杨英杰
- 作品数：19 被引量：21H指数：3
- 供职机构：武汉大学人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- ARF6在血管紧张素Ⅱ诱导的足细胞胆固醇蓄积中的作用
- <正>【研究背景及目的】我们既往研究发现Ang Ⅱ可诱导足细胞胆固醇蓄积及足细胞损伤,但AngⅡ诱导足细胞胆固醇代谢失衡的机制仍不清楚。我们前期通过对既往报道的25个胆固醇转运相关基因筛查,发现ARF6在AngⅡ刺激的足...
- 杨倩胡继佳杨英杰马屹茕范燕琴陈朝威丁国华
- 文献传递
- 支架蛋白IQGAP1在足细胞细胞骨架改变中的作用及机制
- 目的 通过嘌呤霉素氨基核苷(PAN)刺激大鼠及体外培养足细胞,探讨IQGAP1 在足细胞细胞骨架改变中的作用及机制.方法 (1)建立PAN 大鼠模型,Western 印记检测肾小球IQGAP1 表达,免疫荧光(IF)观察...
- 刘以鹏梁伟杨英杰杨倩郑世翔丁国华
- 益生菌制剂治疗慢性肾脏病的meta分析
- 背景:肠道菌群通常保持结构稳定,与宿主共同维持肠道微生态的动态平衡,参与维持机体的健康。当这种动态平衡状态被破坏,肠道正常菌群结构,数量发生改变,导致肠道菌群失调并参与多种疾病的发生发展。近年来研究发现肠道菌群失调与许多...
- 周翠杨倩杨英杰胡继佳丁国华
- 文献传递
- ARA290抑制糖尿病大鼠肾小管上皮细胞凋亡
- 2019年
- 目的探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)衍生肽ARA290对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞凋亡的抑制作用及其可能机制。方法采用链脲菌素腹腔注射制备糖尿病大鼠模型。将成模大鼠随机分为4组:糖尿病模型组(DM组)皮下注射生理盐水0.5 mL,隔日1次;ARA290治疗组(DA组)皮下注射ARA290(50 U/kg),隔日1次;EPOR阻断肽+ARA290治疗组(DAEB组)皮下注射EPOR阻断肽(10μg/kg)和ARA290(50 U/kg),隔日1次;CD131阻断肽+ARA290治疗组(DACB组)皮下注射CD131阻断肽(10μg/kg)和ARA290(50 U/kg),隔日1次。同时设立正常对照组(NC组),皮下注射生理盐水0.5 mL,隔日1次。药物干预12周后检测大鼠尿白蛋白排泄率(urinary albumin excretion rate,UAER)、尿N-乙酰葡萄糖苷酶(N-acetylglucosidase,NAG)、β2微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)、α1微球蛋白(α1-microglobulin,α1-MG)、血肌酐(Scr)。肾组织切片HE染色,观察肾脏病理变化。采用免疫荧光检测肾脏EPO受体(EPO receptor,EPOR)、CD131的表达,TUNEL染色检测肾小管上皮细胞凋亡,免疫组化及Western印迹检测大鼠肾脏Caspase-3表达。结果免疫荧光检测显示大鼠肾脏表达EPOR、CD131,且两者存在共定位表达;TUNEL检测显示ARA290可以抑制糖尿病大鼠肾小管上皮细胞凋亡;免疫组化及Western印迹检测显示ARA290降低糖尿病大鼠肾脏Caspase-3表达;生化检测显示ARA290可以降低糖尿病大鼠UAER、尿NAG、β2-MG、α1-MG、Scr,HE染色显示ARA290可以减轻肾脏病理损伤。此外,给予糖尿病大鼠ARA290和EPOR或CD131阻断肽皮下注射后,ARA290抑制糖尿病大鼠肾小管上皮细胞凋亡、降低早期肾脏病变指标及减轻肾脏病理损伤的作用减弱。结论大鼠肾脏表达EPOR和CD131,EPO衍生肽ARA290可通过EPOR、CD131介导抑制糖尿病大鼠肾小管上皮细胞凋亡,发挥肾脏保护作用。
- 党建中涂亚芳王娟杨英杰
- 关键词：糖尿病肾病促红细胞生成素肾小管上皮细胞凋亡
- CD131在促红细胞生成素抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡中的作用
- 2021年
- 目的检测大鼠肾小管上皮细胞是否表达CD131并探讨其在促红细胞生成素(EPO)抑制大鼠肾小管上皮细胞凋亡中的作用。方法传代培养大鼠肾小管上皮细胞NRK52E,将NRK-52E细胞随机分为正常对照组、高糖组、高糖+EPO组、高糖+EPO+Scramble siRNA组、高糖+EPO+EPO受体(EPOR)siRNA组(EPOR siRNA干扰组)及高糖+EPO+CD131 siRNA组(CD131 siRNA干扰组)。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、Western blot、免疫荧光检测NRK-52E细胞内EPOR及CD131的表达,免疫共沉淀(co-IP)检测EPOR、CD131在NRK52E细胞内的结合情况。TUNEL法检测NRK52E细胞凋亡情况,RT-qPCR、Western blot检测NRK-52E细胞内Caspase-3的表达情况。结果RT-CD131在NRK-52E细胞内存在共定位表达,co-IP检测显示EPOR和CD131在NRK-52E细胞内存在相互结合。TUNEL检测显示,与正常对照组相比,高糖组NRK-52E细胞凋亡率显著增加。与高糖+EPO组相比,EPOR siRNA及CD131 siRNA干扰组NRK-52E细胞凋亡率显著增加。与正常对照组相比,高糖组NRK52E细胞Caspase-3表达显著增高。通过siRNA干扰抑制EPOR、CD131表达后,EPO对Caspase-3表达的抑制作用减弱。结论大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E表达EPOR和CD131,且两者在NRK-52E细胞内可形成EPOR-CD131异二聚体,介导EPO抑制NRK-52E细胞凋亡。
- 党建中涂亚芳王娟杨英杰
- 关键词：上皮细胞肾小管促红细胞生成素细胞凋亡
- IQGAP1在血管紧张素Ⅱ诱导足细胞凋亡中的作用及其机制探讨被引量：5
- 2014年
- 目的研究IQ结构域GTP酶活化蛋白1（IQdomainGTPase-activatingprotein1，IQGAPl）在血管紧张素Ⅱ（Angll）诱导足细胞凋亡中的作用以及可能的分子机制。方法体外培养条件永生性小鼠足细胞（MPC），以不同浓度（0、10-12、10-10、10-8、10-6mol／L）AngⅡ处理MPC或10-8mol／LAngII刺激不同时间（0、1、3、6、12、24h），采用流式细胞术检测细胞凋亡率，免疫荧光、Western印迹法检测IQGAPl的表达及分布。IQGAPlsiRNA转染以及丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路（包含p38、JNK和ERK1／23条主要通路）抑制剂SB202190（10μmol／L）、SP600125（25μmol／L）或U0126（10μmol／L）预处理MPC后，分别检测MAPK信号蛋白磷酸化水平及细胞凋亡率，并采用免疫共沉淀法研究IQGAPl与ERKl／2结合水平的变化。结果（1）AngⅡ可以诱导足细胞凋亡，且凋亡率随着刺激时间和刺激浓度的增加而进一步增加。（2）正常足细胞IQGAPl主要分布于细胞膜和胞质，随AngⅡ刺激浓度和刺激时间的增加，胞膜和胞质IQGAPl表达逐渐增高，且随剂量和时间增高。（3）SB202190、SP600125或U0126分别预处理足细胞，可显著降低Ang11诱导的足细胞凋亡（P〈0．05），但不影响IQGAPl蛋白表达。（4）IQGAPlsiRNA转染足细胞显著下调ERKl／2磷酸化水平（P〈0．05），降低IQGAPl与ERKl／2结合量（P〈0．05），并抑制AnglI诱导的细胞凋亡（P〈0．05），但对于p38以及JNK通路无显著影响。结论IQGAPl通过ERKl／2MAPK信号通路介导AngⅡ诱导的足细胞凋亡。
- 刘以鹏梁伟陈星华杨倩杨英杰杨红霞丁国华
- 关键词：足细胞RAS细胞外
- 糖尿病大鼠肾小管间质缺氧诱导因子2α表达变化及氯化钴对其影响
- 2018年
- 目的:观察缺氧诱导因子2α(HIF-2α)在2型糖尿病(T2DM)大鼠肾小管间质的表达及其降解抑制剂氯化钴(CoCl_2)的干预作用。方法:24只健康Wistar大鼠,留取8只作为对照(CON组),余16只采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射构建T2DM模型,成模后平分为T2DM组(DM组)和CoCl_2干预组(DM+CoCl_2组)。24周后取大鼠肾脏,常规方法制作石蜡切片。采用免疫组化法检测大鼠肾组织HIF-2α表达水平;PAS染色法检测大鼠肾组织结构病理变化及半定量分析肾小球硬化指数(GSI)和小管间质纤维化指数(IF);TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡率;免疫印迹法检测肾组织促红细胞生成素(EPO)表达水平。结果:DM组和DM+CoCl_2组大鼠肾组织HIF-2α表达高于CON组(P<0.01),DM+CoCl_2组HIF-2α表达水平较DM组更高(P<0.01);DM大鼠肾小球系膜基质及细胞轻度增生,肾小管间质区域增宽、细胞外基质聚集,其GSI和IF均显著高于CON组(P<0.01),与DM组比较,DM+CoCl_2组上述病理改变减轻,GSI和IF降低(P<0.01)。DM组肾小管上皮细胞凋亡率高于CON组(P<0.01),而DM+CoCl_2组细胞凋亡率较DM组降低(P<0.01)。DM组肾组织EPO表达水平低于CON组(P<0.05),而DM+CoCl_2组EPO水平高于DM组(P<0.05)。结论:上调肾组织HIF-2α表达可减轻T2DM大鼠肾间质损害。
- 程晖梁伟杨英杰李紫燃柳欣
- 关键词：糖尿病肾小管间质缺氧诱导因子氯化钴
- ARA290抑制糖尿病大鼠肾脏氧化应激反应
- 2019年
- 目的:探讨促红细胞生成素(EPO)衍生肽ARA290能否抑制糖尿病大鼠肾脏氧化应激损伤,发挥肾脏保护作用。方法:链脲菌素腹腔注射制备糖尿病大鼠模型。将成模大鼠随机分为糖尿病模型组(DM组)、糖尿病模型+ARA290 50 U/kg治疗组(DA1组)和糖尿病模型+ARA290 100 U/kg治疗组(DA2组),同时设立正常对照组(NC组)。药物干预12周后检测大鼠尿白蛋白/尿肌酐(ACR)、尿β2微球蛋白(β2-MG)。肾组织切片PAS染色,观察肾脏病理变化。免疫荧光、免疫共沉淀检测大鼠肾脏EPO受体(EPOR)、CD131的表达,实时荧光定量PCR和Western印迹检测大鼠肾脏NOX4表达,ELISA法检测大鼠肾脏活性氧(ROS)水平,免疫组化检测大鼠肾脏丙二醛(MDA)及8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)表达。结果:免疫荧光检测显示大鼠肾脏表达EPOR、CD131,且两者存在共定位表达;免疫共沉淀显示EPOR、CD131在肾脏内存在相互结合;ARA290可降低糖尿病大鼠尿ACR、β2-MG,减轻糖尿病大鼠肾脏病理改变;ARA290可抑制糖尿病大鼠肾脏NOX4表达,降低肾脏ROS水平,减少肾脏MDA及8-OHdG表达。结论:大鼠肾脏表达EPOR和CD131,且两者在肾脏内存在相互结合,ARA290可能通过EPOR-CD131蛋白复合物介导抑制糖尿病大鼠肾脏氧化应激损伤,发挥肾脏保护作用。
- 党建中涂亚芳王娟杨英杰
- 关键词：糖尿病肾脏病促红细胞生成素氧化应激
- ABCA1在血管紧张素Ⅱ诱导足细胞胆固醇蓄积中的作用被引量：2
- 2018年
- 目的研究血管紧张素Ⅱ（AngII）作用下大鼠肾小球及条件永生性人足细胞三磷酸腺苷结合盒转运子A1（ATP—bindingcassettetransporterA1，ABCAl）的表达变化，探讨ABCAl在Ang11诱导足细胞胆固醇蓄积中的作用。方法12只无特定病原（SPF）级雄性Wistar大鼠皮下埋置微量渗透泵，随机数字表法分为Angll组（AngII400ng·kg-1·min-1，n=6）和正常对照组（生理盐水替代Angll，n=6），造模8周后处死大鼠取肾。实时荧光定量PCR及Western印迹检测肾小球ABCAlmRNA及蛋白水平。体外培养条件永生性人足细胞，分为正常对照组、AngⅡ刺激组（浓度10-mol／L，刺激时间24h）、AngII＋无功能小干扰RNA（scrambledsiRNA）组和AngⅡ＋ABCAIsiRNA组，免疫荧光法观察足细胞ABCAl表达，实时荧光定量PCR及Western印迹法检测足细胞ABCAlmRNA和蛋白表达，油红O染色观察足细胞内脂滴沉积情况，胆固醇外流试剂盒检测胆固醇外流率，异硫氰酸荧光素（FITC）-鬼笔环肽（phalloidin）染色观察足细胞骨架改变。结果体内实验中，与正常对照组相比，Angll灌注8周组大鼠肾小球ABCAlmRNA及蛋白表达均降低（P〈0．05）；体外实验中免疫荧光结果显示ABCAl沿足细胞膜表达，与正常对照组相比，AngⅡ刺激后ABCAImRNA及蛋白表达下降（均P〈0．05），足细胞内脂滴沉积增加，胆固醇外流减少（P〈0．05），足细胞出现骨架重构；ABCAlsiRNA可在AngⅡ刺激基础上进一步降低ABCAl表达，与AngⅡ组比较，足细胞脂滴沉积程度更重，胆固醇外流更少（P〈0．05）。结论AngII可通过诱导ABCAl表达下调导致足细胞胆固醇蓄积。
- 杨简杨英杰杨倩丁国华
- 关键词：足细胞胆固醇
- 血管紧张素Ⅱ诱导足细胞胆固醇蓄积及损伤
- 杨英杰
- 关键词：足细胞胆固醇代谢足细胞损伤
