段高飞
- 作品数:13 被引量:55H指数:4
- 供职机构:中国海洋大学医药学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金青岛市科技攻关项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学化学工程轻工技术与工程农业科学更多>>
- 海参DNA条形码的构建及应用被引量:14
- 2011年
- 为研究线粒体细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ(Mitochondrial cytochrome c oxidase subunitⅠ,COⅠ)基因作为DNA条形码鉴定海参品种的可行性,本实验采集了7种海参(Holothuroidea)43个个体并获得其线粒体COⅠ基因序列,利用DNAstar、DNAMAN和MEGA 4.1软件分析计算了7种海参的碱基组成以及不同海参之间的种间遗传距离和种内遗传距离,利用邻接法和最大简约法分别构建了分子系统树。结果表明,海参的种间遗传距离显著大于种内遗传距离,不同海参在系统树中分别形成各自独立的分支,表明以COⅠ作为海参DNA条形码进行品种鉴定具有一定的可行性。在建立海参DNA条形码的基础上,设计了针对仿刺参(Apostichopus japonicas)的特异性探针。对4种海参(仿刺参Apostichopus japonicas、冰岛参Cucumaria frondosa、加州拟刺参Parastichopus californicus及梅花参Thelenota ananas)进行斑点杂交实验,结果显示,该探针具有较好的特异性和较高的灵敏度,能够实现对仿刺参的鉴定。本研究为后续开展斑点杂交及基因芯片法鉴定海参种类的研究奠定了理论基础。
- 律迎春左涛唐庆娟段高飞王春霞李晋徐洁薛长湖
- 关键词:海参DNA条形码斑点杂交
- 海洋细菌QY202产κ-卡拉胶酶的分离纯化和性质研究被引量:5
- 2010年
- 为获得高效降解卡拉胶菌株,从青岛太平角海域采集的角叉菜表面分离到1株高产κ-卡拉胶酶的海洋交替假单胞菌(Pseudoalteromonas sp.)QY202,经硫酸铵沉淀、脱盐、DEAE阴离子交换层析等步骤从该菌株发酵液上清中分离纯化得到1种专一性降解κ-卡拉胶的κ-卡拉胶酶,并研究了该酶的基本酶学性质。结果表明该酶被纯化了23.1倍,回收率为43.9%,分子量大小为33.2 kDa。酶的最适反应温度为40℃,最适反应pH为8.0,在0-40℃,pH=7.0-8.0之间酶活力较稳定。酶对底物κ-卡拉胶的米氏常数Km值为1.6 mg/mL。Na^+、K^+对酶活有促进作用,而Hg^2+、Cu^2+强烈抑制酶的活性。酶解κ-卡拉胶的主产物为硫酸新κ-卡拉二糖和硫酸新κ-卡拉四糖。
- 段高飞苏贝韩峰于文功
- 关键词:交替假单胞菌分离纯化
- 海洋细菌Cellulophaga sp.QY201产λ-卡拉胶酶发酵条件的优化
- 目的:以从海洋中分离筛选得到的细菌Cellulophaga sp.QY201为研究对象,对其产λ-卡拉胶酶的培养基组成和发酵培养条件进行优化,提高其酶产量.方法:在研究碳源、氮源、无机盐的种类和含量的单因素实验基础上,选...
- 段高飞韩峰于文功
- 关键词:发酵优化
- 细菌Flavobacteriaceae sp. CZ1127产海参岩藻聚糖硫酸酯酶的发酵条件优化被引量:5
- 2011年
- 以从海洋中分离筛选得到的细菌Flavobacteriaceae sp.CZ1127为研究对象,通过单因素实验和正交试验对其产海参岩藻聚糖硫酸酯酶的培养基成分进行优化,提高其产酶量。得出其最佳培养基组成为(w/v):海参岩藻聚糖硫酸酯0.25%、酵母粉0.15%、MgSO4.7H2O 0.05%、CaCl2 0.02%、KCl 0.01%、Na2HPO4 0.22%、NaH2PO4 0.06%、NaCl 2.5%;确定了该菌株的最佳培养条件为:500 mL的三角瓶装液150 mL、温度为25℃、转速150 r/min、发酵时间为48 h。优化后,海参岩藻聚糖硫酸酯酶活力为22.88 U/mL,比优化前提高了3.01倍。
- 王春霞段高飞唐庆娟常耀光薛长湖
- 关键词:海参发酵条件
- 糖水解酶82家族ι-卡拉胶酶的底物识别机制
- 卡拉胶酶是一类专一性降解卡拉胶分子中β-1,4糖苷键的糖水解酶,根据其降解底物的不同主要分为κ-、ι-和λ-卡拉胶酶三种类型,广泛应用于寡糖制备、卡拉胶结构鉴定、海藻原生质体制备等方面。卡拉胶寡糖已被发现具有抗病毒、抗肿...
- 韩峰马素段高飞于文功
- 文献传递
- 海洋细菌Cellulophaga sp.QY201产λ-卡拉胶酶发酵条件的优化
- 段高飞韩峰于文功
- 关键词:发酵优化
- 细菌Flavobacteriaceae sp.CZ 1127产海参岩藻聚糖硫酸酯酶的发酵条件优化
- 以从海洋中分离筛选得到的细菌Flavobacteriaceae sp.CZ 1127为研究对象,通过单因素实验和正交试验对其产海参岩藻聚糖硫酸酯酶的培养基成分进行优化,提高其产酶量;该细菌的最佳培养基组成为(w/v):海...
- 王春霞段高飞唐庆娟常耀光薛长湖
- 关键词:海参发酵条件
- 一种快速鉴定四种海参品种的多重PCR方法
- 一种快速鉴定四种海参品种的多重PCR方法,属于分子生物学领域。本发明以四种海参的线粒体CO I基因为靶DNA,通过序列比对,分别设计出针对四种海参的种特异性引物。提取海参CO I基因,进行多重PCR检测,根据PCR产物分...
- 唐庆娟律迎春左涛段高飞李兆杰薛勇薛长湖
- 文献传递
- 一种快速鉴定四种海参品种的多重PCR方法
- 一种快速鉴定四种海参品种的多重PCR方法,属于分子生物学领域。本发明以四种海参的线粒体CO I基因为靶DNA,通过序列比对,分别设计出针对四种海参的种特异性引物。提取海参CO I基因,进行多重PCR检测,根据PCR产物分...
- 唐庆娟律迎春左涛段高飞李兆杰薛勇薛长湖
- 海参(Holothurians) DNA条形码的构建及初步应用
- 本文研究了线粒体COⅠ基因作为DNA条形码用于海参品种鉴定的可行性.研究中得到了7种海参43个个体的COⅠ基因序列,利用DNAstar、DNAMAN和MEGA4.1软件计算了7种海参的碱基组成,不同海参之间的种间遗传距离...
- 律迎春唐庆娟左涛段高飞王春霞薛长湖
- 关键词:海参DNA条形码斑点杂交