沈洁
- 作品数：15 被引量：19H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市科委基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 血管紧张素转换酶2在SARS-CoV感染中的功能(第1部分)——血管紧张素转换酶2基因剔除小鼠的建立被引量：1
- 2005年
- 目的血管紧张素转换酶是肾素-血管紧张素系统的重要组成部分。血管紧张素转换酶主要功能是通过把血管紧张素Ⅰ转换成血管紧张素Ⅱ来调节血压,最新的研究显示它也是SARS冠状病毒的一种受体。建立血管紧张素转换酶2基因剔除小鼠,为进一步的SARS机理研究提供工具。方法通过将D3小鼠胚胎干细胞DNA进行同源重组,用反向表达的新霉素基因替代ACE2基因-2000 bp至+489 bp的DNA片段,并用Western blot检测纯合体小鼠ACE2基因的表达。结果血管紧张素转换酶2基因剔除小鼠ACE2基因的表达被完全阻遏。结论建立了ACE2基因剔除小鼠。
- 秦川刘先菊沈洁董伟张扬清宋明晶邸冉张连峰
- 关键词：基因剔除ACE2小鼠
- 人类线粒体转移方法初报被引量：2
- 1999年
- 将人肝脏匀浆、差速离心、等密度梯度离心纯化得到线粒体,通过显微注射法将其转移到小鼠的受精卵细胞质内,有61 % 的卵注射后存活,而存活的卵中53 % 能顺利完成第一次卵裂。
- 蔡炯沈洁王婷鞠丽梅刘一农
- 关键词：线粒体存活等密度注射胞质受精卵
- 中国昆明(KM)小鼠线粒体DNA限制性内切酶图谱的研究被引量：3
- 1993年
- 线粒体DNA的限制性内切酶图谱在不同的种系及亚种间存在多态性。我们分别用五种限制性内切酶BamHⅠ、EcoRⅡ、HidⅢ、PstⅠ、MspⅠ对60只中国KM小鼠(雌雄各半)的线粒体DNA进行了酶切电泳分析,结果未发现多态性,且这五种限制性内切酶图谱均与BALB/c小鼠相同。这表明中国KM小鼠与绝大多数实验小鼠一样,均起源于欧州的野鼠M.m.domesticu。未见到KM小鼠经其它亚种野鼠母系遗传污染的迹象。
- 史顺娣谢清梅赵宏旭沈洁
- 关键词：限制性内切酶KM小鼠野鼠线粒体DNA实验小鼠电泳分析
- 转人组织蛋白酶K基因小鼠的Southern杂交鉴定被引量：3
- 2005年
- 目的 用地高辛标记探针的方法进行Southern杂交 ,以检测转人组织蛋白酶K基因小鼠外源DNA的整合情况 ,筛选携带目的基因的阳性小鼠。方法 用地高辛标记探针的方法 ,对转人组织蛋白酶K基因小鼠 (F0代 )及首建阳性鼠与野生型ICR小鼠交配产生的F1代进行Southern杂交 ,对F0代和F1代进行筛选。结果 经显微注射法 ,共获得 2 5只转基因小鼠 ,通过Southern杂交鉴定 ,1只为阳性 ,阳性率为 4 % ;对PCR阳性的F1代小鼠 35只进行Southern杂交 ,结果全部为阳性。结论 外源基因 (人CathepsinK基因 )已整合到小鼠的染色体上 ,并且能够遗传。
- 祝梅香邹星沈洁王嫣徐凤郭金微张晶李亦平
- 关键词：小鼠SOUTHERN杂交组织蛋白酶地高辛标记探针外源DNA
- EcoRⅡ甲基化酶基因在小鼠NIH3T3细胞中的表达
- 1998年
- CG外甲基化在哺乳动物细胞中的生物学意义仍不清楚。建立了特定位点CCWGG（W＝A／T）甲基化的哺乳动物细胞株。来自大肠杆菌的EcoRⅡ甲基化酶（催化CCWGG→CmCWGG）基因经定点诱变后重组到真核表达载体pCI－neo上，采用脂质体介导的方法将其转染小鼠NIH3T3细胞，经G418筛选获得有效表达的细胞株，酶切证实该细胞株基因组DNA上的大部分EcoRⅡ识别位点已被甲基化，PCR鉴定EcoRⅡ甲基化酶基因已稳定整合到细胞染色体上。
- 刘金毅孟雁赵晓娟沈洁蔡有余
- 关键词：NIH3T3细胞酶基因哺乳动物细胞定点诱变
- 全文增补中
- PCR技术在转人肾素基因小鼠繁殖保存及育种中的应用
- 2000年
- 应用聚合酶链反应（ＰＣＲ， Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ Ｃｈａｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ）方法检测转基因小鼠繁殖及有种过程中外源基因的整合，筛选携带目的基因的阳性仔鼠。
- 沈洁张晓娟陈兰英田玉书蔡炯祝梅香秦川刘一农蔡有余
- 关键词：肾素基因小鼠阳性仔鼠PCR技术育种过程
- 非胰岛素依赖型糖尿病小鼠模型KK/Upj-Ay/J的繁殖与保存方法
- KK/Upj-A
- 张晓娟田玉书刘志红沈洁刘一农
- 一种快速提取小鼠基因组DNA的方法
- 1998年
- 本文建立一套简易、快速从小鼠肝（肾）组织中提取高分子量ＤＮＡ的方法，此法产率高，比较经济，其纯度可直接应用于ＰＣＲ进行小鼠遗传监测。
- 沈洁孟雁薛越强刘亮赵晓娟史燕燕陈彤刘金毅方芳
- 关键词：小鼠基因组DNA快速提取方法PCR实验动物
- 长爪沙鼠线粒体DNA限制性物理图谱的研究被引量：4
- 1994年
- 长爪沙鼠线粒体ＤＮＡ经限制性内切酶ＢａｍＨＩ、Ｂｇ１Ⅱ、ＥｃｏＲＩ和ＰｓｔＩ水解后分别产生１个、５个、６个和３个片段，其中少量动物经Ｂｇ１Ⅱ或ＥｃｏＲＩ酶切后各水解为４个片段。对上述片段的分子量进行了测定，长爪沙鼠线粒体ＤＮＡ分子量为１６．０５ｋｂ．以ＢａｍＨＩ单一酶切点作零点，ＰｓｔＩ酶切片段ｃ→ａ为顺时针方向，根据双酶解产物和不完全酶解产物分析定位，得到了４种内切酶水解产生的１５个片段组成的物理图谱。
- 史顺娣沈洁
- 关键词：长爪沙鼠线粒体DNA酶解产物
- 转人组织蛋白酶K基因鼠系的PCR检测
- 2004年
- 目的用PCR技术检测转人组织蛋白酶K基因鼠系,筛选携带目的基因的阳性小鼠。方法用PCR技术,对显微注射后出生的转人组织蛋白酶K基因小鼠、首建鼠的F1、F2、F3及F2代与野生型ICR小鼠的回交后代进行检测。结果共检测显微注射后出生的小鼠25只,阳性为1只,阳性率为4%;检测F1、F2、F3代小鼠分别为60、77和69只,阳性仔鼠数为35、56和63只,阳性率分别为550%、727%和913%;对回交后代进行检测,未见纯合的F2代小鼠。结论外源基因(人组织蛋白酶K基因)已经整合到小鼠的染色体上,并且按孟德尔遗传定律中的分离定律进行遗传。
- 祝梅香邹星徐凤沈洁王嫣郭金微张晶李亦平
- 关键词：组织蛋白酶基因PCR技术回交后代PCR检测
