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杨忠印
作品数:
2
被引量:3
H指数:1
供职机构:
上海交通大学医学院附属瑞金医院
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发文基金:
国家高技术研究发展计划
上海市科学技术委员会基础研究重点项目
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
刘炳亚
上海交通大学医学院附属瑞金医院
刘家云
上海交通大学医学院附属瑞金医院
朱正纲
上海交通大学医学院附属瑞金医院
顾琴龙
上海交通大学医学院附属瑞金医院
李建芳
上海交通大学医学院附属瑞金医院
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2010
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冬凌草甲素诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡及机制
被引量:3
2010年
目的探讨冬凌草甲素体外诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡和细胞周期阻滞的作用及其机制。方法10~80μmol/L冬凌草甲素分别处理SGC-7901细胞后,CCK8法检测冬凌草甲素体外对SGC-7901细胞抑制生长的作用;用流式细胞仪分别观察冬凌草甲素诱导凋亡及细胞周期阻滞。Westernblot测定凋亡相关蛋白的表达。结果冬凌草甲素对SGC-7901细胞有明显的生长抑制作用,并随着药物浓度的增加(10~80μmol/L)而逐渐增强,呈浓度、时间依赖关系。此外,流式细胞术检测发现,冬凌草甲素浓度为0、10、40、60、80μmol/L,作用24h后,G2/M期细胞数分别是(9.90±1.17)%、(9.94±0.27)%、(11.76±0.16)%、(15.64±1.48)%和(22.59±1.01)%;而S期细胞比例分别为(31.79±1.03)%、(30.90±0.47)%、(29.25±0.80)%、(21.46±1.61)%、(18.81±0.61)%,冬凌草甲素能够使得SGC-7901细胞周期呈剂量依赖性阻滞于G2/M期;冬凌草甲素浓度为80μmol/L,作用12、24h后,凋亡率分别为(12.78±1.54)%、(20.62±2.39)%,明显高于对照组的(9.92±0.55)%,其能使SGC-7901细胞发生凋亡。随着冬凌草甲素作用时间延长,SGC-7901细胞的bcl-2蛋白表达逐渐减弱,前体Caspase-3被激活。结论冬凌草甲素能够诱导SGC-7901细胞产生凋亡,并使细胞周期阻滞在G2/M期。其凋亡机制可能与下调bcl-2蛋白表达及Caspase-3的激活相关。
刘家云
顾琴龙
杨忠印
李建芳
陈雪华
刘炳亚
朱正纲
关键词:
冬凌草甲素
胃癌
细胞周期
脱噬作用
CASPASES
PHF10融合蛋白表达、抗体制备及其在胃癌中的表达的检测
2010年
目的:制备PHF10多克隆抗体,并检测胃癌细胞系和胃黏膜永生化细胞株GES-1中PHF10表达谱。方法:在大肠杆菌BL21中表达GST标签标记的PHF10融合蛋白,以纯化的PHF10重组融合蛋白为抗原制备兔PHF10多抗血清。进一步利用亲和纯化方法制备PHF10多克隆抗体;为确定PHF10抗体的特异性,通过Western blot检测瞬时表达的Flag-PHF10融合蛋白,同时以抗Flag单克隆抗体(mAb)作为对照;利用制备的抗体通过Western blot检测PHF10在GES-1和各种胃癌细胞系中的表达。结果:与PHF10特异性结合的抗体能够通过免疫法获得;利用制备的抗体检测到PHF10在各胃癌细胞系与GES-1之间表达差异有统计学意义。结论:获得了特异性抗PHF10抗体,用该抗体可以检测到胃癌细胞系中PHF10的表达,可能是一个新的肿瘤靶标。
魏敏
刘家云
吕欣
聂辉
刘炳亚
朱正纲
杨忠印
顾琴龙
关键词:
抗体
胃癌
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