李凯 作品数:36 被引量:106 H指数:5 供职机构: 山西医科大学第二医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖北省科技攻关计划 湖北省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
畸胎瘤细胞源性生长因子shRNA增强胰腺癌细胞株Panc-1对健择敏感性的研究 被引量:1 2009年 目的通过转染针对畸胎瘤细胞源性生长因子(PCDGF)shRNA至胰腺癌细胞株Panc-1中,观察对健择敏感性的变化,分析PCDGF因子对化疗药物敏感性的影响。方法免疫组织化学和定量聚合酶链反应(PCR)测定PCDGF在胰腺癌组织中的表达,构建含2条shRNA的RNAi质粒,脂质体转染PCDGFshRNA至Panc-1,测定转染前后细胞对健择敏感性的变化。结果PCDGF表达于多数胰腺癌细胞的细胞质中(阳性率为84.5%),显示胰腺癌组织PCDGF的表达明显高于胰腺囊腺瘤和胰腺炎(t=11.41,P〈0.05),构建PCDGFshRNA质粒经脂质体转染后PC—DGF的表达显著受到抑制(抑制率为82.3%),在较高浓度时,健择的细胞毒作用明显增强。结论针对PCDGF的shRNA能显著增加Panc-1对健择的敏感性。 宋海平 王春友 杨明 李凯关键词:胰腺癌 药物敏感性 大鼠膝关节软骨不同染色方法的差异 被引量:16 2010年 背景:国内外学者对关节软骨对软骨进行了大量研究,需要用不同的染色方法对研究结果进行分析,但将多种染色方法同时应用于软骨研究及探讨染色机制的较少。目的:探讨不同染色方法对大鼠膝关节软骨染色的优缺点。方法:取正常大鼠膝关节软骨,行苏木精-伊红、番红O、阿尔辛蓝、甲苯胺蓝、番红-阿尔辛蓝、番红-固绿染色,观察软骨结构。结果与结论:苏木精-伊红、番红O、甲苯胺蓝染色均可观察到潮线,分别为蓝色、红色和蓝色,番红O和甲苯胺蓝染色强度朝潮线方向增强,番红O染色对潮线的观察优于其他染色方法。苏木精-伊红染色关节软骨4层结构清晰,软骨细胞呈柱状排列,基质呈均匀呈嗜碱性染色。番红O染色显示4层结构层次清楚,基质深层染色最红。阿尔辛蓝染色显示,pH1.0时软骨细胞周边部分被阿尔辛蓝强烈染色,pH2.5时阿尔辛蓝染色较深。甲苯胺蓝染色显示组织结构层欠清,胞核染色清晰,胞浆几乎不着色,基质呈淡蓝紫色。番红-阿尔辛蓝染色显示软骨表面及基质呈不均一的红色,深层颜色较深,软骨细胞周围蓝染;番红-固绿染色显示软骨基质呈均匀的红色,软骨下骨呈绿色,软骨组织与骨组织分对比鲜明。提示上述各种方法均可观察到软骨的四层结构,但以番红O染色显示软骨各层和潮线结构最佳;苏木精-伊红染色观察软骨细胞形态变化较其他方法清楚。 高改霞 卫小春 李凯 卫建平关键词:关节软骨 染色方法 膝关节 软骨组织工程 槐耳对胰腺癌切除术后化疗病人免疫功能的影响 被引量:2 2007年 目的探讨胰腺癌切除术后吉西他滨(GEM)化疗结合槐耳综合治疗对病人免疫功能的影响。方法选择我院胰腺外科中心2004年7月~2006年9月胰腺癌切除术后病人66例,其中,A组33例(GEM化疗),B组33例(GEM化疗+槐耳治疗);另取同期未行以上治疗的17例作为空白对照,为C组。分析比较各组的体液及细胞免疫功能指标。结果IgA、IgG、IgM值方面,A组治疗前后的变化差异无统计学意义(P>0.05),B组治疗结束后的IgG、IgM值显著高于治疗前(P<0.05);治疗结束后,B、C组IgA、IgG、IgM值高于A组(P<0.05)。淋巴细胞亚群值方面,A、B组治疗前后的组内变化差异均无统计学意义(P>0.05);治疗结束后,A组各淋巴细胞亚群值均低于C组(P<0.05),而NK细胞、CD3+T细胞亚群百分比及CD4+/CD8+比值低于B组(P<0.05)。结论槐耳辅助治疗可提高胰腺癌术后GEM化疗病人的体液及细胞免疫功能指标。 李凯 陶京 李弢 许州 杨智勇 熊炯炘 吴河水 王春友关键词:胰腺肿瘤 免疫性 胰腺癌淋巴管生成与血管内皮生长因子C的关系 被引量:20 2006年 目的探讨人胰腺癌组织中血管内皮生长因子C(VEGF-C)和其受体3(VEGFR-3)的表达与胰腺癌微淋巴管密度(LVD)、区域淋巴结转移的关系。方法免疫组织化学SP法检测67例人胰腺癌组织VEGF-C的表达情况,VEGFR-3结合I V型胶原(collagen type I V)进行LVD计数并结合临床和病理资料进行分析。结果VEGF-C的表达和胰腺癌分化程度、区域淋巴结转移、远处转移均呈显著相关(P<0.05),LVD与胰腺癌分化程度、区域淋巴结转移、VEGF-C的表达程度呈明显相关(P<0.01)。VEGFR-3不仅在肿瘤淋巴管内皮细胞上表达还在部分肿瘤血管内皮细胞上表达。结论VEGF-C通过其受体VEGFR-3促进胰腺癌淋巴管生成、区域淋巴结转移。 李凯 陶京 王春友关键词:胰腺癌 淋巴管生成 血管内皮生长因子C 淋巴结 肿瘤转移 吉西他滨联和槐耳治疗无法切除胰腺癌的临床疗效 被引量:3 2007年 目的探讨吉西他滨(GEM)化疗结合槐耳综合治疗进展期无法切除胰腺癌的临床疗效。方法对85例无法切除胰腺癌患者进行前瞻性随机对比研究,其中,42例GEM化疗患者归为A组,43例GEM化疗+槐耳治疗患者归为B组。并取同期未行以上治疗的23例患者作为空白对照,归为C组。分析比较各组临床疗效。结果处理后,A、B组血液系统反应发生率差异有统计学意义(P<0.05),而B组IgA、IgG、IgM值,NK细胞、CD3+T细胞亚群百分比及CD4+/CD8+比值均显著高于A组(P<0.05)。A、B组的临床受益率于第3个月时差异有统计学意义(P<0.05),但A、B组间的差异无统计学意义(P>0.05);第6个月时B组显著高于A组(P<0.05)。A、B组的客观有效率差异无统计学意义(P>0.05)。3组的1年累积生存率分别为23.35%、25.76%和10.14%,A、B组显著高于C组(P<0.05),但前2组间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论GEM化疗联合槐耳治疗,在改善无法切除胰腺癌客观缓解率及生存时间方面无统计学证据,但对化疗血液系统反应、免疫功能及生存质量等方面有显著疗效。 李凯 陶京 李弢 许州 杨智勇 熊炯炘 吴河水 王春友关键词:胰腺肿瘤 吉西他滨 槐耳 预后 不同骨病环境中骨再生的组织工程治疗策略 2023年 组织工程通过协调细胞、生物材料支架和信号分子进行体内外组织或器官再生,随着该领域技术的不断发展,其已成为较大骨缺损或骨再生能力受损患者可能的治疗方案。对支架进行功能化改造,可在克服各种不利因素影响的同时促进骨再生。该文对不同骨病环境中有治疗潜力的骨再生组织工程设计方案进行综述,希望为促进该领域研究由基础实验转向临床应用提供理论依据。 肖傲 李凯关键词:骨缺损 骨髓炎 骨肿瘤 骨坏死 姑息手术结合术中碘125粒子植入和术后化疗治疗晚期胰腺癌 被引量:7 2007年 目的总结姑息性手术结合术中^125I粒子永久性组织间植入和术后吉西他滨化疗等综合治疗措施对晚期无法切除胰腺癌的临床疗效。方法对我院胰腺外科中心2001年至2004年间83例接受治疗的晚期无法切除胰腺癌患者的临床资料进行回顾性分析。结果83例患者中行姑息手术29例(A组),姑息手术+吉西他滨化疗42例(B组),姑息手术+^125I粒子植入+吉西他滨组12例(C组)。A、B和C组客观有效率,第3月时分别为0.00%(0/27)、24.4%(10/41)和33.3%(4/12),第6月时分别为0.0%(0/16)、21.6%(8/37)和33.3%(4/12)。各组临床受益率,第3月时分别为14.8%(4/27)、41.5%(17/41)和50.0%(6/12),第6月时分别为6.3%(1/16)、21.6%(8/37)和50.0%(6/12)。A、B和C组的中位生存期分别为6.2、8.3和8.6月,1年累积生存率分别为6.9%(2/29)、21.4%(9/42)和25.0%(3/12),A、B、C组间逐渐增高,B、C组与A组的差异有统计学意义(P〈0.01),但B、C组间差异无统计学意义(P〉0.05)。结论对晚期无法切除胰腺癌患者,姑息性手术结合术后吉西他滨化疗可改善患者生活质量,提高1年生存率。而^125I粒子组织间放射结合术后化疗能改善患者生活质量。 李凯 陶京 熊炯炘 王春友关键词:胰腺肿瘤 近距离放射疗法 血管内皮生长因子-C反义寡核苷酸对胰腺癌淋巴管及血管生成的影响 被引量:5 2006年 目的观察血管内皮生长因子(VEGF)-C反义寡核苷酸对胰腺癌裸鼠原位种植瘤模型淋巴管及血管生成的影响。方法建立人胰腺癌细胞株panc-1裸鼠原位种植瘤模型,将动物随机分为磷酸盐缓冲液(PBS)对照组(A组)、错义对照组(B组)和反义VEGF-C干预组(C组),每组10只,寡核苷酸用量为每次10 mg/kg体重,隔日1次,每周3次,共3周。建模4周后,处死动物,留取血清和瘤体标本,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫组织化学染色法检测反义VEGF-C干预对VEGF-C分泌水平及种植瘤淋巴管和血管生成的影响。结果A、B和C组血清VEGF-C的蛋白表达水平分别为(237.5±41.5)、(221.5±52.3)、(108.6±14.9)ng/L,C组较A、B组明显为低(P<0.01);3组种植瘤内淋巴管密度分别为13.8±2.1、12.4±1.9和4.2±1.6,C组较A、B组显著减少(P<0.01);3组种植瘤内微血管密度分别为27.5±8.7、25.9±4.2和19.4±5.6,组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论反义寡核苷酸干预可以显著降低胰腺癌裸鼠原位种植瘤模型VEGF-C的表达水平,并对其淋巴管生成具有抑制作用。 陶京 李弢 李凯 杨智勇 刘涛 吴河水 熊炯炘 王春友关键词:血管内皮生长因子C 淋巴管生成 血管生成 动态拉伸对兔膝软骨细胞糖胺多糖合成的影响 2018年 目的观察不同强度的循环动态拉伸(CTS)对原代培养的兔膝关节软骨细胞糖胺多糖(GAG)合成的影响。方法1个月龄新西兰兔6只,无菌手术切取双膝关节软骨,采用0.4% Pronase酶和0.025% Ⅱ型胶原酶消化分离得到关节软骨细胞,来源于同一只兔的软骨细胞分为3部分,分别接种在3块BioFlex培养板上,通过Flexercell 5000系统对单层培养的兔膝软骨细胞施加CTS刺激,加载条件为0.3 Hz正弦波形,时长为6 h/d,加载强度分别为0%、5%、15%的CTS刺激。于加载后24、36、48和60 h用倒置显微镜观察细胞形态,并分别抽取上清用阿尔新蓝染色沉淀法测量GAG浓度。采用重复测量资料的单因素方差分析比较不同强度CTS刺激组上清液中GAG浓度的差异。结果细胞力学加载后可见周边部软骨细胞由多角形变为纺锤形,沿培养皿半径垂直方向排列。随拉伸强度的增加,上清中GAG浓度依次上升,各组总平均浓度分别为[(4.7±1.3)比(6.3±1.1)比(8.0±1.8) ng/ml],差异有统计学意义(F=15.970,P=0.000);同一时间点,随CTS拉伸强度的增大,上清液中GAG的含量逐渐增高,各时间点3组浓度分别为[24 h:(2.3±0.5)比(3.3±0.6)比(3.9±0.6) ng/ml;36 h:(4.0±0.7)比(4.6±0.8)比(6.8±0.2) ng/ml;48 h:(5.5±0.7)比(6.8±0.7)比(8.5±0.8) ng/ml;60 h:(6.9±1.2)比(10.8±1.3)比(13.0±1.1) ng/ml],且差异有统计学意义(F=6.062,P=0.036;F=16.720,P=0.004;F=12.570,P=0.007;F=19.790,P=0.002),同一采样时间采用组间LSD法两两比较差异均有统计学意义。随加载总时间增加,上清中GAG浓度逐渐增加,各组分别为[0% CTS组:(2.3±0.5)比(4.0±0.7)比(5.5±0.7)比(6.9±1.2) ng/ml;5% CTS组:(3.3±0.6)比(4.6±0.8)比(6.8±0.7)比(10.8±1.3) ng/ml;15% CTS组:(3.9±0.6)比(6.8±0.2)比(8.5±0.8)比 边森 刘贵艳 李凯 卫小春 徐刚 邵越峰关键词:软骨细胞 糖胺多糖 关节软骨 大鼠跑步装置的设计与应用 被引量:1 2010年 目的研制一种引导大鼠进行定量匀速跑步运动的实验装置。方法以跑步机提供匀速运动平面,支架将自制罩盒架于跑步机上限制大鼠跑步范围。罩盒前部暗室诱导大鼠进入,中部强光刺激大鼠进入前部暗室,尾部与电击器连接的电极对大鼠进行电刺激驱赶。观察大鼠跑步情况,对跑步期间大鼠体重变化进行统计分析。结果首次跑步,大鼠仅经过数次电击,即可在跑道内匀速跑步,间断电击可完成训练。3~4d之后,大鼠即可形成条件反射,只需很少的电击即可按设定速度跑步。试验中后期基本不需电击。不同坡度运动的跑步组大鼠,体重先减轻,后逐渐增加。结论此设计充分利用大鼠趋暗本能和学习能力,减少了电击刺激的影响,并且具有成本低、易于操控的特点,是研究跑步运动对大鼠运动系统影响的理想装置。 李凯 侯志超 陈晋斌 王少伟 卫小春关键词:软骨