焦石
- 作品数：8 被引量：16H指数：2
- 供职机构：中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
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- 苯并（a）芘诱导细胞周期以及G<sub>1</sub>期调节因子改变的c-Jun信号转导通路
- 苯并（a）芘（Benzo（a）pyrene,B（a）P）暴露与癌症的发生密切相关。随着近年来对细胞周期调控机制研究的不断深入,癌症的发生、发展与细胞增殖失控之间的关系也逐渐被人们所认识。尽管大量的研究证实B（a）P可诱导...
- 焦石
- 关键词：苯并(A)芘细胞周期C-JUNAKT
- 苯并(a)芘通过活化蛋白-1非依赖性通路诱导细胞中p53蛋白过表达及高磷酸化被引量：2
- 2008年
- 目的探讨苯并(a)芘[B(a)P]诱导的人胚肺成纤维细胞(HELF)中p53蛋白、p53磷酸化水平及亚细胞分布和活化蛋白-1(AP-1)活性的改变,以及p53与AP-1的上下游关系。方法转染p53小干扰RNAp53 siRNA质粒(p53-H)、载体CMV的HELF细胞(HELF/CMV)和转染AP-1荧光报告质粒的HELF细胞(AP-H)无血清培养48h后,加入2μmol/L B(a)P作用24h,用Western blot及免疫荧光法检测细胞中p53蛋白及p53磷酸化的改变,利用细胞核、细胞浆分离技术观察其亚细胞定位,用荧光检测法检测AP-1的相对活性。用AP-1的化学抑制剂curcumin抑制其活性,用p53的化学抑制剂pifithrin-α(PFT)抑制其表达,观察了二者的上下游关系。结果2μmol/L B(a)P作用24h后细胞内p53蛋白及p53蛋白20位丝氨酸磷酸化水平增加,并且主要分布在细胞核内;AP-1的活性增加。抑制AP-1活性后,对B(a)P诱导的p53蛋白含量增加没有明显的影响;抑制p53表达后,对B(a)P诱导的AP-1活性的增加没有明显影响。结论B(a)P通过AP-1非依赖的信号通路引起人胚肺成纤维细胞p53蛋白含量的增加。
- 叶萌刘秉慈贾效伟高艾焦石张凤梅
- 关键词：苯并(A)芘P53活化蛋白-1人胚肺成纤维细胞
- 苯并（a）芘通过活化蛋白-1-细胞周期蛋白D1／E2F-1信号通路引起细胞周期的改变被引量：1
- 2008年
- 目的探讨活化蛋白-1（activated protein-1，AP-1）在苯并（a）芘[benzo（a）pyrene，S（a）P]引起的人胚肺成纤维细胞（HELF）周期改变中的作用以及AP．1与细胞周期蛋白D1（cyclinD1）、细胞周期蛋白依赖激酶4（CDK4）和E2F-1／4的上下游关系。方法转染AP-1荧光报告质粒的HELF细胞（AP-H）无血清培养48h后，加入2μmol／LB（a）P作用24h，用荧光检测法检测AP-1的相对活性。用AP-1的化学抑制剂姜黄素（curcumin）抑制其活性，观察它与cyclin D1／CDK4和E2F-1／4的上下游关系。采用流式细胞仪检测细胞周期的变化，用Western blot检测细胞中cyclin D1、CDK4和E2F-1／4蛋白水平的改变。结果2μmol／LB（a）P作用24h后，G1期细胞比例由（71±2）％减少为（48±3）％，差异有统计学意义（P〈0．05）；AP-1的活性增加；cyclin D1／E2F-1的蛋白含量增加；CDK4／E2F-4的蛋白水平没有明显改变。抑制AP-1活性后，B（a）P诱导的细胞周期的改变被逆转，B（a）P诱导的cyclin D1／E2F-1蛋白含量的增加被抑制，CDK4／E2F-4蛋白含量没有明显改变。结论S（a）P通过AP-1引起HELF周期的改变。AP-1是cyclin D1／E2F-1的上游信号分子，但对CDK4／E2F-4的表达不具有调节作用。
- 叶萌刘秉慈贾效伟高艾焦石张凤梅
- 关键词：苯并(A)芘细胞周期蛋白D1转录因子细胞周期
- ERK和JNK/AP-1通路参与石英诱导的细胞周期改变被引量：8
- 2008年
- 目的探讨在石英刺激的人胚肺成纤维细胞（human embryo lung fibroblasts，HELF）中转录因子活化蛋白-1（activator protein-1，AP-1）的活性改变，以及丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase，MAPK）／AP-1通路在石英诱导的细胞周期改变中的作用。方法用200μg／ml石英处理HELF细胞；用免疫荧光法检测细胞外调节蛋白激酶（extracellular signal-regulated protein kinase，ERK）和c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase，JNK）蛋白磷酸化水平及细胞分布；运用AP-1荧光素酶报告基因技术检测AP-1荧光素酶活力；用MAPK显性失活突变体（dominant negative mutant,DN）（DNERK2、DN-JNK1和DN-p38）证明通路的上下游关系；用流式细胞术检测细胞周期变化。结果用200μg／ml石英分别处理转染AP-1报告基因的细胞（HELF-AP-1）6、12、24h，结果显示，AP-1活性随着时间变化而发生变化，6h活性增强，12h活性达峰值，24h活性略有降低；用200μg／ml石英分别处理细胞1和2h，结果显示，ERK和JNK在石英刺激1h后，磷酸化水平升高，主要集中于胞浆，2h后磷酸化水平进一步升高，并主要集中于胞核；200μg／ml石英处理细胞24h，G1期细胞所占比例从（63．80±9．57）％下降到（32.23±7.22）％，S期细胞所占比例从（35．17±10．33）％升高到（66．00±8．07）％；AP-1化学抑制剂姜黄素（20μmol／L）可明显减弱石英引起的G1期细胞比例减少和S期细胞比例增加；DN-ERK和DN-JNK的过表达均可明显降低石英诱导的AP-1活性增强，DN-p38的过表达对石英诱导的AP-1活性增强无明显影响。结论200μg／ml石英可诱导AP-1活性增强，并通过ERK、JNK／AP-1通路诱导细胞周期改变。
- 贾效伟刘秉慈史香林高艾叶萌张凤梅刘海峰焦石
- 关键词：石英细胞周期信号传递转录因子AP-1
- 苯并（a）芘诱导细胞周期以及G_1期调节因子改变的c-Jun信号转导通路
- 苯并(a)芘(Benzo(a)pyrene,B(a)P)暴露与癌症的发生密切相关。随着近年来对细胞周期调控机制研究的不断深入,癌症的发生、发展与细胞增殖失控之间的关系也逐渐被人们所认识。尽管大量的研究证实B(a)P可诱导...
- 焦石
- 关键词：苯并(A)芘细胞周期C-JUNAKTP53
- 文献传递
- c-Jun在肿瘤发生中作用的研究进展被引量：4
- 2008年
- c-Jun是核转录激活蛋白1（activation protein，AP-1）家族的组成成员。AP-1蛋白家族主要包括Jun（c-Jun、Jun-B和Jun-D）和Fos（c-Fos、FosB、Fra-1和Fra-2）2个蛋白家族。c-Jun不仅和Jun或Fos家族成员结合，以AP-1的形式发挥生物学功能，也可以单独作为转录因子参与基因转录调控。各种刺激如生长信号、紫外线或环境污染物可以诱导c-Jun活化，活化的c-Jun通过调节靶基因转录，参与增殖、分化和细胞凋亡等多种生理过程。c-Jun功能异常与许多疾病如恶性肿瘤、脑血管病等的发生密切相关。我们主要从增殖、分化、凋亡以及细胞周期等多个方面对c-Jun在肿瘤发生中的作用进行综述。
- 焦石刘秉慈刘海峰
- 关键词：C-JUN肿瘤发生基因转录调控PROTEIN家族成员FOSB
- p53蛋白在苯并（a）芘诱导的p21、E2F-1表达及细胞周期改变中的作用被引量：1
- 2008年
- 目的探讨p63蛋白在苯并（a）芘[benzo（a）pyrene，B（a）P]诱导的人胚肺成纤维细胞（HELF）细胞周期改变中的作用及其与p21、E2F-1的关系。方法转染p53siRNA质粒（p53-H）和载体CMV的HELF细胞（HELF／CMV）无血清培养48h后，加入2μmol／LB（a）P作用24h。用流式细胞仪检测细胞周期的变化。用Westernblotting检测细胞中p53、p21蛋白含量的改变，利用细胞核、细胞浆分离技术观察其亚细胞定位。用免疫荧光法观察E2F-1蛋白含量及细胞核、细胞浆分布。利用p53siRNA质粒和化学抑制剂pifithrin—α（PFT）抑制其表达，观察r63与p21、E2F-1的上下游关系以及其在B（a）P引起的细胞周期改变中的作用。结果2μmol／LB（a）P作用24h后，G1期细胞比例由（71±5）％减少为（39±4）％；p53、p21以及E2F-1蛋白含量增加，并且主要分布在细胞核内。用r63siRNA质粒和PFT抑制p53表达后，B（a）P诱导的p21高表达被抑制，细胞核内的含量明显减少；B（a）P诱导的e2F-1蛋白含量增加以及细胞周期的改变没有明显变化。结论B（a）P通过p53非依赖的信号通路引起HELF细胞周期的改变；p53对p21的表达具有调节作用，而对E2F-1的表达不具有调节作用。
- 叶萌刘秉慈贾效伟高艾焦石张凤梅
- 关键词：细胞周期
- c-Jun氨基末端激酶和细胞外调节蛋白激酶信号通路对苯并(a)芘诱导人胚肺成纤维细胞c-Jun活化的调控被引量：1
- 2007年
- 目的探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路在调控苯并(a)芘[B(a)P]诱导人胚肺成纤维细胞(HELF)c-Jun活化中的作用。方法2.0μmol/L B(8)P处理HELF 0、3、6、12、24 h后或加入不同浓度B(a)P(0.0、0.5、1.0、2.0μmol/L)处理12 h后,通过免疫印迹法检测B(a)P对细胞c-Jun活性的影响;利用p38、c-Jun氨基末端激酶(JNK)以及细胞外调节蛋白激酶(ERK)的显性失活突变体分别阻断p38、JNK和ERK活性后,观察3种MAPKs信号分子与B(a)P诱导c-Jun活化之间的关系。结果在所观察的B(a)P作用时间和浓度范围内,c-Jun蛋白表达量无明显变化;B(a)P可诱导细胞内磷酸化c-Jun (Ser63/Ser73)水平增高,并随着作用时间的延长,细胞内c-Jun的磷酸化水平也逐渐增强,至12 h达到峰值(1.61±0.12,1.82±0.18),c-Jun磷酸化Set63、Ser73与actin灰度比值分别是对照组的20.1倍、15.2倍,作用24 h时细胞内c-Jun磷酸化水平呈现下降趋势,而且随着B(a)P浓度的增加,细胞内c-Jun的磷酸化水平也逐渐升高,呈现剂量-反应关系;使用显性失活突变体分别阻断JNK和ERK活性均可明显抑制B(a)P诱导细胞c-Jun磷酸化水平增加,但是阻断p38活性对B(a)P诱导细胞c-Jun磷酸化水平升高无明显影响。结论JNK和ERK信号通路调控B(a)P诱导的HELF细胞c-Jun活化,B(a)P促进c-Jun磷酸化的过程与p38信号通路无关。
- 焦石刘秉慈史香林黄传书高艾叶萌贾效伟
- 关键词：苯并(A)芘成纤维细胞
