汪青
- 作品数:8 被引量:37H指数:4
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 应用共聚焦激光扫描技术研究阿片受体介导胞内Ca^(2+)增高的调节机制被引量:7
- 2000年
- 目的 观察阿片激动剂急性和长时程作用于稳定表达 i NOS基因的 NG- L NCXi NOS细胞 ,对细胞内游离钙 ([Ca2 + ]i)的影响及 G-蛋白的调节作用。方法 应用共聚焦显微镜和荧光探针 Fluo- 3,监测单细胞 [Ca2 + ]i 含量变化。结果 δ-阿片激动剂 DPDPE和吗啡急性刺激细胞诱发 [Ca2 + ]i 增加 ,纳洛酮对其起翻转作用 ;用百日咳毒素预处理细胞后 ,吗啡急性刺激不能引起 [Ca2 + ]i 增加 ;DPDPE和吗啡长时程处理细胞 ,再用相应的阿片激动剂急性刺激也造成 [Ca2 + ]i 增加 ,但 [Ca2 + ]i 增加水平较低 ,用纳洛酮戒断造成 [Ca2 + ]i 明显增加。结论 阿片激动剂诱发[Ca2 + ]i 增加是由阿片受体介导的 ,受对 PTX敏感的 G-蛋白调节 ,当细胞发生阿片耐受和依赖时 ,表现为受体介导 Ca2 + 系统的脱敏现象。
- 臧梦维沈琦孙越汪青刘景生
- 关键词:Δ-阿片受体阿片类药物依赖细胞内游离钙
- 雌二醇对人类成骨细胞HOS TE85增殖及Ⅰ型胶原产生的影响被引量:3
- 1999年
- 雌激素替代疗法对更年期骨质疏松的预防及治疗效果显著,但作用机理不很明确,本研究通过体外培养的人类成骨细胞HOSTE85,观察雌二醇对成骨细胞增殖及Ⅰ型胶原产生的影响。方法:在体外培养的人类成骨细胞HOSTE85培养液中,加入雌二醇(0.01-10nmol/L),分别培养24、48、72及96h,于结束培养前6h,加入3H-胸腺脱氧核苷检测细胞增殖;或于细胞开始培养时,加入3H-脯氨酸检测I型胶原产生。结果:在24h时,雌二醇刺激细胞增殖,但与对照组无显著差异;在48、72及96h时,雌二醇抑制细胞增殖。但无明显量效关系。在48、72h时,雌二醇明显刺激细胞I型胶原产生,量效关系显著,在96h时。也能刺激I型胜原产生。结论:雌二醇对人类成骨细胞HOSTE85增殖具有短期刺激,长期抑制的作用,对I型胶原产生具有促进作用,这可能是其临床治疗作用的主要机制。
- 龚海洋胡静汪青刘景生
- 关键词:雌二醇成骨细胞
- 吗啡长时程作用下小鼠脑组织磷酸肌醇含量和PKC活性的变化被引量:1
- 1998年
- 目的旨在进一步阐明阿片依赖中PLCPKC信号系统的变化与作用。用小鼠吗啡依赖模型,观察脑组织磷酸肌醇含量、PKC活性变化。结果发现:纹状体IP及IP3、大脑皮质IP含量明显升高,二者磷酸肌醇总量显著增加;胞质可溶相PKC活性在大脑皮质及小脑明显升高,在纹状体显著下降。膜相PKC活性在纹状体明显升高,在小脑和海马明显降低;PKC抑制剂可抑制吗啡依赖的产生。结果提示,吗啡依赖小鼠纹状体磷酸肌醇含量的增加意味着PLC的活化,这可能与纹状体中PKC的激活有关。
- 方芳王小明汪青刘景生
- 关键词:吗啡阿片依赖磷酸肌醇蛋白激酶C
- 雌激素促进人的类成骨细胞TE85成骨作用的受体机制被引量:12
- 1999年
- 目的:研究雌激素促进人的类成骨细胞株TE85细胞骨形成的作用。方法:用3H胸腺嘧啶、3H脯氨酸参入法分别测定细胞的增殖和胶原合成;紫外分光光度法测定细胞内骨碱性磷酸酶(ALP)活性;放免法测定细胞内骨钙素(BGP)含量;放射配基法测定细胞核雌激素受体结合。结果:雌激素(E2,001~10nmol·L-1)可浓度依赖地刺激TE85细胞的3H胸腺嘧啶和3H脯氨酸的参入量;在相同的时间点和剂量下,可增加成骨细胞内ALP活性和BGP的含量。结论:E2通过增加成骨细胞数量、促进细胞胶原蛋白及ALP和BGP的合成而促进成骨作用,这些作用是通过雌激素受体介导的。
- 孙兰汪青刘景生
- 关键词:雌激素成骨细胞骨钙素
- 甲基蓝对阿片类物质产生耐受和依赖的阻断作用被引量:4
- 1999年
- 目的:探讨鸟苷酸环化酶(sGC)抑制剂甲基蓝(MB)对阿片耐受和依赖的阻断作用。方法:体外培养iNOS稳定表达的神经细胞做为模型,竞争性蛋白结合法、放免法和3HArg转化3HCit法检测胞内cAMP,cGMP水平和NOS活性,激光共聚焦扫描技术测定胞内Ca2+浓度。观察MB对δ阿片激动剂DPDPE和吗啡预处理细胞48h及纳洛酮戒断,对胞内cGMP,cAMP含量、[Ca2+]i和NOS活性的影响。结果:MB可明显抑制阿片激动剂长时程所致cGMP含量增加(P<001),对cAMP含量、[Ca2+]i和NOS活性的变化无影响。结论:MB通过抑制sGC活性,使NOcGMP通路下调,减缓阿片耐受和依赖的发生。
- 臧梦维孟爱民沈琦孙越汪青刘景生
- 关键词:阿片类阻断作用甲基蓝
- 17β-雌二醇对人的类成骨细胞HOS TE85胞内游离钙、IP_3及钙调蛋白影响被引量:5
- 1999年
- 目的观察17β-雌二醇(E2)对成骨细胞胞内游离钙([Ca2+]i)、1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)含量及钙调蛋白(CaM)含量的影响。方法以Fluo-3/AM为钙荧光指示剂,采用激光共聚焦显微系统测定细胞内钙荧光值的改变,以反映[Ca2+]i含量的变化。用阳离子交换法测定IP3含量。以测定钙依赖的磷酸二酯酶活性方法测定CaM含量。结果给予0.1、1.0nmol/LE2后50s胞内钙荧光值分别增加4.7和6.1倍,持续80~160s;以100nmol/Lthapsigargin预处理细胞,E2仅使胞内钙荧光值升高1.5倍。加入1.0nmol/LE2,IP3含量在给药后20~30s和60~70s呈双峰升高。同样剂量的E2可使CaM含量增加85.2%。他莫西芬不能阻断E2引起的胞内钙荧光值、IP3及CaM含量升高的作用,而磷脂酶C抑制剂使E2的作用部分或完全抑制。结论E2作用于胞膜引起胞外钙内流,并通过IP3导致[Ca2+]i进一步增加,激活CaM从而调节细胞功能。
- 刘景生孙兰汪青翁玲玲郑虎
- 关键词:钙调蛋白三磷酸肌醇
- 阿片类药物对诱导型NO合酶稳定表达神经细胞受体介导AC-cAMP系统的影响被引量:2
- 1999年
- 目的:利用稳定表达诱导型NO合酶的NGLNCXiNOS细胞,观察阿片类药物对受体介导ACcAMP系统的影响。方法:竞争性蛋白结合法和完整细胞受体结合实验测定cAMP含量和受体结合力。结果:阿片类药物短时程作用抑制AC活性,受阿片受体介导的、百日咳毒素敏感的G蛋白信号通路调节。阿片类药物长时程作用和纳洛酮急性戒断引起受体脱敏,呈时间和剂量依赖性,伴有受体下调。结论:成功地建立阿片耐受和依赖细胞模型,可用于研究ACcAMP系统和NOcGMP系统在阿片耐受和成瘾中的调节。
- 臧梦维沈琦汪青郭菲刘景生
- 关键词:阿片类受体药物耐受一氧化氮合酶
- 17β-雌二醇对人成骨细胞株HOS TE85细胞增殖及胞内cAMP,cGMP,iNOS影响被引量:4
- 1998年
- 目的观察17β-雌二醇(E2)对HOSTE85细胞增殖及胞内cAMP,cGMP,iNOS影响。方法[3H]-TdR参入,放射免疫及L-3H-精氨酸转化法。结果E21.0mmol·L-1处理48h,细胞计数为(94.3×107±7.5×107)个·L-1,对照组为(65.0×107±5.9×107)个·L-1,[3H]-TdR参入量增加45.0%;细胞iNOS活性为(73.0±6.6)pmol·L-1·g-1·min-1(比对照组增加461.5%),cGMP为(0.69±0.03)pmol·L-1·10-8cel(比对照组增加305.9%);抑制hPTH诱导胞内cAMP升高。结论E2能刺激成骨细胞增殖。E2可能通过影响胞内cAMP,cGMP,iNOS含量和活性而发挥作用。
- 汪青孙兰张峰张志媛翁玲玲郑虎刘景生
- 关键词:雌二醇细胞增殖CAMPCGMP