燕志光
- 作品数：8 被引量：7H指数：2
- 供职机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 小鼠精子激活力减弱模型制备技术的初步研究
- 2013年
- 【目的】:人类辅助生殖技术中,低受精率的发生机理及辅助激活提高受精率的安全性尚不清楚,缺乏激活力减弱的精子模型是其中一个主要研究障碍。本研究拟探索减弱小鼠精子激活力的新技术。【方法】首先,分别对精子进行化学破膜、机械脱尾及其联合操作于37℃孵育12 h,比较各操作对显微授精后的受精率的影响;然后进一步结合时间因素,观察处理时间与精子激活力减弱程度的联系。同时,对操作后的胚胎早期发育的影响也进行了相应观察。【结果】①化学破膜法与机械脱尾法对精子破膜并温育后,均能有效降低精子受精率;②相对于正常的精子,对小鼠精子进行吹打机械脱尾,37℃下温育2、4、8、12 h后,受精率和卵裂率均出现程度逐步增加的显著降低(P<0.01);③与对照相比,以吹打机械脱尾并37℃下温育后的精子进行显微授精后,其受精卵的囊胚率和孵出率也显著降低(P<0.001)。【结论】将小鼠精子机械脱尾并在37℃下温育,精子激活力随温育时间增加而显著降低,同时其胚胎发育能力下降。本研究初步探索了程度可控的降低精子受精激活力的新技术,其安全性及导致精子激活力下降的机制尚需进一步研究。
- 苗聪秀燕志光杨红梅龙慧柴蔚然梁红星于莎匡延平吕祁峰
- 关键词：卵胞浆内单精子显微注射受精率小鼠
- 受精过程中不同激活力强度对小鼠卵子线粒体三磷酸腺苷和活性氧生成的影响
- 2019年
- 目的通过对三磷酸腺苷(ATP)含量及活性氧(ROS)水平的检测,观察在小鼠卵子受精过程中不同水平的激活强度对卵子线粒体代谢的影响。方法采用我们已经建立的弱激活力小鼠精子对卵子进行卵胞质内单精子显微注射(ICSI)后,施以不同浓度的离子霉素(0μmol/L、2.5μmol/L、10μmol/L)处理10 min进行辅助激活,并以正常小鼠精子ICSI作为对照。根据处理方式分为4组:正常精子组(normal,N组)、激活力减弱精子(weak sperm,W组)、激活力减弱精子施以适度辅助激活剂组(weak sperm+moderate AOA,M组)、激活力减弱精子施以过度辅助激活剂组(weak sperm+excessive AOA,E组)。在ICSI后1.5~2 h内对卵子内ATP含量和ROS的水平进行检测。对未进行ICSI卵子组(oocyte,O组)进行ATP检测。结果①ATP含量检测显示:随着激活力的上升,O组[(2.005±0.053)pmol]、W组[(2.485±0.064)pmol]、M组[(3.763±0.075)pmol]的卵子内平均ATP含量逐步提高,且差异有统计学意义(P<0.0001);其中M组与N组[(3.573±0.068)pmol]平均ATP含量接近(P>0.05);E组虽较O组[(3.204±0.070)pmol]高,但其卵子的平均ATP含量显著小于N组(P<0.001)。②ROS水平检测显示:随着激活力的增加,W组(0.420±0.028,n=9)、M组(1.097±0.037,n=9)、E组(1.361±0.033,n=10)表现出ROS水平的逐步升高(P<0.001),其中M组与N组ROS水平(1.000±0.026,n=10)也比较接近,差异有统计学意义(P=0.044)。结论受精过程中激活力水平将对卵子线粒体代谢产生明显影响,对弱激活力小鼠精子显微受精后,行适度激活时,ATP产量增加,ROS生成较少;而过高的激活强度反而会引起ATP产量的下降和ROS生成的增多。
- 孙婷也周怡雯李文治闫铮燕志光于韦娜吕祁峰
- 关键词：受精卵胞质内单精子注射活性氧三磷酸腺苷
- 供体细胞、去核方法以及TSA处理对巴马小型猪手工克隆胚胎发育的影响被引量：1
- 2013年
- 本文用不同的供体细胞、去核方法以及TSA处理浓度研究其对巴马小型猪手工克隆胚发育的影响,试验结果发现:克隆胚的发育率在相同代次的不同供体细胞之间,极体定向和化学辅助去核法之间均无显著性差异(p>0.05);TSA浓度为40nmol/L时克隆胚的囊胚率最高,但与对照组相比无显著性差异(p>0.05)。这说明三种供体细胞均能支持巴马小型猪克隆胚的早期发育,化学辅助和极体定向去核法均为较好的去核方法。
- 苏克同燕志光孙如玉卢晟盛
- 关键词：去核方法TSA巴马小型猪
- 精子脱尾温育降低小鼠卵胞浆内单精子显微注射的受精率被引量：1
- 2013年
- 目的脱尾的精子头注射是小鼠显微授精的一种常用方法,脱尾对精子造成的膜损伤是否影响卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)的受精率和卵裂率尚不清楚,该研究拟初步探索精子的机械脱尾等膜损伤以及不同温育条件对ICSI的受精率和卵裂率的影响。方法首先,用机械吹打法处理小鼠精子悬液,使得部分精子脱尾,于不同温度下孵育,观察孵育温度对ICSI的受精率和卵裂率的影响;然后比较精子化学破膜与吹打脱尾处理后温育一定时间对显微授精的受精率、卵裂率的影响。结果相对于对照组,对小鼠精子进行吹打脱尾,经37℃下温育12 h后的显微授精双原核形成率和卵裂率显著下降(75.6%vs 15.1%,P<0.01;91.1%vs 18.9%,P<0.01),而4℃下温育12 h的结果未见正常受精率和卵裂率受显著影响。用Triton-100精子进行化学破膜后温育,尽管其没有机械脱尾法效果显著,也同样明显降低了受精率和卵裂率(P<0.01)。结论该研究初步提示,精子脱尾等破膜损伤在经37℃较长时间温育后会降低小鼠ICSI的受精率,常规小鼠ICSI操作中小鼠精子批量脱尾处理后不宜在37℃下放置过久。
- 苗聪秀燕志光杨红梅龙慧梁红星于莎匡延平吕祁峰
- 关键词：受精率卵裂率小鼠
- 磷脂酶C-zeta在卵子激活中的作用及研究进展被引量：2
- 2014年
- 磷脂酶C-zeta(PLC-ζ)是特异分布于睾丸组织的一种磷脂酶C,在哺乳动物的卵母细胞激活中起着极其重要的作用;其编码基因、蛋白分子和生化性质的改变与卵子激活缺陷、不育症密切相关。本文综述了PLC-ζ的结构和功能及其在卵子激活中的作用以及与男性不育的关联等内容,并对其最近的研究进行了简要概述。
- 燕志光卢晟盛卢晟盛
- 关键词：男性不育
- 巴马小型猪肾脏成纤维细胞转染外源基因条件的优化
- 引言体细胞克隆和转基因技术的结合是目前生产转基因动物的有效方法,建立针对特定细胞系和转染试剂的稳定高效的转染方法是关键环节之一。本文优化出巴马小型猪肾脏成纤维细胞转染的高效的转染条件,包括脂质体浓度、质粒浓度、质粒-脂质...
- 胡林林郝朝亮燕志光娄娟卢晟盛杨小淦卢克焕
- 文献传递
- 一种非Piezo依赖的高卵子存活率小鼠显微授精技术被引量：4
- 2012年
- 目的对已建立的非Piezo依赖的小鼠显微授精技术作进一步改良,以获得更高的卵子存活率。方法将卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)技术中对卵子深吸持后直接深穿刺(一步法非Piezo-ICSI组)的步骤分成两步进行(两步法非Piezo-ICSI组):先浅吸持后浅穿刺,再进一步深吸持后深穿刺;另以孤雌激活发育的卵子作为卵子质量对照组。比较两步法非Piezo-ICSI组与一步法非Piezo-ICSI组卵子的存活率、原核出现率和卵裂率。结果两步法非Piezo-ICSI组的卵子存活率(92.2%)显著高于一步法非Piezo-ICSI组(83.7%)(P<0.01);而原核出现率和卵裂率与一步法非Piezo-ICSI组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论小鼠卵子胞膜在被新型持卵管深吸持时的变形造成了部分卵子胞膜变脆,两步法吸持穿刺在深吸持前进行了穿刺,避免了脆性敏感时的穿刺,有利于卵子存活。
- 苗聪秀燕志光杨红梅梁红星于莎匡延平吕祁峰
- 关键词：卵胞浆内单精子显微注射卵子穿刺存活率小鼠
- 非Piezo依赖的小鼠显微授精新技术改良及其应用研究
- 小鼠的繁殖周期短，遗传信息丰富，其卵子、胚胎易于获得和培养，是进行ICSI研究的理想动物模型。但小鼠的Piezo-ICSI技术与人类卵子的ICSI技术在操作温度、破膜原理等方面存在较大差异，不能够很好地模拟人类卵子的IC...
- 燕志光
