李研
- 作品数：16 被引量：54H指数：5
- 供职机构：中山大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 酶联免疫斑点法对抗结核治疗期肺结核患者多肽特异性IFN-γ的检测被引量：8
- 2013年
- 目的运用酶联免疫斑点法检测结核患者外周血IFN-γ,探讨结核患者结核多肽特异性IFN-γ分泌水平随抗结核治疗的变化。方法采用结核混合多肽E6+E7+C14、E6+E7作为刺激抗原,对331个处于治疗前或1、2、3、4、5和6个月治疗期的肺结核患者外周血标本进行多肽特异性IFN-γ酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测。结果治疗前的肺结核患者其ELISPOT阳性检测率均高于痰涂片和痰培养阳性率(E6+E7+C14-ELISPOT92.5%、E6+E7-ELISPOT89.7%、痰涂片41.0%、痰培养59.0%),且差别均有统计学意义(P<0.010和P<0.001)。在抗结核治疗各个时期,肺结核患者IFN-γ-ELISPOT检测阳性率和斑点数(spotformingcells/106cells,SFP)随着治疗的进行持续下降,由治疗前高水平(E6+E7+C14-ELISPOT阳性率92.5%、SFP计数中值M=381;E6+E7-ELISPOT阳性率89.7%、SFP计数中值M=168)降至第6个月治疗结束时低水平(E6+E7+C14-ELISPOT43.6%、M=40;E6+E7-ELISPOT38.1%、M=36)。痰涂阳性患者的SFP计数持续处在高位,且治疗6个月痰涂阳性患者的SFP计数显著高于痰涂阴性患者。结论两种混合多肽IFN-γ-ELISPOT可提高结核患者的诊断率,同时检测抗结核治疗患者的IFN-γ分泌水平以监测抗结核治疗的效果。
- 林淑娴杨芳芳彭毅李研方毅敏黎意芬赖小敏
- 关键词：免疫酶技术抗结核治疗
- 苍附导痰汤联合中医保健治疗多囊卵巢综合征伴有胰岛素抵抗30例被引量：3
- 2021年
- 目的:探讨苍附导痰汤联合中医保健治疗多囊卵巢综合征伴有胰岛素抵抗(PCOS-IR)患者的临床疗效。方法:选取PCOS-IR患者90例,按随机数字表非盲法将其分为治疗组、对照1组、对照2组,每组各30例。3组均予以中医保健基础治疗,治疗组在此基础上予苍附导痰汤口服,对照1组予盐酸二甲双胍口服,对照2组予盐酸黄连素片口服,均以1个月为1个疗程,治疗3个疗程。比较3组临床有效率、排卵率、妊娠率以及不良反应发生情况,分别参照痤疮综合分级系统(GAGS)、Ferriman-Gallwey(F-G)评分标准对患者治疗前后痤疮、多毛进行评分。结果:总有效率治疗组为80.00%(24/30),高于对照1组的66.67%(20/30)及对照2组的63.33%(19/31),差异均有统计学意义(P<0.05)。与治疗前相比,3组治疗后GAGS、F-G积分均低于治疗前(P<0.01),且治疗组GAGS、F-G积分低于对照1、2组(P<0.01)。治疗组周期排卵率为76.56%,明显高于对照1组的46.88%及对照2组的45.31%(均P<0.05)。妊娠率治疗组为50.00%,高于对照1组的30.00%及对照2组的20.00%(均P<0.05)。治疗期间,所有患者均无不良反应事件发生。结论:苍附导痰汤联合中医保健治疗PCOS-IR患者临床疗效较好,能有效改善临床症状,提高排卵率及妊娠率,且安全性较好,值得临床推广应用。
- 付艳萍刘琼辉李研余敏
- 关键词：苍附导痰汤中医保健
- bostrycin的抗结核菌活性及对细菌基因表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨bostrycin的抗结核菌活性及其对细菌基因表达的影响。方法:利用纸片扩散法初步鉴定海洋微生物代谢产物的抗结核菌活性。针对有潜在抗结核活性的化合物用绝对浓度间接法测定该化合物抗结核菌的最低抑菌浓度。应用结核cDNA芯片检测化合物处理组与对照组的基因表达谱的变化。结果:初步鉴定发现bostrycin在卡介苗平板上有明显抑菌圈,绝对浓度间接法测定显示醌类化合物bostrycin对卡介苗、结核分枝杆菌H37Rv、结核分枝杆菌临床分离株(包括敏感株和耐药株)均有抑制作用,尤其对耐多药结核分支杆菌有较好抗菌效果。结核cDNA芯片检测提示,在检测的3 875条结核分枝杆菌基因中,bostrycin处理组与对照组比较,有44条差异表达基因,其中18条上调,26条下调;这些差异表达的基因功能涉及核苷酸、脂类、能量、辅酶、碳水化合物的代谢,DNA复制、转录、翻译、氨基酸转运和代谢,细胞膜合成等。结论:本研究为抗结核新药的开发和新的抗结核菌作用靶点的研究提供了有价值的实验基础。
- 黄宇虹王娟陈洪许国蓉李嘉李研彭毅林永成佘志刚赖小敏
- 关键词：抗结核基因芯片
- 萎蔫酸铜离子络合物、镉离子络合物的抗结核活性及对结核分枝杆菌基因表达的影响
- 2012年
- 目的研究海洋微生物代谢产物萎蔫酸金属铜离子络合物与镉离子络合物体外抗结核活性,以及对Mtb H37Rv基因表达的影响。方法应用纸片扩散法(Kind-Bauer,K-B法)初步鉴定萎蔫酸铜离子络合物、萎蔫酸镉离子络合物的抗结核活性,重复实验3次;绝对浓度间接法测定萎蔫酸铜离子络合物、萎蔫酸镉离子络合物的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),重复实验确定更准确的MIC;Mtb cDNA芯片检测萎蔫酸铜离子络合物、萎蔫酸镉离子络合物处理Mtb组与溶剂对照处理Mtb组表达差异的基因,重复实验一次。结果萎蔫酸铜离子络合物、萎蔫酸镉离子络合物在卡介苗(BCG)平板抑菌圈直径分别为(30.4±0.6)mm、(30.0±0.8)mm。萎蔫酸铜离子络合物抗Mtb H37Rv的MIC为10μg/ml;对耐多药结核分枝杆菌,萎蔫酸镉离子络合物MIC为7.5μg/ml,低于S(MIC=25μg/ml)和RFP(MIC=25μg/ml);对Mtb临床分离株(0907961,耐S和EMB),萎蔫酸铜离子络合物的MIC(10μg/ml)低于S(S的MIC为20μg/ml),萎蔫酸镉离子络合物的MIC(5μg/ml)均低于S(MIC=20μg/ml)、EMB(MIC=6.4μg/ml)。Mtb cDNA芯片检测发现萎蔫酸铜离子络合物处理组与溶剂对照组比较,有差异表达的基因总数为23条,其中已知功能基因有10条;萎蔫酸镉离子络合物处理组与溶剂对照组比较,有差异表达的基因总数为28条,其中已知功能基因有11条。这些存在差异的基因功能涉及核苷酸、脂质、能量、辅酶、氨基酸代谢,DNA的复制、转录、翻译、翻译后修饰以及细胞膜的生物合成等。结论萎蔫酸铜离子络合物与萎蔫酸镉离子络合物具有较好的体外抗结核活性,尤其对部分耐药菌株的抑制作用甚至优于抗结核一线用药,可作为抗结核药物的前导化合物;运用基因芯片所探究出的差异表达的基因为进一步深入研究其抗菌作用机制提供了一定的实验依据。
- 王娟黄宇虹陈伊李研彭毅潘嘉慧王军林永成赖小敏
- 关键词：镰刀菌酸寡核苷酸序列分析基因表达
- 应用E7多肽/HLA-DR8四聚体监测治疗前后肺结核患者外周血多肽特异性CD4^+ T细胞的变化被引量：4
- 2011年
- 目的监测治疗前及治疗6个月内各时间点肺结核患者外周血E7多肽特异性CD4+T细胞及总CD4+T细胞的变化。方法应用已有的果蝇S2恒定细胞株,分别表达、纯化获得2种生物素化E7/HLA-DR8(E7/HLA-DRB1*08032和E7/HLA-DRB1*0818)复合物单体,进而制备成相应四聚体,分别用2种四聚体与抗人CD4-FITC共染色,流式细胞分析检测治疗前以及规律抗结核治疗15、30、45、60、90、120、150、180 d肺结核患者外周血四聚体阳性(E7多肽特异性)CD4+ T细胞及总CD4+ T细胞,同时以健康成人对照者、非结核呼吸道感染患者外周血及脐带血作为研究对照。结果多数病例的外周血总CD4+ T细胞在治疗前略低于正常水平,随着治疗开始很快升高并在短期内恢复至正常水平;但除治疗前组与脐带血差异有统计学意义(P<0.05)外,治疗前后各组之间,以及治疗前组与健康成人、非结核呼吸道感染者之间的差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前以及规律抗结核治疗15、30、456、0 d内肺结核患者组外周血可检出高水平的四聚体阳性CD4+ T细胞,与60 d后各组及3个对照组差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05),2种四聚体之间的检测结果无统计学意义(P>0.05);肺结核患者外周血四聚体阳性CD4+ T细胞在治疗前即有较高水平,治疗15~60 d后达到最高,一些患者中间有波动,以后开始逐渐降低甚至降至正常水平。结论多肽/HLA-DR四聚体可以用于监测治疗前后结核患者外周血多肽特异性CD4+ T细胞的变化,配合总CD4+ T细胞的检测,对于治疗期结核患者疾病发展和恢复的监测具有指导意义。
- 黎意芬黄利荣刘国标方毅敏李研彭毅赖小敏
- 关键词：CD4阳性T淋巴细胞HLA-DR抗原
- 基于络病理论论治多囊卵巢综合征被引量：1
- 2021年
- 多囊卵巢综合征是临床常见病、难治病,文章基于络病学理论,从络气郁滞、胞络瘀阻、胞络瘀塞、络息成积4个方面探讨络病与多囊卵巢综合征关系,并结合案例加以论证分析。
- 付艳萍余敏李研刘琼辉
- 关键词：络病理论多囊卵巢综合征临床验案
- 应用CD4＋Vα9-J27／Vβ29-D1-J2四聚体检测结核分枝杆菌感染的初步研究
- 2012年
- 目的初步探讨CD4＋Vα9-J27／V1329-D1-J2TCR四聚体对结核分枝杆菌感染检测的特异性。方法应用果蝇s2恒定细胞株表达、纯化获得生物素化TCR复合物单体制备四聚体。流式检测PE-四聚体与细胞株膜结核抗原肽／HLA-DR复合物以及肺结核患者外周血的单核细胞的结合百分率，并设立病例对照组。激光共聚焦倒置显微镜观察肺结核病理组织及对照组织中四聚体与结核抗原双染阳性的细胞及四聚体与CD14双染阳性细胞。结果四聚体对表达C14／HLA—DRB1＊1504的细胞株结合能力最强。四聚体与结核患者外周血单核细胞结合率显著高于各对照组。结核组织标本可观察到四聚体与CD14双染阳性及四聚体与结核抗原双染阳性的细胞；而对照组织均为阴性。结论CD4＋TCR四聚体对结核检测有一定的特异性，为TCR四聚体应用于结核的诊断和免疫机制研究提供了一定的实验资料。
- 谢丹张扣兴杜玄静方毅敏李研陈伊张建波高鸣赖小敏
- 关键词：结核病
- 生物安全三级实验室甲醛熏蒸消毒灭菌效果评价被引量：8
- 2012年
- 生物安全三级实验室是按照我国《病原微生物实验室生物安全管理条例》和《实验室生物安全通用要求》（GBl9489-2008）等有关病原微生物实验室生物安全法规和标准，以及WHO《实验室生物安全手册》（第三版）中的三级生物安全（biosafty level3，BSL-3）防护标准建立的病原微生物实验室，是专门针对通过气溶胶或其他途径传播，可导致严重后果或生命危险的内源性和外源性病原而特设的适用于临床、诊断、教学、科研的设施。高级别生物安全实验室中所研究的病原体大多数具有气溶胶感染的特性。
- 李研陈省平赖小敏王聪王娟袁广卿彭毅
- 关键词：消毒灭菌效果甲醛熏蒸实验室生物安全病原微生物生物安全实验室微生物实验室
- E7多肽的抗原表位特性与多肽反应阳性结核患者的HLA-DR等位基因分析被引量：4
- 2011年
- 目的:分析结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)E7多肽的T细胞抗原表位特性,克隆及分析E7多肽反应阳性的结核患者HLA-DR等位基因。方法:应用从结核患者末梢血分离的单个核细胞(PBMC),以IFN-γ-ELISPOT和细胞内细胞因子染色分析MTB E7多肽的T细胞抗原表位特性;从E7-ELISPOT阳性反应的PBMC或胸水细胞中扩增、克隆和分析HLA-DRα和β链等位基因。结果:311例患者IFN-γ-E7-ELISPOT检测显示233例阳性(阳性率75%),阳性结果的平均SFC为210个斑点/106细胞,E7和另一多肽(E6多肽)混合检测529例患者则显示492例阳性(阳性率93%),平均SFC为572个斑点/106细胞;E7多肽刺激后,19例患者的PBMC经细胞内细胞因子染色结果显示能产生IFN-γ的CD4+T细胞百分率为0.63±1.30,而5例健康对照者为0.05±0.056,两者有显著性差异(P<0.004);扩增、克隆出了共有的HLA-DRA*0101和15种HLA-DRB1等位基因。结论:E7是一种理想的广谱HLA-DR限制性CD4+T细胞反应性多肽,为深入研究结核患者的HLA-DRB等位基因的分布特点以及制备相应四聚体建立了基础。
- 方毅敏任亮亮李研冯永忠彭毅董涛詹能勇黄宇虹程俊马志明赖小敏
- 关键词：结核HLA-DR
- 应用四聚体技术检测肺结核患者外周血及病变组织C5特异性CD4^+T细胞被引量：2
- 2012年
- 目的:探讨C5特异性CD4+T细胞在肺结核患者外周血及在肺病变组织中的分布。方法:应用四聚体检测肺结核患者外周血及肺病变组织C5特异性四聚体阳性CD4+T细胞,同时以健康成人及非结核呼吸道感染患者外周血和肺炎病变组织作为对照。结果:应用C5/HLA-DRB1*090102四聚体检测肺结核组、非结核呼吸道感染组和健康成人组的C5特异性CD4+T细胞的中位数分别为0.15%、0.09%、0.03%,而C5/HLA-DRB1*130201则分别为0.19%、0.10%、0.04%,肺结核患者组外周血C5特异性CD4+T细胞的中位数高于对照组(P﹤0.05)。在肺结核患者的肺病变组织中可观察到C5特异性CD4+T细胞。结论:四聚体技术可用于结核特异性T细胞的检测,为结核特异性T细胞的进一步研究和应用奠定基础。
- 邓向斌黄利荣谢丹李研刘志辉赖小敏谭守勇
- 关键词：结核四聚体CD4+T淋巴细胞
