李长青
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：大连工业大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：辽宁省教育厅基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 葡萄糖氧化酶基因片段的克隆与序列分析
- 2014年
- 根据Gen Bank发布的葡萄糖氧化酶基因序列设计PCR扩增引物,从筛选的1株可以产生葡萄糖氧化酶的菌株中克隆得到葡萄糖氧化酶基因片段,将该片段与p MD20-T载体连接后转化至大肠埃希菌DH5α中,测序并进行序列比对分析。结果表明,该克隆片段属于氧化还原酶超家族,且与同属氧化还原酶超家族中的Aspergillus niger strain BT18葡萄糖氧化酶相似度达到92%。从蛋白质预测的三级结构可以看出有FAD和NAG结合位点,说明该GOD片段理论上可以表达出GOD的主要功能。可以推断该克隆的基因片段为葡萄糖氧化酶基因片段。
- 李长青张印薛永常
- 关键词：葡萄糖氧化酶克隆
- 啤酒酵母RNA提取条件的优化及其磁性固定化被引量：1
- 2012年
- 通过浓盐法对啤酒酵母RNA进行提取,以磁性壳聚糖微球为载体,戊二醛交联法对RNA进行磁性固定化。通过比较反应体系中的无机磷和总磷的质量分数,对RNA的提取条件和固定化条件进行优化。结果表明,RNA提取温度对提取率的影响最为显著;在提取时间4h、提取温度100℃、氯化钠质量分数为10%和酵母质量分数为8%的最优条件下,RNA提取率达到6.13%。戊二醛交联法磁性固定化RNA的最佳条件为:反应时间4h,温度40℃;RNA最佳添加量为30mL(质量浓度2mg/mL)。
- 王红英孙井辉钱斯日古楞李长青
- 关键词：RNA磁性微球固定化啤酒酵母
- 5种快速提取黑曲霉基因组DNA方法的比较被引量：2
- 2014年
- 黑曲霉是发酵工业广泛应用的重要菌种,可产生葡萄糖氧化酶、纤维素酶、淀粉酶、果胶酶、葡萄糖酸、柠檬酸等重要物质,且产量较高。通过基因工程方法进行表达已成为提高产物产量主要的方法之一,而从黑曲霉中提取高纯度的DNA是基因克隆的前提条件。黑曲霉属于丝状真菌,因其细胞壁多糖与几丁质含量较高,细胞壁结构坚固,提取DNA的过程中破壁困难,对提取DNA的纯度与质量会造成一定的影响。目前,提取黑曲霉基因组DNA的方法较多,本实验旨在对实验室常用的5种快速提取黑曲霉基因组DNA的方法进行比较,为今后合理选择DNA提取方法及方法的改进提供实验依据。
- 李长青薛永常
- 关键词：黑曲霉基因组DNA
