潘宝华
- 作品数：5 被引量：14H指数：3
- 供职机构：江苏科技大学生物与化学工程学院更多>>
- 发文基金：农业部作物种质资源保护项目国家现代农业产业技术体系建设项目国家科技基础性工作专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学化学工程更多>>
- 桑树苯丙氨酸解氨酶和MYB转录因子基因克隆与表达分析
- 苯丙氨酸解氨酶(Phenylalanine ammonia-lyase, PAL, EC 4.3.1.5)是催化植物次生代谢途径中苯丙烷类代谢的第一个关键酶。PAL与植物的生长发育和自身防御紧密相关。本文运用简并引物经R...
- 潘宝华
- 关键词：桑树苯丙氨酸解氨酶MYB转录因子基因克隆
- 文献传递
- 桑树光合系统Ⅰ psaE基因的克隆及表达分析被引量：4
- 2010年
- 利用桑树(MorusL.)表达序列标签(EST),采用RT-PCR方法克隆了桑树光合系统Ⅰ(PSⅠ)psaE基因的全长cDNA序列,命名为MpsaE(GenBank登录号:GU645972)。序列分析表明,该基因序列全长705bp,存在97bp的5′端非翻译区和170bp的3′端非翻译区,其开放阅读框(ORF)长438bp,编码含有146个氨基酸的蛋白,预测蛋白分子质量为15.38kD,等电点为8.08。同源性分析表明,MpsaE编码蛋白与柑桔(Citrus sinensis)、毛果杨甙(Populus trichocarpa)和欧美杨(Populus eu-ramericana)psaE基因编码的蛋白具有较高的同源性,相似性达到98%。基于MpsaE与其它18个物种的psaE基因编码氨基酸序列构建的系统进化树显示,桑树与柑桔、蓖麻(Ricinus)、毛果杨甙和欧美杨的亲缘关系较近。半定量RT-PCR分析表明,MpsaE基因mRNA在桑树不同组织及部位的转录水平有明显差异:在叶片中的转录水平较高,其中幼叶(刚展开的第1片叶)和中部叶片(8-10位叶)的转录水平最高,其次为上部叶片(2-3位叶)、顶芽和下部叶片;在根部的转录水平最低。初步推测MpsaE基因是桑树PSⅠ参与某些光合生理反应的一个亚基。
- 林强扈东青方荣俊赵卫国朱方容张英华刘赵越潘宝华刘利张林潘刚
- 关键词：桑树基因克隆基因表达
- 应用响应面法优化超声波辅助提取桑叶总黄酮的工艺条件被引量：4
- 2012年
- 为高效提取桑叶中富有的黄酮类活性成分,在对超声波辅助提取桑叶总黄酮工艺中的主要条件进行单因素试验的基础上,采用响应面二阶设计方法,以桑叶总黄酮提取率为响应值,选择提取时间、乙醇体积分数、原料质量浓度进行3因素3水平优化试验设计,并对结果进行多元回归分析后建立各因素对桑叶总黄酮提取率影响的二次多项回归模型,得到超声波辅助提取桑叶总黄酮的最佳工艺条件为:提取温度50℃,乙醇体积分数80%,原料质量浓度0.025 g/mL,提取时间40 min。在此工艺条件下桑叶总黄酮提取率的预测值为1.60%,验证值为1.59%,表明建立的优化数学回归模型能较好地预测超声波辅助提取桑叶总黄酮的提取率,优化的工艺条件具有实用参考价值。
- 周宏潘宝华王琳刘利
- 关键词：响应面法超声辅助提取桑叶总黄酮
- 桑树MYB转录因子基因MaMYB的克隆与表达分析
- MYB转录因子是植物转录因子中最大的家族之一，可特异的识别结合基因启动子中的MYB顺式作用元件， 调控植物次生代谢及胁迫相关的基因表达。本文运用简并引物经RT-PCR 方法从桑树幼叶cDNA 中分离到一段约 250bp ...
- 潘宝华潘刚方荣俊赵卫国张林程嘉翎刘利
- 关键词：桑树MYB转录因子基因克隆基因表达
- 桑树天冬酰胺合成酶基因的克隆与表达分析被引量：5
- 2011年
- 天冬酰胺合成酶B(asparagine synthetase,AS-B;EC 6.3.5.4)参与植物氮同化过程的催化与调节。在构建的盐胁迫下桑树(Morus L.)抑制消减杂交(SSH)文库中发现一个编码天冬酰胺合成酶的基因片段,采用cDNA末端快速扩增(RACE)方法获得2 061 bp的全长序列,完整的开放读码框(ORF)长1 761 bp,编码586个氨基酸,预测蛋白分子质量65.66 kD,将该基因命名为桑树天冬酰胺合成酶基因(MaAS,GenBank登录号:HQ025955)。序列分析显示,MaAS编码的蛋白包括2个保守的功能域(谷氨酰胺-氨基转移结构域和合成酶结构域),与其它植物天冬酰胺合成酶的氨基酸序列相似性在75%以上。将MaAS基因开放读码框连接到pET28a(+)表达载体中,转化大肠杆菌BL21后,诱导表达的MaAS重组蛋白分子质量大小与预测的分子质量一致。采用邻接法构建的桑树和其它植物基于MaAS蛋白氨基酸序列的系统进化树显示:桑树、葡萄(Vitis vinif-era)、毛果杨(Populus trichocarpa)、蓖麻(Ricinus communis)聚为一类,亲缘关系较近。半定量RT-PCR分析表明,MaAS基因在桑树不同部位的转录水平存在明显差异,在盛花期的雌花中转录水平最高,尚未木质化的幼根和成熟桑椹中的转录水平较高,幼茎的茎皮和木质部中的转录水平较低,嫩叶中的转录水平很低,腋芽中的转录水平最低。
- 潘宝华潘刚方荣俊赵卫国张林程嘉翎刘利
- 关键词：桑树基因克隆基因表达
