杨建明
- 作品数：3 被引量：22H指数：3
- 供职机构：中国人民解放军第一军医大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金教育部长江学者奖励计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 成年大鼠海马神经前体细胞表达功能性的L-型钙通道被引量：3
- 2005年
- 为了建立一种能够获得高纯度成年大鼠海马神经前体细胞(HPCs)的体外贴壁培养方法,并鉴定HPCs上是否存在功能性L-型钙通道,分离Wistar成年大鼠海马组织,制成单细胞悬液,利用无血清培养技术,在添加碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)、N2和B27supplement的DMEM/F12培养液中进行培养.连续传代,采用细胞免疫荧光法对第六代细胞进行鉴定,呈巢蛋白(nestin)阳性的细胞可达99.9%.把培养高纯度的细胞在分化培养基中诱导分化14天后,表现为神经元和星形胶质细胞的形态,且分别呈Ⅲ型β-微管蛋白(Tuj1)阳性和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性.细胞免疫荧光和免疫印迹结果显示,HPCs表达L-型钙通道的Cav1.2α1C和Cav1.3α1D亚单位,共聚焦钙成像证明了功能性L-型钙通道的存在,并且利用全细胞膜片钳技术记录到了L-型钙电流.以上结果表明成年Wistar大鼠的海马HPCs可表达功能性的L-型钙通道.
- 冯锦丽胡德辉陈明田映红施志敏杨建明朱心红李晓文高天明
- 关键词：成年大鼠海马神经前体细胞L-型钙通道
- 大鼠全脑缺血后海马CA1区锥体神经元L型钙通道电流的改变(英文)被引量：11
- 2003年
- 已有研究表明在脑缺血期间及再灌流后早期,海马CA1锥体神经元细胞内钙浓度明显升高,这一钙超载被认为是缺血性脑损伤的重要机制之一.电压依赖性钙通道是介导正常CA1神经元钙内流的主要途径.实验观察了脑缺血再灌流后早期海马CA1锥体神经元电压依赖性L型钙通道的变化.以改良的四血管闭塞法制作大鼠 15min前脑缺血模型,在急性分离的海马CA1神经元上,采用膜片钳细胞贴附式记录L型电压依赖性钙通道电流.脑缺血后CA1神经元L型钙通道的总体平均电流明显增大,这是由于通道的开放概率增加所致.进一步分析单通道动力学显示,脑缺血后通道的开放时间变长,通道的开放频率增大.
- 李晓明李建国胡平杨建明王颖李晓文高天明
- 关键词：海马锥体神经元L型钙通道
- 一种改进的适用于膜片钳记录的成年大鼠海马神经元急性分离法(英文)被引量：12
- 2004年
- 本文建立了一种快速、可靠的急性分离成年大鼠海马神经细胞的方法。此法可将实验大鼠的年龄提高到500 d以上,体重300 g以上;不损伤神经细胞膜的电学特性;形态上有差异的细胞易于分辨。用膜片钳技术的单通道和全细胞模式证实,在本实验条件下,约95％左右的健康细胞均能形成高阻抗封接,并成功地记录了电压依赖性钾、钠、钙通道,外向整流氯通道和大电导的钙激活钾通道电流。
- 李晓明李建国杨建明胡平李晓文王颖覃鲁宁高天明
- 关键词：神经元膜片钳海马
