王亚玉
- 作品数：11 被引量：3H指数：1
- 供职机构：暨南大学生命科学技术学院更多>>
- 发文基金：广州市重大科技专项计划项目广东省教育部产学研结合项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 表达外源蛋白的CHO-DG44细胞株的蛋白质组学研究
- 2022年
- 为给细胞株基因工程改造提供背景条件,文中以TNFR-Fc为模式蛋白,比较两株不同来源的CHO-DG44细胞在生长代谢以及外源蛋白TNFR-Fc表达方面的差异,采用i TRAQ结合2D LC-MS/MS技术,比较CHO-DG44(A)/TNFR-Fc和CHO-DG44(B)/TNFR-Fc细胞株的蛋白表达谱,并对差异蛋白进行了蛋白类型分析、差异基因GO富集分析和差异基因KEGG富集分析。结果表明:两株CHO细胞在生长代谢及外源蛋白表达方面存在一定的差异;通过对比蛋白表达谱发现的192种差异表达蛋白中,上调蛋白104个、下调蛋白88个;就蛋白类型而言,酶类所占的比例最多,达到38.02%;差异蛋白主要富集在包括蛋白质折叠、谷胱甘肽代谢过程、碳水化合物代谢过程、细胞内蛋白质转运、蛋白质稳定化等生物过程;差异蛋白主要涉及氨基酸的生物合成、碳代谢、糖酵解/糖异生、三羧酸循环等信号通路。不同CHO细胞株在氨基酸的生物合成、碳代谢、糖酵解/糖异生等方面的蛋白差异,可能是引起两株细胞生长代谢以及外源蛋白表达方面的差异的原因。
- 谢秋玲谭楚敏王亚玉陈子鑫熊盛
- 关键词：CHO细胞外源蛋白生长代谢蛋白质组学
- 用于扩增马抗体的巢式PCR引物、试剂盒及其应用
- 本发明涉及基因工程及抗体制备领域，具体而言，涉及一种用于扩增马抗体的巢式PCR引物、试剂盒及其应用。该巢式PCR引物可匹配的抗体重链及轻链基因的阳性率为56％左右，进而能够从单个B淋巴细胞分离抗体基因的方法，并制备高通量...
- 王亚玉林跃智廖化新王晓钧刘彤王雪峰
- 文献传递
- 用于扩增马抗体的巢式PCR引物、试剂盒及其应用
- 本发明涉及基因工程及抗体制备领域，具体而言，涉及一种用于扩增马抗体的巢式PCR引物、试剂盒及其应用。该巢式PCR引物可匹配的抗体重链及轻链基因的阳性率为56％左右，进而能够从单个B淋巴细胞分离抗体基因的方法，并制备高通量...
- 王亚玉林跃智廖化新王晓钧刘彤王雪峰
- 重组鲨鱼血管生成抑制因子功能活性区蛋白纯化工艺的优化被引量：1
- 2012年
- 目的优化重组鲨鱼血管生成抑制因子(Shark angiogenesis inhibition factor,SAIF)功能活性区(aSAIF)蛋白的纯化工艺。方法利用离子交换层析和镍柱亲和层析对带有组氨酸标签的融合蛋白His6-SUMO-aSAIF进行纯化。纯化后的融合蛋白经SUMO蛋白酶切除小分子泛素样修饰蛋白(Small ubiquitin-related modifier,SUMO)标鉴,再经镍柱二次亲和层析获得非融合aSAIF蛋白,采用WST-8法对其进行血管生成抑制活性检测。结果优化的纯化工艺参数为:离子交换层析采用0.2 mol/L的NaCl进行洗脱;亲和层析的洗脱液为20 mmol/L磷酸盐,500 mmol/L NaCl,250 mmol/L咪唑,pH 7.4;SUMO蛋白酶与融合蛋白的最佳酶切比例为1∶480,酶切时间为1 h。最终获得的aSAIF蛋白纯度可达95%,具有较好的抑制血管内皮细胞增殖的活性,且呈剂量依赖性。结论已成功建立了aSAIF的纯化工艺,为后续大规模生产及抑制血管生成机制的研究奠定了基础。
- 彭雯丹罗勇陈钧王亚玉黎美香谢秋玲
- 关键词：纯化工艺
- 基于单个B细胞抗体基因扩增技术筛选马IgG1单克隆抗体
- 2022年
- 在马的免疫学研究领域中,由于目前市场上缺乏商业化的马IgG单克隆抗体,使得对马的B细胞研究受到很大阻碍,IgG是B细胞受体(BCR)的重要构成成分,与B细胞分化成熟相关。为了获得马IgG特异性单克隆抗体,利用单个B细胞扩增技术进行抗体筛选。首先,将马IgG蛋白(EqIgG1-C)密码子优化后合成到真核表达载体pcDNA3.4上,纯化出抗原蛋白。随后,使用蛋白质免疫小鼠,分离脾细胞后利用流式细胞术分离特异性单个B细胞,扩增出抗体重链和轻链的可变区基因,用overlapping PCR方法扩增出线性化的完整抗体,并进行鉴定。结果从80个B细胞中获得了27株特异性重组单克隆抗体,并挑选出3株线性结合活性最强的抗体基因构建到表达载体上,共转染Expi293F^(TM)细胞后表达纯化,经过ELISA和Western blot验证,显示获得的抗体可以和EqIgG1-C蛋白有良好的结合作用。使用该方法可以省时高效的获得特异性抗体,为马的免疫学研究提供了重要研究工具,为鼠单克隆抗体筛选提供了技术拓展。
- 陈阳刘彤张佳琦廖化新林跃智王晓钧王亚玉
- 关键词：单克隆抗体
- 用于扩增马抗体的巢式PCR引物、试剂盒及其应用
- 本发明涉及基因工程及抗体制备领域，具体而言，涉及一种用于扩增马抗体的巢式PCR引物、试剂盒及其应用。该巢式PCR引物可匹配的抗体重链及轻链基因的阳性率为56％左右，进而能够从单个B淋巴细胞分离抗体基因的方法，并制备高通量...
- 王亚玉林跃智廖化新王晓钧刘彤王雪峰
- 文献传递
- 基于人牙周膜干细胞打印技术的3D生物复合支架性能研究
- 目的:研究基于人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells, hPDLSCs)打印技术的三维生物复合支架的物理及生物学性能。方法:3D生物打印制备SA/Gel/na-HA支架...
- 田银平刘敏义刘瑶瑶史长征王亚玉刘彤黄怡钟佩华戴箭刘湘宁
- 关键词：人牙周膜干细胞
- 文献传递
- 条纹斑竹鲨肌钙蛋白基因克隆、重组表达及其抑制血管生长的活性研究(英文)
- 2013年
- 从条纹斑竹鲨中克隆肌钙蛋白基因,在大肠杆菌中进行表达,并检测其抑制血管生长的活性。文献发现人肌钙蛋白(TnI)具有抑制肿瘤血管生成的功能,根据人TnI的基因序列在条纹斑竹鲨鱼肝脏中克隆出于鲨鱼TnI基因,在大肠杆菌中进行表达,获得重组蛋白,通过MTT实验和鸡胚尿囊膜(CAM)实验验证其抑制血管生长的活性。条纹斑竹鲨TnI的cDNA全长692 bp,其中开放阅读框552 bp(编码具有183个氨基酸多肽)。该蛋白与角鲨鲨鱼TnI的氨基酸同源性最高达85.2%,而与人类、鲑鱼、斑马鱼的TnI的氨基酸同源性分别为68.9%,64.5%和62.3%。在大肠杆菌中进行重组表达,纯化获得蛋白,MTT实验证明其具有抑制血管内皮细胞生长的功能,鸡胚尿囊膜实验显示其有抑制血管生长的功能。结论:条纹斑竹鲨TnI具有抑制血管生成的功能。
- 谢秋玲王亚玉陈先金李观贵张玲梁旭方
- 关键词：肌钙蛋白条纹斑竹鲨抗血管生成基因克隆
- 一种骨组织工程支架的3D打印方法
- 本公开提供了一种骨组织工程支架的3D打印方法，其特征在于，所述方法的具体步骤为：(1)首先将透明质酸、聚乙二醇和纳米羟基磷石灰与缓冲液混合均匀获得水凝胶复合材料；(2)将水凝胶复合材料与细胞悬液混合，得到打印浆料；(3)...
- 刘湘宁王亚玉田银平刘彤蔡礼钊姚洁谭俊龙叶辉生郑明霞刘宇东梁言赵秋璐耿文一许梓楠
- 文献传递
- 核仁素靶向递送系统AS1411-EVs介导microRNA/siRNA治疗乳腺癌的实验研究
- 小核苷酸如microRNA、siRNA等作为药物应用于多种疾病的临床治疗潜力巨大,但将核酸药物高效靶向性地递送到目标器官或目标细胞是十分困难的。因此设计和选择适宜的递送载体是目前核酸药物临床应用亟待解决的问题。胞外囊泡(...
- 王亚玉
- 文献传递
