曹文俊 作品数:64 被引量:224 H指数:7 供职机构: 复旦大学附属眼耳鼻喉科医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 公益性行业科研专项 上海市卫生局科技发展基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 电子电信 农业科学 更多>>
紫草多糖抑制LPS活化PBMC表达炎症相关因子的基因转录 被引量:4 2011年 目的:研究紫草多糖对LPS活化外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMC)表达TNF-α、IL-10、IL-18相关因子的影响及其可能的信号通路。方法:LymphopreTM(1.077 g/ml)淋巴细胞分离液离心分离正常健康人PBMC,紫草多糖处理正常健康人的PBMC或LPS活化的PBMC,利用Real-time RT-PCR法检测TNF-α、IL-10、IL-18、IL-18BP、IL-18Rα、IL-18Rβ基因转录水平,通过Western blot检测PBMC中ERK磷酸化水平。结果:紫草多糖可增强PBMC TNF-α、IL-10、IL-18Rα、IL-18Rβ的转录,与LPS处理的PBMC相近。紫草多糖处理LPS活化的PBMC,在处理早期(4小时)可抑制LPS活化的PBMCTNF-α及IL-18的表达,抑制率达15%50%(P〈0.05);并可抑制LPS诱导的ERK磷酸化,抑制率达27%61%(P〈0.05)。结论:紫草多糖可能是通过抑制PBMC的MAPK信号通路进而抑制LPS诱导的炎症相关因子TNF-α等高表达。 刘春红 王维 王静 朱红薇 刘晓颖 姜韵 王迅 陈道峰 曹文俊 瞿涤关键词:紫草多糖 IL-18 MAPK 脂类检测在年龄相关性黄斑变性眼病中的相关性分析 论文目的:探讨年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)与血脂的相关性论文方法:前瞻性病例对照研究设计。收集于复旦大学附属眼耳鼻喉科医院就诊的AMD患者,同时收集复旦大... 邵明希 李圣杰 曹文俊关键词:AMD 血脂 肺炎克雷伯菌的耐药性和防耐药突变浓度的初步研究 被引量:6 2013年 目的了解临床分离的肺炎克雷伯菌对常用抗菌药物的耐药性,并测定氟喹诺酮类药物(FQNs)对肺炎克雷伯菌的防耐药突变浓度(MPC)能力进行分析。方法采用微量稀释法测定肺炎克雷伯菌的最低抑菌浓度(MIC)、琼脂稀释法测定MPC,K-B法测定常用抗菌药物的耐药性。结果 30株临床分离的肺炎克雷伯菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性15株,为阳性组;阴性15株,为阴性组。2组对临床常用抗菌药物的耐药性存在较大差异,ESBLs阳性组的耐药率明显高于ESBLs阴性组。左氧氟沙星和莫西沙星对ESBLs阳性和ESBLs阴性的肺炎克雷伯菌的MPC、MIC和耐药选择指数(SI)具有不同的分布特征。结论 30株临床分离的肺炎克雷伯菌对常用抗菌药物的耐药性以ESBLs阳性株较为严重,且MPC明显高于ESBLs阴性株,ESBLs阴性株的细菌SI较高,临床应给予高度关注。 孙杰 徐炜新 时建英 吉建 刘春红 曹文俊关键词:肺炎克雷伯菌 耐药性 防耐药突变浓度 超广谱Β-内酰胺酶 卵巢恶性肿瘤组织中u-PA、t-PA mRNA的表达 被引量:4 2004年 目的 :检测尿激酶型纤溶酶原激活剂 (u PA)和组织型纤溶酶原激活剂 (t PA)两因子的mRNA在卵巢肿瘤组织中的表达水平 ,初步探讨肿瘤细胞纤溶活性的变化与相关基因间的联系。方法 :采用实时监测荧光定量RT PCR技术 ,检测并比较卵巢恶性肿瘤组织和良性囊肿组织 (卵巢巧克力囊肿 )中u PA及t PA基因的表达。结果 :u PAmRNA在恶性肿瘤组织中的表达较良性卵巢囊肿组织中的表达显著升高 (P <0 .0 5 )。良性囊肿组织所表达的t PAmRNA较恶性组织显著升高 (P <0 .0 5 )。在高、中、低 3种分化程度的恶性肿瘤中 ,u PAmRNA拷贝数随肿瘤分化程度的降低而增加 (P <0 .0 5 ) ,t PAmRNA拷贝数随其分化程度的降低而降低 (P <0 .0 5 )。结论 :恶性肿瘤组织的u PA基因在转录水平上调 ,可能与卵巢肿瘤的恶性进展相关。t PA基因在转录水平下调 ,t PA在mRNA水平的高表达可能是组织分化较好的特征。 侍庆 杨辰敏 曹文俊 樊绮诗 王学锋关键词:卵巢肿瘤 尿激酶型纤溶酶原激活物 组织型纤溶酶原激活物 关于PNH克隆演变的研究进展 被引量:3 2005年 随着阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)发病机制研究的深入,很多学者都发现PNH细胞克隆的演变与疾病进展密切相关,可能是PNH发病的关键环节。与正常造血干/祖细胞相比,PNH缺陷细胞克隆可能存在增殖优势,而且PNH克隆的演变与PNH患者的临床病程有很大的关系。PIG-A基因突变本身并不能赋予PNH缺陷细胞的增殖优势,而免疫和凋亡机制可能参与了PNH克隆的选择。这些认识对PNH克隆演变机制的研究、PNH发病机制的阐明以及为临床提供更有效的诊断和治疗手段具有重要意义。 孙健 曹文俊 樊绮诗关键词:阵发性睡眠性血红蛋白尿 内源性siRNA对RAB5A和RABEX5表达的抑制作用 2006年 目的研究内源性的siRNA对RAB5A和RABEX5表达的抑制作用。方法利用siRNA表达载体pS ilencerTM2.1U6-neo对RAB5A和RABEX5基因分别构建3个特异的siRNA表达载体,并将表达载体分别转染人卵巢癌高转移细胞HO-8910PM。应用逆转录-聚合酶链反应和蛋白印迹检测转染前后HO-8910PM细胞中RAB5A和RABEX5的表达情况,并用荧光免疫细胞化学技术对干扰效率最好的载体进行验证。结果在构建的6个siRNA表达载体中,pS ilencer/siRAB5A-1和pS ilencer/siRAB5A-2对RAB5A表达的抑制率分别为90%和70%,pS ilencer/siRAB5A-3对RAB5A表达没有抑制作用。pS ilencer/siRABEX5-1、pS ilencer/siRABEX5-2和pS ilencer/siRABEX5-3对RABEX5表达的抑制率分别为30%、50%和90%。结论成功构建了对RAB5A和RABEX5表达具有抑制作用的siRNA表达载体,为进一步研究RAB5A和RABEX5的生物学功能提供了实验工具。 张小爱 侍庆 吴华成 曹文俊 孙顺昌 倪培华 樊绮诗关键词:小干扰RNA RAB5A 云南香格里拉县健康成人静脉血红细胞分析参考范围调查 王朱健 蜂盛香 冯忠盈 曹文俊73例中国人血友病甲基因突变的分析 被引量:7 1998年 我们用Southernblotting、PCR、变性梯度凝胶电泳(DGGE)和DNA测序等方法对73例血友病甲患者(经上海瑞金医院测定血浆FVⅢ:C和vWF:Ag诊断,其中无亲缘关系患者65例,按FVⅢ:C水平分为轻、中、重三型。FVⅢ:C<2%为重型,共47例;FVⅢ:C2%~5%为中型,共9例;FVⅢ:C5%~25%为轻型,共17例)进行FVⅢ基因突变检测。共检出内含子22倒位23例,均为重型,约占重型的49%,与国外报道相似。余下50例(其中无亲缘关系者45)用PCR-DGGE分析所有外显子及其侧翼内含子序列,发现异常条带则进行DNA测序。在17例患者中检出突变13种,其中无义突变5种,均为重型;错义突变6种,除1例外都是轻中型;小缺失2例,都是重型;其中,AA466Lys(AAG)-Thr(ACG),719Tyr(TAC)-Stop(TAG),AA826Asp(GAC)-Glu(GAA),312Ile(ATC)-xxC及AA1551-1552del(AGAA)为新发现的突变。有亲缘关系的患者都有相同的基因突变,而在无亲缘关系患者未发现相同突变。基因突变与临床表现基本相符。 刘建湘 张宇舟 王鸿利 黄秋花 曹文俊 王学锋 邵慧珍 王振义 陈竺 黄薇关键词:血友病甲 基因突变 DNA 精氨酸酶I在HCV转染肝癌细胞增殖中的作用 被引量:4 2007年 目的:研究丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)基因组转染的肝癌细胞中精氨酸酶Ⅰ的表达及其意义,探究其在HCV-肝细胞肝癌(HCC)发病中的作用。方法:以转染HCV基因组的人肝癌细胞系(Huh7)为研究对象,采用蛋白印迹技术研究HCV基因组转染对细胞内精氨酸酶Ⅰ表达的影响;运用小干扰RNA(siRNA)技术抑制细胞精氨酸酶Ⅰ表达,并探讨其对细胞生长的影响及作用机制。结果:精氨酸酶Ⅰ在HCV阳性肝癌细胞系(Huh7-HCV)中的表达上调,且与对照细胞相比,Huh7-HCV细胞的精氨酸酶Ⅰ含量升高4.3倍。运用siRNA抑制细胞精氨酸酶Ⅰ表达,可明显抑制细胞生长并导致其死亡,且可使细胞周期发生明显改变。结论:精氨酸酶Ⅰ在HCV阳性肝细胞Huh7中表达上调,可能对促进Huh7-HCV细胞生长具重要意义。 曹文俊 Bill Sun 连兆瑞 Marcy Clayton Mark Feitelson 樊绮诗关键词:丙型肝炎病毒 肝细胞肝癌 小干扰RNA 一例凝血因子 ⅧB 区错义突变导致重型血友病 A 被引量:1 1998年 目的:检测一例重型血友病A患者(SH9)的基因突变。方法:用PCR、变性梯度凝胶电泳(DGGE)和DNA测序检测因子Ⅷ基因突变。先用Southernbloting排除内含子22倒位,然后应用PCR对凝血因子Ⅷ基因进行扩增。扩增范围包括所有外显子及其侧翼内含子序列。结果:片段142在DGGE中泳动异常。DNA测序证实C2535A导致B区错义突变826Asp(GAC)→Glu(GAA)。结论:该突变可能是导致重型血友病A的原因,但有待进一步研究证实。 刘建湘 张宇舟 王鸿利 黄秋花 曹文俊 王学锋 邵慧珍 王振义 陈竺 黄薇关键词:DNA测序 错义突变 血友病A