沈芸
- 作品数：10 被引量：10H指数：2
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- 绒癌肺转移并发呼吸衰竭23例临床资料分析
- 目的：探讨绒癌肺转移并发呼吸衰竭患者临床表现、治疗方法和预后影响因素。方法：回顾性分析了1983年1月至2010年1月北京协和医院收治的绒癌肺转移并发急性呼吸衰竭23例患者的临床表现、潜在病因、治疗方法、风险因素和结局。...
- 沈芸向阳任彤万希润冯凤芝
- 关键词：绒癌肺转移呼吸衰竭临床病理
- 活性氧介导P62蛋白激活参与甲氨蝶呤耐药绒癌发病机制研究
- 2014年
- 目的探讨甲氨蝶呤(MTX)耐药绒癌的发生机制。方法 2012年5月至2013年1月于北京协和医院以人绒毛膜上皮癌JEG-3细胞及本课题组前期构建的MTX耐药绒癌JEG-3/MTXR细胞为研究对象,采用免疫印迹、RTPCR法检测MTX处理后细胞内P62的变化。流式细胞仪检测MTX诱导后JEG-3/MTXR细胞内活性氧(ROS)变化,采用ROS清除剂Mn Tm Py P检测MTX作用后JEG-3/MTXR细胞内P62蛋白水平的变化。RNA干扰法沉默P62基因免疫印迹法和流式细胞仪检测MTX诱导后JEG-3/MTXR耐药细胞内PARP蛋白的表达和凋亡率的变化。结果 MTX可诱导耐药绒癌P62蛋白和m RNA表达水平呈时间依赖性上调。MTX可诱导耐药绒癌ROS表达水平升高,Mn Tm Py P降低P62蛋白的表达。P62-si RNA可促进JEG-3/MTXR细胞内MTX诱导的凋亡反应蛋白PARP的切割和激活,流式细胞仪检测RNA干扰联合药物组细胞凋亡率(14.4±1.02)%,高于单纯药物应用组(9.1±1.34)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ROS介导P62蛋白激活参与MTX耐药绒癌发生机制,为耐药绒癌临床靶向治疗提供新思路。
- 沈芸肖长纪于珊宫美轩赵静向阳
- 关键词：绒癌耐药氧化应激反应P62
- 内质网应激介导的凋亡耐受在甲氨蝶呤耐药绒癌发生机制中的作用被引量：1
- 2015年
- 目的:初步探讨内质网应激介导的凋亡耐受在甲氨蝶呤耐药绒癌发生机制中的作用。方法:以人绒毛膜上皮癌JEG-3细胞及本课题组前期构建的甲氨蝶呤耐药绒癌细胞(JEG-3/MTXR)为研究对象。采用WST法评估甲氨蝶呤处理后JEG-3/MTXR和JEG-3亲本细胞的细胞活力,Western blot法测定两种细胞中caspase-9激活、GRP78和GADD153蛋白的表达。RNA干扰法沉默JEG/MTXR细胞中GADD153基因,Western blot法测定caspase-9蛋白激活的情况。结果:不同浓度梯度的甲氨蝶呤诱导后,JEG-3亲本细胞系的细胞生存率显著降低。相同浓度甲氨蝶呤作用后,JEG-3/MTXR细胞内切割caspase-9无增加,JEG-3亲本细胞内caspase-9激活并切割。JEG-3/MTXR和JEG-3细胞中GRP78表达水平呈时间依赖性上调;JEG-3/MTXR细胞中GADD153蛋白水平无显著上调,而JEG-3亲本细胞内出现显著上调。沉默GADD153基因可抑制MTX引起的切割caspase-9蛋白水平上调。结论:内质网应激介导的凋亡耐受可能参与甲氨蝶呤耐药绒癌发生机制。
- 沈芸向阳赵静肖长纪
- 关键词：耐药绒癌内质网应激甲氨蝶呤
- C1QBP基因在绒毛膜癌耐药细胞株中的表达及其与耐药的关系
- 2014年
- 目的 检测补体成分1Q亚成分结合蛋白（C1QBP）基因在绒毛膜癌（绒癌）耐药细胞株及其亲本细胞株中的表达差异,探讨以C1QBP基因为靶向的RNA干扰能否有效逆转绒癌耐药细胞株对相应化疗药物的耐药性.方法 （1）通过实时荧光定量PCR技术、蛋白印迹法和细胞免疫荧光法检测绒癌耐药细胞株,即氟脲嘧啶脱氧核苷（FUDR）耐药细胞株JeG-3/FUDR、甲氨蝶呤（MTX）耐药细胞株JeG-3/MTX、依托泊苷（VP-16）耐药细胞株JeG-3/VP、放线菌素D（ACTD,又称KSM）耐药细胞株JeG-3/KSM细胞,以及亲本细胞株JeG-3细胞中C1QBP mRNA和蛋白的表达及蛋白定位.（2）靶向构建C1QBP基因的短发夹状RNA（shRNA）,包装成C1QBP基因RNA干扰（RNAi）慢病毒表达载体,即C 1QBP-RNAi-LV,转染绒癌耐药细胞,实时荧光定量PCR技术及蛋白印迹法检测转染后绒癌耐药细胞株JeG-3/FUDR细胞和亲本细胞株JeG-3细胞中C1QBP mRNA和蛋白的表达,活细胞计数（CCK-8）法检测各绒癌耐药细胞的药物敏感性的变化.结果 （1）转染前绒癌耐药细胞株JeG-3/FUDR、JeG-3/MTX、JeG-3/VP、JeG-3/KSM细胞中C1QBP mRNA表达水平分别为2.520±0.680、1.770±0.230、1.940±0.090、1.740±0.350,均明显高于亲本细胞株JeG-3细胞（为1.000）,差异均有统计学意义（P＜0.05）.4种绒癌耐药细胞中C1QBP蛋白表达强度均高于亲本细胞株JeG-3细胞;绒癌耐药细胞和亲本细胞中均存在C1QBP蛋白的表达,均定位于细胞内的线粒体.（2）转染后绒癌耐药细胞株JeG-3/FUDR细胞中C1QBP mRNA表达水平下调了93.1％（P＜0.01）,C1QBP蛋白表达完全被抑制.（3）转染后绒癌耐药细胞株JeG-3/FUDR、JeG-3/MTX、JeG-3/VP和JeG-3/KSM细胞的耐药指数较其相应RNAi阴性对照分别下降了86.3％、93.9％、92.8％和89.9％,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 C1QBP基因在绒癌耐药细胞株中表达明显增高,沉默C1QBP基因表达可以有效逆转绒癌耐药细�
- 沈晓燕韩冰沈芸杨隽钧任彤沙桂华向阳
- 关键词：绒毛膜癌载体蛋白质类线粒体蛋白质类RNA干扰
- 子宫肌瘤^18F-FDG PET-CT扫描阳性二例报道及文献复习被引量：2
- 2011年
- 正电子发射体层摄影术（PET）-CT是利用正电子示踪剂[如2-^18F-2-脱氧-D-葡萄糖（^18F-FDG）]选择性反映组织器官的代谢情况,同时利用CT图像对PET图像病变部位进行解剖定位,可用于恶性肿瘤的临床诊断.子宫肌瘤是发生在生育期女性最常见的一种良性盆腔肿瘤,发病率为25%～35%.通常情况下PET-CT扫描子宫肌瘤病灶后不显示^18F-FDG的摄取.
- 沈芸向阳冯凤芝朱朝晖万希润
- 关键词：^18F-FDG子宫肌瘤正电子发射体层摄影术文献复习阳性
- 子宫肌瘸PET-CT扫描阳性2例报道及文献复习
- 子宫肌瘤是发生在生育期女性最常见的一种良性盆腔肿瘤，发病率25-35%。通常情况下PET-CT扫描子宫肌瘤病灶后不显示18F-FDG的摄取。有文献报道可利用PET-CT对子宫肌瘤和子宫肉瘤进行鉴别诊断。本文报道了2例有子...
- 沈芸向阳冯凤芝朱朝晖万希润
- 关键词：子宫肌瘤病例分析
- 转录因子c-Jun对甲氨蝶呤耐药绒毛膜癌细胞内自噬标志蛋白LC3的调节作用被引量：1
- 2014年
- 目的：初步探讨转录因子c-Jun对甲氨蝶呤耐药绒毛膜癌细胞内自噬标志蛋白--微管相关蛋白1轻链3（LC3）的调节作用。方法以人绒毛膜癌细胞株JEG-3及前期构建的甲氨蝶呤耐药绒毛膜癌细胞株JEG-3/MTXR为研究对象，采用蛋白印迹法检测甲氨蝶呤药物处理后细胞内磷酸化c-Jun氨基末端激酶（p-JNK）和磷酸化c-Jun（p-c-Jun）的表达变化，以及JNK抑制剂SP600125对p-c-Jun蛋白表达的影响。RNA干扰技术沉默c-Jun基因检测甲氨蝶呤处理后JEG-3/MTXR细胞内LC3 mRNA和蛋白的表达。染色质免疫共沉淀（ChIP）法结合实时荧光定量PCR技术测定甲氨蝶呤药物作用后JEG-3/MTXR细胞内c-Jun蛋白结合于LC3启动子上的相对富集量。结果（1）甲氨蝶呤作用后JEG-3/MTXR细胞内p-JNK和p-c-Jun蛋白的相对表达量呈时间依赖性上调，作用72 h时相对表达量分别为1.16±0.18、1.99±0.20，较0 h升高（分别为0.41±0.05、0.20±0.06），分别比较，差异均有统计学意义（P〈0.05）；SP600125抑制了甲氨蝶呤作用后JEG/MTXR细胞内p-c-Jun蛋白表达的上调，甲氨蝶呤作用后JEG/MTXR细胞内p-c-Jun蛋白的相对表达量为1.11±0.20，高于SP600125联合甲氨蝶呤者（0.30±0.04），两者比较，差异有统计学意义（P〈0.05）。（2）针对c-Jun基因的小分子干扰RNA （siRNA）--c-Jun-siRNA抑制了甲氨蝶呤诱导的JEG/MTXR细胞内LC3 mRNA和蛋白表达的上调，甲氨蝶呤联合c-Jun-siRNA作用后JEG-3/MTXR细胞内LC3 mRNA和蛋白的相对表达量分别为1.24±0.17、0.52±0.07，低于甲氨蝶呤联合无义siRNA者（分别为3.03±0.43、1.20±0.15），分别比较，差异有统计学意义（P〈0.05）。（3）甲氨蝶呤作用后JEG/MTXR细胞内c-Jun结合于LC3启动子的相对富集量是无甲氨蝶呤作用者的（2.95±0.35）倍。结论转录因子c-Jun对LC3的调节作用可能参与绒毛膜癌发生甲氨蝶呤耐药的机制。
- 沈芸向阳肖长纪赵静
- 关键词：绒毛膜癌甲氨蝶呤微管相关蛋白质类自噬
- 细胞自噬在甲氨蝶呤耐药绒癌中的保护性作用被引量：2
- 2013年
- 目的:通过检测耐药绒癌细胞内自噬的变化,以及评估抑制自噬或敲除自噬相关基因后细胞凋亡情况,探讨细胞自噬在耐药绒癌中的作用。方法:以人绒毛膜上皮癌JEG-3细胞及本课题组前期构建的甲氨蝶呤(MTX)耐药绒癌JEG-3/MTXR细胞为研究对象。采用透射电镜、免疫荧光法观察MTX处理后细胞内自噬的变化;Western blot法检测自噬相关蛋白LC3、Beclin-1的表达变化。RNA干扰法沉默自噬相关基因LC3后,采用Western blot法和Annexin-Ⅴ/PI双染法流式细胞仪检测MTX作用后JEG-3/MTXR耐药绒癌细胞凋亡的变化。结果:透射电镜和荧光显微镜下均可观察到MTX处理后JEG-3、JEG-3/MTXR细胞内自噬小体的产生;IC30浓度MTX处理后,两种细胞内自噬相关蛋白LC3、Beclin-1表达水平上调。相同浓度MTX处理后,JEG-3细胞内LC3、Beclin-1表达下调。沉默自噬相关基因LC3后,沉默LC3联合MTX组的JEG-3/MTXR和JEG-3细胞内凋亡相关蛋白caspase-9表达上调,凋亡率显著增多。结论:MTX可诱导耐药绒癌产生保护性自噬。
- 沈芸赵静肖长纪向阳
- 关键词：绒癌耐药自噬甲氨蝶呤
- 恶性妊娠滋养细胞肿瘤伴脏器转移治疗进展被引量：1
- 2011年
- 现阶段恶性妊娠滋养细胞肿瘤（GTN）患者的生存率得到了很大提高，但是全世界范围内仍有10％GTN患者死亡。据报道GTN患者死亡原因主要为多脏器转移致多器官功能衰竭，脑转移致颅内出血，耐药的发生。
- 沈芸向阳
- 关键词：妊娠滋养细胞肿瘤脏器转移
- 绒癌肺转移并发呼吸衰竭23例临床分析被引量：3
- 2011年
- 目的:探讨绒癌肺转移并发呼吸衰竭患者临床发病特点、治疗方法和预后影响因素。方法:回顾分析1983年～2010年北京协和医院收治的绒癌肺转移并发急性呼吸衰竭23例患者的临床发病特点、潜在病因、治疗方法、风险因素和结局。结果:本组23例患者中18例(78.3%)伴有肺部感染,11例(47.8%)伴有肺出血,2例胸腔积血,1例肺大泡并气胸。本组23例患者均接受了呼吸支持治疗,其中21例采用以氟尿嘧啶为主或以甲氨蝶呤为主的多药联合方案,平均化疗4.5疗程。21例患者经呼吸支持治疗和化疗后,7例(33.3%)临床完全缓解,2例(9.5%)临床部分缓解,4例(19%)放弃治疗,8例(38.1%)病情进展死亡。其中8例在呼吸衰竭急性发作期间首程采用依托泊苷+放线菌素D或放线菌素D+甲氨蝶呤联合化疗方案,6例(75%)最终临床完全缓解。结论:肺部感染、出血等肺部疾患是引起绒癌肺转移患者发生早期呼吸衰竭的常见原因。绒癌肺转移并发呼吸衰竭患者首程治疗宜采用较温和的抗肿瘤药物和治疗方案。呼吸支持同时积极化疗是治疗绒癌肺转移呼吸衰竭的重要手段。
- 沈芸向阳任彤万希润冯凤芝
- 关键词：绒癌肺转移呼吸衰竭
