牛荣成
- 作品数：5 被引量：3H指数：1
- 供职机构：新乡医学院更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生经济管理更多>>
- 肠毒素C2第20和22位氨基酸对其超抗原活性的影响
- 2014年
- 目的:揭示突变蛋白SEC2(T20L/G22E)超抗原活性较野生型SEC2显著增强的潜在机制。方法:WST-1法检测突变蛋白SEC2(T20L/G22E)在体外刺激小鼠脾淋巴细胞增殖活性,进一步应用流式细胞术和荧光定量PCR技术分别检测CD4+和CD8+T淋巴细胞增殖、特异性VβT淋巴细胞增殖以及相关细胞因子mRNA丰度变化。结果:与野生型SEC2相比,突变蛋白SEC2(T20L/G22E)能够在体外显著刺激小鼠脾淋巴细胞增殖,但二者具有相似的特异性VβT淋巴细胞增殖谱,并且SEC2(T20L/G22E)能够较rSEC2激活更多携带有Vβ5.3、Vβ8.1及Vβ8.3的T淋巴细胞;进一步体内实验发现SEC2(T20L/G22E)能够较rSEC2激活更多外周血和脾脏中CD4+和CD8+T淋巴细胞增殖及相关细胞因子的表达。结论:突变蛋白SEC2(T20L/G22E)超抗原活性增强的机制可能是用亮氨酸和谷氨酸替代原来20和22位上的氨基酸后提高了SEC2(T20L/G22E)与特异性TCR-Vβ的亲和力,进一步激活更多的SEC2特异性T淋巴细胞,最终引起T淋巴细胞亚型的显著性增殖,同时诱导更多与抗肿瘤、增殖相关的细胞因子的表达。
- 刘彦礼牛荣成徐明恺李旭苏振成张惠文
- 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素C2超抗原T淋巴细胞细胞因子
- Zn^2＋及其谷氨酸结合位点突变对金黄色葡萄球菌肠毒素 C2超抗原活性的影响
- 2014年
- 目的：研究金黄色葡萄球菌（金葡菌）肠毒素C2（SEC2）中与Zn^2＋结合相关的谷氨酸残基突变及Zn^2＋自身对其超抗原活性的影响。方法应用定点突变技术将SEC2中与Zn^2＋结合相关的谷氨酸残基突变成丙氨酸残基，分离纯化后获得突变蛋白rSEC2（E71A）、rSEC2（E80A）及rSEC2（E71A/E80A）；突变蛋白的超抗原活性及Zn^2＋对SEC2超抗原活性的影响通过MTT法检测其刺激小鼠脾淋巴细胞的增殖来验证，而结构稳定性通过对胃蛋白酶及胰蛋白酶的抵抗能力来检测。结果蛋白酶酶切结果与脾淋巴细胞增殖实验结果表明参与第2个Zn^2＋结合的71位及80位谷氨酸残基突变对SEC2的酶解稳定性及超抗原活性没有显著影响；但微量Zn^2＋（10μmol/L）却能显著增强rSEC2的超抗原活性，并且在EDTA存在下，仅有Zn^2＋在一定浓度下才可完全恢复其超抗原活性。结论SEC2分子中的Zn^2＋结合位点的突变对其自身结构稳定性和超抗原活性无显著影响，但SEC2超抗原活性发挥过程中Zn^2＋可能通过其他途径间接影响其超抗原活性。
- 刘彦礼牛荣成徐明恺李旭孙健张惠文
- 关键词：ZN^2+金黄色葡萄球菌肠毒素C2超抗原
- 金葡菌类肠毒素K原核表达载体构建及其生物学活性分析被引量：3
- 2015年
- 目的:金葡菌类肠毒素K(SElK)原核表达载体构建及其生物学活性初步分析。方法:通过常规分子生物学技术将SElK基因片段插入载体p ET-28a中,阳性单菌落扩大培养,诱导目的基因表达后通过Ni+亲和层析纯化SElK重组蛋白;小鼠脾淋巴细胞增殖实验及尾静脉注射后血常规检测SElK超抗原活性;进一步通过检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)活性及尿素(Urea)和肌酐(CR)含量来评价SElK潜在肠毒性。结果:成功构建SElK原核表达载体,并通过Ni^+亲和层析获得高纯度SElK重组蛋白(>95%);随后的超抗原活性检测发现SElK能够在体外刺激小鼠脾淋巴细胞显著增殖,尾静脉注射后能够有效地刺激血液中淋巴细胞增殖;最终的肠毒性检测结果发现SElK能够显著增加血清中AST活性及Urea含量。结论:成功构建并纯化获得高纯度SElK重组蛋白,并对其超抗原活性及潜在肠毒性进行初步分析,为开发更优的抗肿瘤制剂提供备选药物。
- 刘彦礼牛荣成杨芬朱文慧林俊堂
- 关键词：超抗原血常规
- “双碳”背景下河南省加快发展绿色低碳产业的路径探讨——以生物基产业为例
- 2024年
- 中国对气候变化的重视和承诺具有全球意义,通过“双碳”战略实现减排目标并加大可再生能源发展力度。生物经济可循环利用资源,促进低碳产业发展,已被多国采纳。文章探讨了生物经济在推动绿色低碳产业发展中的重要作用,并比较了美国、欧盟等国家的生物经济发展战略。重点阐述了生物基产业对于生物经济发展和绿色低碳产业发展的作用,对河南省生物资源和发展现状进行了分析,提出了发展生物基产业的优势和策略。最后,建议通过提升产业综合竞争力,打通生物基产品产业链,培育龙头企业等措施推动河南省生物基产业发展。
- 李涛孟凡玲牛荣成王燕井长勤
- 关键词：可持续发展生物经济
- 一种经血源性子宫内膜干细胞的分离提取方法
- 本发明涉及一种经血源性子宫内膜干细胞的分离提取方法，其包括以下步骤：1)取经血样本，加入样本保存液混匀，然后进行离心，收集沉淀物；2)将步骤1)得到的沉淀物加入红细胞裂解液中，混匀后静置进行裂解，然后进行离心，收集沉淀物...
- 林俊堂刘彦礼牛荣成杨慈清乔梁管丽红李小英杨芬孙钰椋
- 文献传递
