王丽
- 作品数：24 被引量：99H指数：6
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HCV核心蛋白与PTEN在人肝癌组织中的表达及其关系研究
- 目的研究抑癌基因PTEN在人肝细胞肝癌中的表达及其与HCV核心蛋白间的关系。方法采用SP法检测人肝细胞肝癌组织中 HCV核心蛋白和PTEN的表达。用脂质体介导将含HCV核心蛋白编码基因的PEGFP-HCVc质粒稳定转染人...
- 王丽王文亮张静李擒龙
- 关键词：PTEN肝细胞癌
- 文献传递
- hsMAD2基因及Nocodazole对人肝癌细胞生长和细胞周期的影响被引量：4
- 2006年
- 目的观察hsMAD2过表达以及联合Nocodazole处理对HepG2细胞的生长和细胞周期的影响。方法将人全长hs-MAD2基因经脂质体包裹转染肝细胞肝癌HepG2细胞,经G418筛选期获得转基因癌细胞克隆,采用免疫细胞化学法、Westernblot方法检测hsMAD2的表达情况。观察细胞形态、测量生长曲线和分裂指数曲线,观察hsMAD2基因对HepG2细胞生长和细胞增殖能力的影响,流式细胞仪检测HepG2细胞周期的变化。然后观察在纺锤体阻滞剂50nmol/L Nocodazole作用下,hs-MAD2对HepG2细胞的影响。结果稳定表达外源性hsMAD2蛋白的HepG2细胞生长速度和细胞增殖能力并无变化;流式细胞仪检测结果显示HepG2-hsMAD2细胞周期G2、S期比例增加,而G1期细胞比例下降,但差异无显著性。经过nocodazole处理后,HepG2-hsMAD2细胞生长速度下降,差异具有显著性,细胞周期出现G2期阻滞。相反,HepG2在受到Nocodazole处理后无明显变化。结论单纯过表达外源性hsMAD2对细胞无影响。由于hsMAD2蛋白发挥了细胞周期关卡作用,使受到No-codazole破坏作用的细胞出现细胞周期的阻滞。
- 李擒龙王文亮张晓晖晏伟成胜权郭双平王文勇张志培王丽严晓昱张静
- 关键词：肝肿瘤NOCODAZOLE基因转染细胞周期
- 肝癌组织中PTEN基因蛋白的表达及其与微血管密度的相关性被引量：6
- 2004年
- 目的 :研究原发性肝癌 (HCC)组织中PTEN蛋白的表达及与肿瘤微血管密度 (MVD)之间的相关性 .方法 :应用免疫组织化学SP法检测 5 6例原发性肝癌组织及 4例肝硬化和 1例正常肝组织中PTEN蛋白的表达并对肿瘤MVD计数 ,分析其意义及两者间的相关性 .结果 :肝癌组织中PTEN阳性染色主要定位于细胞核中 ,总阳性率为 4 2 .9% (2 4 / 5 6 ) ;癌旁组织中PTEN阳性染色主要定位于细胞质 ,阳性率为1 0 0 % (32 / 32 ) ,在肝癌组织中的阳性表达率明显低于癌旁组织 (P <0 .0 1 ) ,且其表达强度在HCC病理分级中有差异 ,同时 ,在肿瘤TNM分期中各期PTEN阳性率有显著差异 ,而发生肝内转移和肿瘤直径大于 5cm的肝癌组织PTEN阳性率低于未转移和肿瘤直径小于 5cm的肝癌组织 .肝癌组织中MVD为 4 0± 1 1 ,MVD值随着肿瘤TNM分期的增高而增大 .且MVD在无包膜肝癌中及有肝内转移肝癌中比有包膜和无肝内转移的高 .肝癌组织中PTEN的表达与肿瘤MVD相关性分析两者呈显著负相关 ,即高PTEN表达的HCC中微血管计数较低 ,而低PTEN表达的HCC微血管计数增高 .结论 :PTEN蛋白的低表达与血管生成是原发性肝癌发生发展过程中的重要事件 ,且与肿瘤恶性分化程度密切相关 ;
- 王丽王文亮郭双平张勇成胜权
- 关键词：肝细胞癌PTEN基因抑癌基因免疫组织化学微血管密度
- 细胞凋亡相关新基因Apr-3的一个转录剪接体的克隆、初步表达及纯化
- 2006年
- 目的克隆Apr-3基因的一个转录剪接体,进行原核表达,并进行初步纯化。方法培养HL-60细胞,提取HL-60细胞总RNA,应用RT-PCR获取Apr-3编码区cDNA序列的前366bp,将该cDNA与质粒pcDNA3.0连接,构建克隆载体,将其转化E.coliDH5α,进行测序,与GenBank中登录序列比对,结果正确后将该cDNA与质粒pET28a连接,构建原核表达载体,转化大肠杆菌,诱导表达获得Apr-3蛋白。结果对测序结果进行序列分析,与GenBank中登录的Apr-3编码区完全一致。Apr-3融合蛋白主要以包涵体形式存在。结论成功构建了Apr-3的原核表达载体,获得了较纯的Apr-3融合蛋白。
- 张静王文亮晏伟张志培李擒龙王丽
- 关键词：细胞凋亡克隆融合蛋白
- 原核生物pPLacZ报道分子系统的构建及鉴定
- 2006年
- 构建可以鉴定原核基因启动子和检测基因转录活性的报道分子系统pPLacZ。用PCR方法从野生型大肠杆菌基因组DNA中扩增lacZ基因的全基因序列(3258bp)和结构基因序列(3089bp)克隆入经改建的含有pUC19的多克隆位点的pBR322载体中,经酶切和测序鉴定正确的两个质粒分别命名为pPLacZ-Control和pPLacZ-Basic。用PCR从野生型大肠杆菌基因组DNA中扩增热休克基因htpX的启动子序列并克隆入pPLacZ-Basic中,经酶切测序鉴定正确的报道载体pPLacZ-htpX转入细菌中,检测高温应激时β-半乳糖苷酶活性水平。成功构建了原核生物报道分子系统pPLacZ以及检测基因htpX的报道质粒pPLacZ-htpX。应用此系统通过检测LacZ的比活性成功测定了大肠杆菌htpX基因高温应激时其转录活性的动态变化。原核生物质粒报道分子系统pPLacZ操作简便,可替代国际通用的原核噬菌体报道分子系统对原核基因的启动子进行鉴定和转录活性检测。
- 黄勇张晓楠王丽宋庆贺王涛陈南春陈苏民
- 关键词：LACZ
- HCV肝炎肝硬化中核心蛋白、p14^(ARF)和p21^(WAF1)的表达被引量：2
- 2005年
- 目的 检测HCV肝炎、肝硬化组织中的核心蛋白、p14ARF、p21WAF1的表达及其相关性,探讨HCV核心蛋白对p14ARF、p21WAF1的表达作用。方法 收集HCV表达阳性的肝炎、肝硬化组织23例,采用免疫组织化学EnVision两步法检测HCV感染的肝炎、肝硬化组织的核心蛋白、p14ARF、p21WAF1的表达,并分析三者间的关系。结果 核心蛋白、p14ARF、p21WAF1的阳性表达主要定位于细胞核。在核心蛋白均阳性的组织中,p14ARF的阳性表达率为69.6%,p21WAF1表达率为13%;三组间的阳性强度比较,差异有显著性(P=0 .01),HCV核心蛋白与p14ARF、p21WAF1各组间的P值均<0. 01;HCV核心蛋白与p14ARF、p21WAF1阳性强度两者间相关性检验,相关系数rs分别为-0 .053、0 .45(P值分别为0 .72、0. 20),表明无相关性。结论 HCV核心蛋白对p14ARF、p21WAF1的表达有影响:可能间接促进p14ARF的表达,但抑制p21WAF1的表达。
- 张志培王文亮王文勇成胜权杨彤涛邓中荣王丽李擒龙
- 关键词：P21^WAF1P14^ARF肝炎肝硬化HCV核心蛋白ENVISION肝硬化组织
- 丙泊酚复合七氟醚用于胃癌根治术的麻醉效果及机制探讨被引量：1
- 2018年
- 目的:探讨丙泊酚复合七氟醚用于胃癌根治术患者的麻醉效果及可能机制。方法:选取2015年7月-2017年8月拟在我院择期行胃癌根治术患者89例,根据入院顺序编号采用奇偶数法分为对照组和观察组,对照组(44例)给予依托咪酯麻醉,观察组(45例)给予丙泊酚复合七氟醚。比较两组麻醉前后生命体征、免疫功能指标的变化,麻醉效果,术后苏醒质量及不良反应的发生情况。结果:麻醉前,两组患者SBP(Systolic blood pressure,收缩压)、DBP(Diastole pressure,舒张压)、HR(Heart rate,心率)、SPO_2(oxyhemoglobin saturation,血氧饱和度)水平比较差异无统计学意义(P>0.05);麻醉后,两组患者SBP、DBP、HR水平均比麻醉前显著降低(P<0.05),而SPO_2均显著高于麻醉前,两组之间以上指标的差异无统计学意义(P>0.05)。观察组的麻醉效果明显优于对照组(P<0.05),术后睁眼时间、拔管时间及定向力恢复时间均显著少于对照组(P<0.05)。麻醉前,两组患者CD3^+(CD3^+Prioritisation,CD3^+比例)、CD4^+(CD4^+Prioritisation,CD4^+比例,CD8^+(CD8^+Prioritisation,CD8^+比例)及CD4^+/CD8^+值之间比较差异无统计学意义(P>0.05);两组患者手术结束时的以上指标均显著低于麻醉前(P<0.05),手术结束24 h后,观察组CD3^+、CD4^+及CD4^+/CD8^+值恢复至麻醉前水平(P>0.05),而对照组仍低于麻醉前水平(P<0.05)。观察组不良反应的发生率显著低于对照组(P<0.05)。结论:丙泊酚复合七氟醚对于胃癌根治术患者麻醉效果好、术后苏醒质量高,可能与患者术后免疫功能恢复快有关。
- 梁璐苏保雄秦妮娜王丽王敏
- 关键词：丙泊酚七氟醚胃癌根治术免疫功能
- 不同复性方法制备的rhBMP-2m诱导异位成骨活性比较被引量：7
- 2007年
- 目的:用三种不同方法复性重组人骨形成蛋白2成熟肽(rhBMP-2m),比较其异位诱骨活性.方法:将工程菌株进行高密度发酵、温度诱导表达,裂菌收集包涵体后经离子交换色谱分离纯化.纯化后的rhBMP-2m用三种不同方法复性:①对pH4.8复性液透析复性;②对pH9.0复性液稀释复性;③对pH6.5复性液透析复性.不加任何载体,1mg复性后rhBMP-2m直接植入小鼠肌肉观察诱骨生成.结果:得到纯度为98%的rhBMP-2m.①pH4.8透析复性后蛋白可溶.经过滤除菌,可溶性rhBMP-2m没有损失.冻干后植入肌袋,2wk后诱导生成软骨,4wk诱导生成骨小梁.②pH9.0稀释复性后虽然肉眼观察蛋白似为可溶,但经除菌膜过滤rhBMP-2m损失90%以上.冻干后植入肌袋,1wk诱导生成软骨,2wk诱导软骨内成骨,3wk出现骨小梁.③pH6.5透析复性后蛋白不可溶,植入肌袋,2wk诱导生成骨小梁,4wk后出现骨髓样细胞.结论:相比酸性和碱性条件,中性条件下复性的rh-BMP-2m的诱骨活性最好,但酸性条件下复性的rhBMP-2m溶解度好.
- 赵玮钦陈苏民王涛张晓楠王丽
- 关键词：高密度发酵蛋白质纯化蛋白质复性
- HCV核心蛋白,p53,Mdm2,p14^(ARF)在HCV肝炎肝硬化的表达及相关性被引量：8
- 2005年
- 目的:研究丙型肝炎病毒(HCV)肝炎、肝硬化组织核心蛋白、突变p53,Mdm2,p14ARF的表达以及它们间的相关性,探讨HCV核心蛋白对突变p53,Mdm2,p14ARF的表达作用及临床意义.方法:收集HCV表达阳性的肝炎、肝硬化组织23例,采用免疫组织化学EnVision法检测HCV感染的肝炎、肝硬化组织中核心蛋白、突变p53,Mdm2,p14ARF的表达,用统计学方法及临床联系分析它们之间的关系.结果:核心蛋白、突变p53、Mdm2,p14ARF的阳性表达主要定位于细胞核中;核心蛋白阳性表达的组织中突变p53,Mdm2、p14ARF阳性率分别为87%,91.3%,65.2%;4组间的KruskalWallis检验P<0.01,差异显著,核心蛋白与p53,p14ARF间的MannWhitneyU秩和检验P值分别为0.05,0.01;HCVC蛋白与突变p53,Mdm2,p14ARF阳性强度两者间相关性Spearman检验P值分别为0.01,0.067,0.72,相关系数rp分别为0.71,0.493,0.053.结论:HCV核心蛋白可能促进野生p53突变和表达,同时也可能间接促进Mdm2和p14ARF的表达;核心蛋白、突变p53,Mdm2的共同作用可促进肝细胞增殖、非典型性增生及其转化.
- 张志培王文亮邓中荣王文勇李擒龙王丽
- 关键词：病毒核心蛋白质类MDM2P14^ARF肝炎肝硬化
- 影响大肠杆菌电转化效率因素的探讨被引量：5
- 2008年
- 目的探讨影响大肠杆菌DH5a电转化效率的几个关键但易被忽略的因素。方法于室温(25℃)用空气浴振荡和水浴振荡培养大肠杆菌DH5a,用10%(V/V)甘油-水溶液和10%(V/V)甘油-生理盐水溶液冻存所制感受态细胞。在电压2.5kV、电阻200Ω、电容25μF的条件下进行电转化,电击冰浴(0～10min)后测定转化效率。结果于25℃水浴振荡培养细菌、10%甘油-生理盐水溶液冻存感受态细胞、电转化后冰浴6min,转化效率高达1.01×1010CFU/μg DNA。结论该法适合于大肠杆菌DH5a,可获得较高的转化效率。
- 张晓楠肖玉黄勇张秀敏王涛王丽关璐媛赵玮钦
- 关键词：感受态细胞电穿孔
