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刺梨两个缩合单宁合成基因的克隆与分析: 2012年; 为克隆获得刺梨中调控单宁合成的相关基因,以贵农5号刺梨为材料,根据GeneBank中登录的基因序列设计引物,采用RT-PCR的方法从刺梨果实中克隆获得了参与高等植物单宁合成的2个基因ANR和LAR的cDNA片段,分别长712bp和408bp,编码237个和135个氨基酸。序列分析表明,ANR和LAR的cDNA序列推导的氨基酸序列与GeneBank中登录的其他植物来源的基因相似性均达100%。; 杨曼安华明何任丹; 关键词：刺梨 ANR LAR

刺梨GDP-L–半乳糖磷酸酶基因的表达及其与AsA积累的关系被引量：4: 2014年; 采用RT-PCR和RACE技术,从刺梨(Rosa roxburghii Tratt)果实中扩增出GDP-L–半乳糖磷酸酶(GDP-L-galactose pyrophosphatase,GGP)基因的全长cDNA序列,并分析其在不同组织和果实不同发育阶段的表达特点及其与AsA积累的关系。结果表明:刺梨GGP基因cDNA(RrGGP,GenBank登录号:HM998753)包含1个长度为1 341 bp的开放阅读框(ORF),编码445个氨基酸;其氨基酸序列与苹果、猕猴桃等的相似性均在80%以上。RT-PCR分析表明,该基因在刺梨不同器官中的表达差异明显:在果实中的表达量最强,叶中次之,而花和茎中只能检测到极微弱的表达。在果实不同发育时期都能检测到RrGGP的表达,在发育初期(花后50 d内)表达较弱,花后60~100 d呈高水平表达,而后随着果实成熟而下调。刺梨中RrGGP的表达特点与AsA积累高度一致,意味着该基因可能是果实发育过程中AsA合成的关键基因。; 孙雅蕾杨曼安华明; 关键词：刺梨 ASA

刺梨有机酸组分及抗坏血酸含量分析被引量：72: 2011年; 【目的】明确刺梨有机酸各组分及抗坏血酸含量。【方法】以‘贵农5号’为材料,采用HPLC方法分析刺梨有机酸组分以及不同器官内、果实发育和采后贮藏过程中主要有机酸各组分及抗坏血酸含量的变化。【结果】刺梨果实中主要含有苹果酸、乳酸、酒石酸、柠檬酸、草酸和琥珀酸6种有机酸组分和较高含量的抗坏血酸;不同器官有机酸含量分析发现,根主要含乳酸和酒石酸,茎和叶中乳酸含量较高,而花中主要积累琥珀酸。果实发育过程中各有机酸组分均不同程度表现出先升高后降低趋势,而抗坏血酸含量则一直呈增加态势;成熟果实内,抗坏血酸含量显著高于任一种有机酸组分,约占总酸量的67%;6种有机酸组分中,苹果酸含量最高(约占有机酸总量的53%)。研究还发现,不同贮藏温度对刺梨果实有机酸含量有较大影响。【结论】从有机酸组分分析,刺梨是一种以苹果酸为主要有机酸的果实类型,但抗坏血酸的含量高于所有有机酸组分的总量。这种高抗坏血酸含量特点是刺梨果实独特的营养标志。; 安华明刘明杨曼樊卫国; 关键词：刺梨果实发育抗坏血酸

高等植物维生素C合成途径主要参与基因研究进展被引量：6: 2015年; 近年来高等植物维生素C合成的四条途径或支路已基本明确,涉及的大多数基因也基本清楚。本文就该四条合成途径中涉及的主要参与基因(酶)及其研究进展进行了综述。; 安华明刘卫杨曼张书轩; 关键词：维生素C 生物合成途径关键基因

刺梨果实主要抗氧化组分对机械伤及UV-B胁迫的响应被引量：3: 2012年; 以‘贵农5号’刺梨为材料,研究了果实发育过程中主要抗氧化组分对机械伤及UV-B胁迫的响应。结果表明:机械伤和UV-B处理均可诱导刺梨果实中H2O2等自由基的产生,并促使膜脂过氧化水平增加;但抗氧化系统对两种胁迫的响应模式不尽相同:机械伤胁迫下抗氧化酶POD、SOD以及非酶组分AsA、GSH均受快速产生的H2O2等自由基诱导,表现出快速应激响应;之后这两种抗氧化酶呈现出逐渐降低的趋势,而AsA和GSH则一直保持在较高水平。在UV-B处理中,需要较长时间额外增加UV-B辐射才会有效增加成熟果实中SOD、AsA及GSH等组分的活性或积累;而在减弱紫外处理时,SOD、POD和GSH的变化均表现出前期升高后期回落的趋势。机械伤和UV-B胁迫下,CAT和APX等酶只是间或或根本无法检测到活性。总体上看,POD+SOD以及AsA+GSH的共同作用是刺梨果实在这两种胁迫下抗氧化反应的主要机制。; 杨曼安华明黄伟张雪; 关键词：刺梨机械伤 UV-B 抗氧化系统

外源Ca^(2+)、Mg^(2+)、Cu^(2+)和吖啶黄素对刺梨果实维生素C合成的影响被引量：16: 2012年; 【目的】研究二价金属离子和传统抑制剂对刺梨果实维生素C合成的调控作用。【方法】以‘贵农5号’刺梨为材料,采用离体喂饲和活体注射相结合的方法,研究Ca2+、Mg2+、Cu2+等二价金属离子及吖啶黄素、石蒜碱等有机抑制剂对刺梨果实半乳糖内酯脱氢酶(GalLDH)活性和维生素C(AsA)合成的影响。【结果】Ca2+、Mg2+两种离子对初纯化的GalLDH酶活性有一定的促进作用,Cu2+则显著抑制其活性;当用金属离子与AsA合成底物半乳糖内酯(GalL)共同喂饲果肉时,Ca2+、Mg2+两种离子未有效促进AsA合成,Cu2+处理下的刺梨果肉中AsA含量甚至显著降低;在刺梨果实发育过程中,注射Ca2+对活体果实AsA合成有明显促进作用,Mg2+的作用不明显,而Cu2+依然表现出对AsA合成的抑制作用。吖啶黄素能抑制初纯化GalLDH酶液约70%的活性,而石蒜碱的抑制作用较小(约30%),但两者在离体喂饲处理中对AsA合成表现出相似的抑制效果;活体注射处理时,吖啶黄素在处理后期对AsA合成表现出较明显的抑制作用,石蒜碱则无此效应。【结论】外源增Ca2+可促进刺梨果实AsA合成和积累,而Cu2+和吖啶黄素则有抑制作用。; 张雪杨曼安华明黄伟刘卫; 关键词：石蒜碱半乳糖内酯脱氢酶维生素C

刺梨半乳糖内酯脱氢酶的酶促反应条件优化: 2010年; 为进一步探明刺梨半乳糖内酯脱氢酶（GalLDH）的作用机理及其对维生素C（AsA）合成效率的影响,以高AsA果实刺梨为材料,研究了AsA合成关键酶——GalLDH酶促反应的动力学参数。结果表明,刺梨GalLDH反应的最适温度在30℃左右,最适pH值为8.3-9.4,以半乳糖内酯作为反应底物的Km为0.031 mM,最大反应速率Vmax=0.026 U/s。当以古洛糖内酯作为反应底物时,GalLDH也能表现约70%的活性。; 刘卫黄伟安华明杨曼张雪; 关键词：刺梨半乳糖内酯脱氢酶动力学特征酶促反应

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杨曼