汤华
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金重庆市教育委员会科学技术研究项目重庆医科大学科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 向下转膜法在乙肝病毒Southern杂交中的应用被引量：4
- 2005年
- 目的评价向下转膜法在乙肝病毒(HBV)Southern杂交中的应用效果。方法用带有1.3倍HBV基因的真核表达载体转染HepG2细胞,使其产生瞬时HBV表达,72小时收集细胞并提取细胞总DNA,琼脂糖凝胶电泳后,以向上和向下两种方式转移在尼龙膜上;用化学发光标记和检测试剂盒将乙肝病毒基因片段标记成探针,再与向上和向下转膜后的尼龙膜进行杂交,判断产生明显HBV杂交条带所需的细胞总DNA量,从而验证向下转膜法在乙肝病毒Southern杂交中的应用效果。结果发现向下转膜后,检测HBV表达所需的细胞总DNA量极少,灵敏度高,0.5μg细胞总DNA电泳后转膜,即可检测出HBVDNA的表达,凝胶中仅有8%的DNA残留;而向上转膜所需的总DNA量大,灵敏度低,25μg的细胞总DNA电泳后转膜,仅能检测出弱的条带。结论向下转膜法是一种较好的转膜方式,适于对乙肝病毒的Southern杂交,值得推广应用。
- 张秉强吴莹唐霓郭进军黄英汤华黄爱龙
- 关键词：SOUTHERN杂交乙肝病毒膜法琼脂糖凝胶电泳真核表达载体总DNA
- TIA-1通过影响肝细胞转录因子的活性调节HBV的e抗原和s抗原表达被引量：2
- 2008年
- 目的证明TIA-1分子具有调节HBV基因表达的功能。方法TIA-1真核表达质粒pcDNA3-TIA-1,用脂质体转染HepG2.2.15细胞后,ELISA检测e和s抗原的表达;RT-PCR检测与HBV复制有关的转录因子HNF1、HNF2、HNF3、HNF4、RXRα、PPARα、C/EBP的表达。结果与正常的HepG2.2.15细胞相比,转染pcDNA3-TIA-1质粒的HepG2.2.15细胞,其e抗原的表达量明显的增高,而s抗原表达量明显的降低。与正常的HepG2.2.15细胞相比,转染pcDNA3-TIA-1质粒的HepG2.2.15细胞中的HNF1、HNF2、RXRα mRNA含量有明显的下降。结论TIA-1蛋白能通过影响与HBV复制有关的转录因子活性,调节HBV e抗原和s抗原的表达。
- 陈婧李毅谭畅刘湘黄爱龙汤华
- 关键词：TIA-1S抗原E抗原HEPG2.2.15细胞
