李秀兰
- 作品数：6 被引量：36H指数：2
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 中国小型猪胚胎生殖细胞的培养和建系被引量：1
- 2003年
- 首次报道分别从 2 8天和 2 7天中国小型猪胚胎生殖嵴的原始生殖细胞培养和建立了两株胚胎生殖细胞系 (embryonicgermcells ,EGcells) ,各命名为BPEG1和BPEG2。根据它们的生长形态、细胞专一性标志以及体内、外分化等特征 ,证明了它们具有多能性的特性。
- 丛笑倩杜忠伟芮荣李秀兰包林平吴军鲍世民姚■
- 关键词：中国小型猪胚胎生殖细胞建系
- 外源TGF-β1基因在小鼠ES细胞中的表达及其对细胞分化的影响被引量：23
- 1995年
- 本文利用逆转录病毒载体Dol,在其BamHⅠ酶切位点插入猪TGF-β1的1.7kbcDNA,构建成表达质粒,并用磷酸钙沉淀法将该质粒DNA转染到小鼠ES-5细胞,经G_(418)筛选获得抗G_(418)的ES-5细胞克隆(ES-T),经RNA点杂交,Northern印迹杂交证明有6个细胞克隆能表达外源猪TGF-β1的mRNA,其中两个杂交信号较强的克隆进一步用Southern印迹杂交,也证明猪TGF-β1基因已整合到ES-5细胞基因组。经SELISA和生物活性测定,证明ES-T细胞存在着过度表达的TGF-β1基因产物。ES-T细胞生长特性与其亲代ES-5细胞相比,未发现明显差异。经低浓度RA处理悬滴培养的ES-T6细胞,将形成的拟胚体移至用白明胶铺底的培养板中,则最终有95%左右的拟胚体分化出血管样结构,而ES-5细胞在相同培养和处理条件下,只有17.8%形成无规则的管状结构,这结果提示ES-T6细胞基因组中外源TGF-β_1的额外表达,在调节该细胞株分化形成血管样结构中起着重要作用。同时,我们的实验体系也提供了一个适合于研究内皮细胞发生和血管形成的模型。
- 丛笑倩夏顺汉徐露霞李秀兰施渭康姚(?)
- 关键词：胚胎干细胞TGF-Β1基因细胞分化
- 小鼠胚胎干细胞诱导为肝细胞的研究被引量：11
- 2003年
- 背景:胚胎干细胞(ES细胞)是从体外受精胚囊的内细胞团分离建立的、具有发育全能性的细胞系,在特定条件下可向多种细胞分化,是细胞移植治疗很有前途的细胞来源。目的:探明ES细胞是否能被诱导分化为肝细胞,并探索小鼠ES细胞诱导分化为肝细胞的分化条件。方法:在ES细胞培养液中分别加入肝细胞生长因子(HGF)、β-神经细胞生长因子(NGF)和维甲酸(RA)以及与小鼠胎肝细胞共培养,观察分化细胞的形态学变化,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测白蛋白和转甲状腺蛋白mRNA水平的表达,免疫组化法检测甲胎蛋白和α1-抗胰蛋白酶蛋白水平的表达。结果:ES细胞培养液中加入HGF和β-NGF 15天后,分化出较多的上皮样细胞,并检测出白蛋白、转甲状腺蛋白mRNA水平的表达和甲胎蛋白、α1-抗胰蛋白酶蛋白水平的表达,表明ES细胞己诱导分化为肝细胞。ES细胞与胎肝细胞共培养2天后,分化出单一形态的上皮细胞,同样有上述肝细胞标志物的阳性表达。RA诱导出的细胞除转甲状腺蛋白mRNA外,无其他肝细胞标志物的阳性表达。结论:在HGF和β-NGF的作用下,有部分小鼠ES细胞被诱导为肝细胞,RA则无此作用。共培养方法也能诱导出肝细胞标志物阳性的细胞,并且细胞形态较单一。小鼠ES细胞有向肝细胞分化的潜能。
- 蒯小玲萧树东丛笑倩李秀兰
- 关键词：肝细胞胚胎干细胞胚囊细胞培养液HGFNGF
- 人抗药基因在小鼠ES细胞中的表达及嵌合体小鼠的研究被引量：2
- 1993年
- 本文用磷酸钙沉淀法将含人mdrl 基因表达质粒(pHaMDR 1/A)转染到小鼠胚胎干细胞(ES-5),得到了四个能稳定地在含有200 ng/ml 秋水仙素培液中生长传代的细胞克隆。经Southern 印迹杂交及RNA 印迹杂交证明人mdrl 基因已整合到ES 细胞基因组,并有表达。其中两个克隆杂交信号较强,抗药基因可随秋水仙素浓度提高而扩增,表达量也随之增加。用抗该基因编码的p170糖蛋白抗体对ES-mdr 1细胞作免疫荧光染色,证实p170蛋白分布于细胞表面。未发现ES-mdr 1细胞的体内、外发育潜能与亲代细胞的有何差异。但是mdr1细胞不能被RA 和HMBA 化学药物诱导分化,表明这些细胞已与亲代ES-5细胞不同,具有拮抗化学药物诱导分化的作用,其机理尚待研究。因此,ES-mdr1细胞可作为在细胞水平研究p170糖蛋白作用机理的体系,也可用以建立体外筛选拮抗抗约基因作用新手段的模型。我们也得到了含人mdr1基因的嵌合小鼠,并对它们的嵌合情况作了分析。
- 丛笑倩李秀兰徐洁沈鼎武姚錱
- 关键词：胚胎干细胞
- 人抗药基因在小鼠胚胎干细胞中的表达
- 癌细胞的内源和获得性抗药效应是临床抗癌用药常见的最大障碍之一,归因于细胞内抗药基因(MDR)扩增和过量表达。MDR基因编
- 丛笑倩李秀兰徐洁沈鼎武姚錱
- 文献传递
- 尿D-氨基酸氧化酶的ELISA检测和临床应用
- 2000年
- 目的为探索尿Ｄ－氨基酸测定的临床意义。方法 采用多克隆的ＩｇＧ片段和生物素－链霉亲和素－过氧化物酶系统测定尿Ｄ－氨基酸的含量。检测了２１例正常人和４４例各种肾脏疾病患者尿ＤＡＯ浓度，同时测定尿Ｎ－乙酸－β－Ｄ－氨基葡萄糖苷酶（ＮＡＧ）和α１－微球蛋白（ＡＭＧ）。结果尿ＤＡＯ在各种肾脏疾病患者中均有不同程度的增高，并显示尿ＤＡＯ与ＮＡＧ和ＡＭＧ有高度相关性（ｒ＝０．７２９，Ｐ＜０．０１，ｒ＝０．６４３，Ｐ＜０．０１）。结论提示尿 ＤＡＯ检测可作为临床判断肾功能不良的监测指标之一。
- 许迅辉包林平吴兆龙阮国芬李秀兰
- 关键词：D-氨基酸氧化酶肾脏疾病
