王仁刚
- 作品数：12 被引量：27H指数：3
- 供职机构：上海市奉贤区疾病预防控制中心更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 聚合酶链反应技术在检测外环境霍乱弧菌的应用
- 目的：综合应用聚合酶链反应技术和常规技术的检测手段，提高外环境霍乱弧菌的阳性检出率。
方法：通过聚合酶链反应技术和常规技术相结合的综合检测方法与单纯的常规技术的检测方法进行比较，观察分析其阳性检出率。
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- 关键词：病原微生物霍乱弧菌免疫学检验聚合酶链反应
- 文献传递
- 检测外环境霍乱弧菌的方法探讨被引量：3
- 2016年
- 目的提高外环境霍乱弧菌的阳性检出率。方法通过荧光定量PCR技术、免疫磁珠分离技术和常规分离培养技术相结合的综合检测方法,与荧光定量PCR技术结合常规分离培养技术和单纯的常规分离培养技术的检测方法进行比较,观察分析其阳性检出率。结果荧光定量PCR技术、免疫磁珠分离技术和常规分离培养技术相结合的综合检测方法,霍乱弧菌阳性检出率(1.05%)明显高于荧光定量PCR技术结合常规分离培养技术的阳性检出率(0.53%)和单纯的常规检测技术的阳性检出率(0.26%)。结论将PCR方法作为筛查的基础,进行免疫磁珠分离技术结合常规分离培养技术应用于霍乱弧菌的检测,可降低工作量,提高工作效率和工作质量,明显地提高阳性检出率。
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- 关键词：霍乱弧菌阳性率
- 从海、水产品中检出3株霍乱弧菌的报告被引量：2
- 2007年
- 目的:了解奉贤区海水产品中霍乱弧菌的污染状况,为霍乱防治工作提供实验依据。方法:依据《霍乱防治手册》第五版进行霍乱弧菌分离培养,生化及血清学鉴定,同时用PCR方法进行检测。结果:从20件样品中检出霍乱弧菌3株,其中1株为O1群霍乱弧菌稻叶27L型,另外2株分别为O1群霍乱弧菌小川9L型和15d型。结论:本次检出的3株霍乱弧菌均为非流行株,但仍需加强对海水产品的主动监测,预防霍乱流行株的出现而导致霍乱的散发和暴发流行。
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- 关键词：霍乱弧菌
- 上海奉贤区公共场所嗜肺军团菌污染状况调查被引量：1
- 2013年
- 目的应用PCR技术对奉贤地区部分公共场所空调冷却塔水及其他环境(淋浴设施等)进行军团菌污染状况调查。方法于2010-05和2010-10,分别采集中央空调冷却塔水样品及环境样品用聚合酶链(PCR)对其进行嗜肺军团菌检测,同时用常规法进行分型鉴定。结果采集的125份样品中,PCR法检出嗜肺军团菌45份,阳性检出率为36%,水样检出率远高于环境(分别为67.19%和3.28%)。在检出的59株军团菌中共鉴定出6种不同菌型,其中LP1为重点菌型,占50.85%。且在同一样品中检出不同菌型有2株以上的占35.29%。结论奉贤地区中央空调冷却塔及环境中存在军团菌污染。
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- 关键词：军团菌冷却塔PCR
- 2004-2006年奉贤区细菌性食物中毒病原菌分析
- 2007年
- 目的掌握奉贤区细菌性食物中毒病原学特点,为控制食物中毒提供科学依据,提高食品卫生管理水平。方法对奉贤区2004-2006年发生的细菌性食物中毒标本进行病原菌检测,并对检测结果进行分析。结果2004-2006年奉贤区共发生食物中毒21起,采集标本665份,检出病原菌182株,检出率为27.37%。结论奉贤区引起细菌性食物中毒的病原菌主要为副溶血性弧菌;7、8月份为发病高峰。
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- 关键词：食物中毒病原学副溶血性弧菌
- 荧光定量PCR技术在食源性疾病病原菌快速检测上的应用与评估被引量：2
- 2011年
- 目的:应用荧光定量PCR技术,实现对食源性疾病病原菌的快速检测。方法:选取食源性疾病常见的四种病原菌,沙门菌、志贺菌、副溶血性弧菌和金黄色葡萄球菌,根据它们的基因保守区设计特异性引物和Taqman探针,建立荧光定量PCR技术,同时验证方法的敏感性和特异性,并与普通PCR、常规培养法进行比较。结果:用荧光定量PCR技术检测沙门菌、志贺菌、副溶血性弧菌和金黄色葡萄球菌的检测灵敏度可达4 CFU/ml～8 CFU/ml,其敏感性比普通PCR高10倍,比常规培养法高1000倍。且快速简便,特异性强,从核酸提取至完成检测最快能在2 h～3 h内完成,而常规培养需3 d～4 d。通过对282件样品的检测,证实该方法可以使阳性检出率从常规法的8.51%提高至14.18%。结论:建立的荧光定量PCR技术特异性强,敏感性高,操作简便快速,适用于食源性疾病病原菌的快速检测。
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- 关键词：荧光定量PCR食源性疾病
- 上海市奉贤区188株沙门菌分子分型研究被引量：5
- 2018年
- 目的运用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术研究上海市奉贤地区沙门菌的分子流行病学特征,为沙门菌病的鉴定溯源及防控预警提供技术支持和数据参考。方法对2012-2016年分离到的188株沙门菌进行PFGE分子分型,运用Bio Numerics V7. 6软件的UPGMA方法进行聚类分析。结果 80株鼠伤寒沙门菌分为57种PFGE带型,菌株间条带相似度为43. 6%～100. 0%,其中52株可分为4组大的克隆系,克隆系Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中既有患者株也有食品株; 75株肠炎沙门菌分为38种PFGE带型,菌株间条带相似度为54. 4%～100. 0%,其中62株为1组大的克隆系,58株为患者株,4株为食品株;33株伦敦沙门菌分为28种PFGE带型,菌株间条带相似度为50. 1%～100. 0%,其中22株可分为3组大的克隆系,克隆系Ⅰ、Ⅱ中既有患者株也有食品株。结论 PFGE分型结果反映了本区鼠伤寒、肠炎、伦敦沙门菌PFGE型别的多样同时具有优势克隆系,而且各优势克隆系有稳定的遗传持久性。奉贤区沙门菌病例与食用污染的生鲜肉制品有密切关系,PFGE分子分型技术在致病菌的传播、追踪和溯源方面更具有针对性。
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- 关键词：沙门菌指纹图谱聚类分析
- 外环境霍乱弧菌检测方法探讨被引量：2
- 2012年
- 目的运用聚合酶链反应技术结合常规法的检测手段,提高外环境霍乱弧菌的阳性检出率。方法通过聚合酶链反应技术和常规技术相结合的综合检测方法与单纯的常规技术的检测方法进行比较,观察分析其阳性检出率。结果聚合酶链反应技术和常规技术相结合的综合检测技术,其阳性检出率(0.3%)高于单纯的常规检测技术的阳性检出率(0.2%)。结论运用聚合酶链反应技术结合常规法进行霍乱弧菌的检测,可提高其阳性检出率,同时又能减轻工作量,提高工作效率。
- 谢晓红沈莉王仁刚陶力新
- 关键词：聚合酶链反应技术霍乱弧菌阳性率
- 活白水鱼体表检出O_(139)群霍乱弧菌
- 2008年
- 目的了解奉贤区海水产品中霍乱弧菌的污染状况,为霍乱防治工作提供实验依据。方法依据《霍乱防治手册》第5版进行霍乱弧菌分离培养、生化及血清学鉴定,同时用PCR方法进行检测。结果从活白水鱼体表检出1株O139群霍乱弧菌。结论本次检出的1株O139群霍乱弧菌为流行株,具有引起流行和大流行的潜力,因此要加强对海水产品的主动监测,预防霍乱的散发和暴发流行。
- 谢晓红沈莉王仁刚陶力新
- 关键词：霍乱弧菌流行株
- 荧光定量PCR技术快速检测食物中副溶血性弧菌被引量：4
- 2013年
- 目的应用荧光定量PCR技术,实现对副溶血性弧菌食物中毒的快速检测。方法根据副溶血性弧菌的基因保守区设计特异性引物和Taqman探针,建立荧光定量PCR技术,同时验证方法的敏感性和特异性,并与普通PCR、常规培养法进行比较。结果用荧光定量PCR技术检测副溶血性弧菌,其检测灵敏度为1.5 CFU/ml,其敏感性比普通PCR高10倍,比常规培养法高1 000倍。且快速简便,特异性强,从核酸提取至完成检测最快能在2～3 h内完成,而常规培养需3～4 d。通过对发生的4起食物中毒96件样品的检测,证实该方法可以使阳性检出率从常规法的40.62%提高至47.92%。结论建立的荧光定量PCR技术特异性强,敏感性高,操作简便快速,适用于副溶血性弧菌食物中毒的快速检测。
- 谢晓红沈莉王仁刚陶力新
- 关键词：荧光定量PCR副溶血性弧菌
