冻干、-18℃冷冻、液氮冷冻后-18℃冷冻、-80℃冷冻和液氮冷冻后-80℃冷冻等方式处理紫色菊花(Dendranthema morifolium Tzvel.)花瓣,考察采后处理方式对紫色菊花花瓣花青素提取液的吸光度和二苯代苦味酰基自由基(DPPH.)清除能力的影响。结果表明,32℃烘干和-40℃冻干处理后紫色菊花花瓣花青素的紫外吸收峰峰值、可见光吸收峰峰值和DPPH.清除率均极显著高于其他处理;低温冷冻会导致紫色菊花花瓣花青素提取液吸收峰峰值和DPPH.清除率的下降。综合考虑操作流程和生产成本,32℃烘干是最适合紫色菊花花瓣的采后处理方式。
- 刘海英郭净净王曼张东玲张倩倩仇金草丁一王佩王苹殷佩齐王莉娜
- 关键词：采后处理花青素吸收光谱抗氧化活性
- 日本沼虾表皮几丁质合成酶基因克隆及表达分析被引量：2
- 2015年
- 为了解日本沼虾几丁质合成酶(Chs)基因在蜕皮过程中的作用,本实验采用RACE技术首次从表皮中克隆了几丁质合成酶基因(Mn Chs)c DNA全长,并用生物软件对其序列进行生物信息学分析,RT-PCR技术检测该基因的时空表达模式。结果表明,其c DNA全长5 133bp,5'UTR为283 bp,3'UTR为159 bp,开放阅读框(ORF)长度为4 701 bp,编码1 566个氨基酸,分子量为179.57 ku,理论等电点为6.09,包含2个几丁质合成酶的标签序列EDR和QRRRW及Chitin-synth-C结构域。经BLAST比对,与日本仿长额虾、淡水枝角水蚤Chs相似性分别为89%和63%。RT-PCR结果显示,在蜕皮周期各阶段,不同组织Mn Chs的表达量差异显著:头胸甲在A期达到最高,胃肠在D0和D4期均较高,尾扇和肌肉在D4期最高,肝胰腺则普遍较低。结果表明,Mn Chs基因转录物不仅存在于表皮,在其他组织中也有分布,且mRNA水平的变化与蜕皮周期有关,作为几丁质生物合成的关键酶,推测该基因的表达在新外表皮和内表皮的形成中发挥重要作用。
- 王佩郭爱莲张宇吕艳杰宁黔冀
- 关键词：日本沼虾几丁质合成酶克隆
- 日本沼虾表皮几丁质结合蛋白基因的克隆以及KK-42对其表达的影响被引量：2
- 2016年
- 为探讨KK-42缩短日本沼虾蜕皮周期的可能机制,首次从日本沼虾步足表皮组织克隆了编码几丁质结合蛋白的一个新基因——MnCBP-1部分cDNA序列,对其序列进行生物信息学分析,qRT-PCR技术检测MnCBP-1基因的表达水平以及KK-42的影响.结果表明,MnCBP-1基因部分cDNA序列为1396bp,含有特征性的几丁质结合结构域(chitin-bind-4),经BLAST比对,MnCBP-1与蚤状溞相似性为44%.qRT-PCR结果显示,步足表皮组织内MnCBP-1基因表达量随着蜕皮前期(D0-2)的开始逐渐增多.KK-42处理后,蜕皮间期(C)幼虾内MnCBP-1基因表达水平分别在6、12、24和48h比对照组显著升高,而在D0-2期和D3-4期MnCBP-1基因转录物仅在个别时间点有所增多.研究表明,MnCBP-1基因表达与蜕皮周期有关,KK-42处理可显著诱导MnCBP-1基因表达,且表达的高峰提前至C期,这可能是KK-42缩短蜕皮周期的机制之一.
- 张宇王佩吕艳杰宁黔冀
- 关键词：日本沼虾克隆基因表达
- 咪唑类物质KK-42对日本沼虾几丁质酶基因表达的影响被引量：2
- 2014年
- 为探讨咪唑类物质KK-42提高感染嗜水气单孢菌的日本沼虾幼虾成活率的机制,首次克隆了日本沼虾几丁质酶基因-3部分序列,研究了其时空表达及酶活力的变化。将体长3.5~5.0cm的日本沼虾幼虾随机分为两组,分别用1.95×10-4 mol/L的咪唑类物质KK-42溶液（试验组1）或不含咪唑类物质KK-42的溶液（对照组1）浸泡处理1min,12h后,分别注射嗜水气单胞菌菌悬液（菌攻毒试验组和菌攻毒对照组）或生理盐溶液（试验组2和对照组2）,不同时间测定幼虾的成活率,分析几丁质酶基因-3mRNA水平及其酶活力的变化。结果显示,12-48h时,菌攻毒试验组的成活率比菌攻毒对照组增加133%以上。克隆的日本沼虾几丁质酶基因-3部分mRNA序列与其他甲壳类具有90%以上同源性。几丁质酶基因-3表达水平在肝胰腺中最高,以蜕皮前期最为显著。与对照组1相比,在12h,试验组1几丁质酶基因-3mRNA水平和酶活力分别增高了150%和75%;菌攻毒试验组mRNA水平在12~48h明显高于菌攻毒对照组,尤其在24h,增幅高达304%,酶活力在24h比菌攻毒对照组增高48%。咪唑类物质KK-42预处理能显著上调感染嗜水气单胞菌的日本沼虾幼虾肝胰腺几丁质酶基因-3的转录、诱导酶活力增强,这可能是咪唑类物质KK-42提高幼虾成活率的机制之一。
- 王佩吕艳杰吕黎杨洪宁黔冀
- 关键词：日本沼虾嗜水气单胞菌基因表达
- 日本沼虾表皮蛋白-5基因全长cDNA克隆及表达分析被引量：3
- 2017年
- 为探究甲壳动物表皮蛋白多样性及其功能,根据表皮转录组资料,利用RACE技术扩增得到日本沼虾表皮蛋白-5基因的cDNA全长序列,分析其生物信息学、不同蜕皮时期的表达特征以及KK-42对其表达特征的影响。日本沼虾表皮蛋白-5基因的cDNA全长796bp,开放阅读框477bp,编码158个氨基酸,含RR基序,预测蛋白等电点为4.22,分子量为16.46ku;氨基酸序列比对发现日本沼虾表皮蛋白-5与克氏原螯虾Casp-2相似性最高,为76%,与其他甲壳动物表皮蛋白相似性为41%~53%。实时荧光定量PCR结果显示,日本沼虾表皮蛋白-5基因在3个时期——蜕皮间期、蜕皮前早期和蜕皮前晚期均有表达,其中在脱皮前晚期的相对表达量最高,为蜕皮间期的1400倍,与之有极显著差异(P<0.01)。KK-42处理显著上调日本沼虾表皮蛋白-5基因在蜕皮前早期的表达,在处理后3、6h和48h表达量分别是对照组的6.3、4.8和11.4倍。KK-42诱导日本沼虾表皮蛋白-5基因的表达,使峰值前移,这可能是KK-42缩短日本沼虾幼虾蜕皮周期的机制之一。
- 郑征帆吕艳杰王佩宁黔冀
- 关键词：日本沼虾表皮蛋白基因克隆
- KK-42对日本沼虾D_3期头胸甲表皮结构的影响被引量：6
- 2014年
- 为探讨KK-42缩短日本沼虾幼虾蜕皮周期的机制,实验采用组织学方法观察了幼虾头胸甲表皮结构,定量测定了肝胰腺N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)的活力。将体长(3.3±0.5)cm的日本沼虾随机分为两组,分别用1.95×10-4mol/L的KK-42溶液(实验组)或不含KK-42的溶液(对照组)浸泡处理1 min之后,选取处于蜕皮前期D3期的日本沼虾,观察头胸甲表皮结构,测定肝胰腺NAGase活力。结果显示,KK-42处理后第1天,头胸甲外表皮厚度与对照组相比显著增长42.83%;第3天和第9天,内表皮的厚度同比提高70.72%、77.27%,整个头胸甲的厚度同比显著增厚。KK-42处理后第3天,上皮细胞的高度比对照组提高31.69%。KK-42处理后6、12和24 h,NAGase活力分别比相应的对照组升高42.53%、34.28%和18.36%。研究表明,KK-42处理可显著增加D3期日本沼虾头胸甲外骨骼的厚度,提高肝胰腺NAGase活力。
- 吕艳杰陈香丽郭爱莲王佩宁黔冀
- 关键词：日本沼虾头胸甲NAGASE
