时坤
- 作品数：117 被引量：444H指数：9
- 供职机构：吉林农业大学中药材学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 植物精油的抑菌作用研究进展被引量：8
- 2019年
- 近年来,随着细菌/真菌感染率大幅度上升,食源性疾病的全球发病率不断增多,而伴随致病菌耐药性的出现,现有抗菌药物的抑菌效果越来越有限,并对机体产生较大的毒副作用。精油系植物提取物的主要有效组分具有抗炎、抗病毒、抗氧化、抗肿瘤和抗菌等多重药理作用,其显著的抗细菌和抗真菌活性对于解决食品中日渐增多的耐药性细菌/真菌感染问题有着重要意义。论文对植物精油抑菌作用进行阐述,并详细地分析精油主要成分含量的影响因素,为更好的利用精油提供参考,同时为保障食品安全及相关研究提供科学依据。
- 王慧周红潮张旭任晓航时坤李建明杜锐宗颖
- 关键词：植物精油抑菌作用食源性疾病
- 党参多糖对动物免疫调节作用研究进展被引量：35
- 2019年
- 党参是我国传统中药材,主要成分有多糖、内酯、三萜、生物碱、甾醇和党参苷等。相关药理学研究表明,党参具有免疫调节、健脾、抗癌、补中益气和益肺等功效。党参所含的多糖与其他药用植物多糖相同,均具有降血糖,免疫调节等作用。论文就党参多糖对免疫器官、免疫细胞、免疫分子及分子修饰等方面的免疫调节功能进行综述,为党参多糖在动物免疫调节方面的应用提供参考。
- 郜艳雪时坤李健明孙志博栾美慧徐宁宫庆龙刘艺冷雪杜锐
- 关键词：党参多糖免疫器官免疫细胞免疫分子分子修饰
- 结核分枝杆菌毒力相关因子的研究进展被引量：4
- 2018年
- 结核病是威胁全球人类健康的重要人畜共患病。它的病原是结核分枝杆菌。由于结核病在治疗过程中发生了严重的耐药,对现有的抗结核药物提出了严峻的挑战。而结核分枝杆菌具有致病性是需要依赖多种基因的调控与表达,结核分枝杆菌的毒力相关因子在结核分枝杆菌的致病性上具有重要作用。结核分枝杆菌中主要与毒力相关的因子有早期分泌的一些蛋白、肽聚糖、分枝菌酸、细胞代谢相关因子和转录调节因子等。现在已经有越来越多的研究者对结核分枝杆菌的毒力因子感兴趣并对其进行了研究,期望从这些毒力因子中寻找新的药物靶标。
- 王双双曾范利李东宗颖时坤李健明赵丹杜锐
- 关键词：结核分枝杆菌
- 鹿源牛病毒性腹泻灭活疫苗及其制备方法
- 鹿源牛病毒性腹泻灭活疫苗及其制备方法，涉及疫苗技术领域，填补了梅花鹿病毒性腹泻/黏膜病专用疫苗的空白。本发明的鹿源牛病毒性腹泻病毒JL05株，该菌株已于2018年1月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心...
- 冷雪杜锐时坤李健明宫庆龙孙志博郜艳雪徐宁栾美惠
- 鹿结核病野毒株与卡介苗差异基因文库的构建
- 应用四碱基限制性内切酶对鹿结核病流行株和卡介苗基因组分别酶切,以鹿结核流行株酶切产物为tester DNA,卡介苗酶切产物为driver DNA,tester DNA接头连接后与driver DNA进行抑制性消减杂交.将...
- 刘东旭时坤李健明杜锐
- 关键词：卡介苗抑制性差减杂交基因文库
- 鹿结核病间接酶联免疫吸附检测法
- 鹿结核病间接酶联免疫吸附检测法属于兽医领域。克服以往鹿结核病检测特异性差，敏感性低等不足。所选用的生物材料有：牛型提纯蛋白衍生物(PPD)、兔抗鹿IgG，兔抗鹿IgG-HRP、标准阳性血清、标准阴性血清、待检血清。检测方...
- 杜锐于淼时坤李建明刁燕刘晓张梦刘东旭
- 文献传递
- BVDV 1型和2型TaqMan双重实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：4
- 2022年
- 【目的】建立一种快速检测牛病毒性腹泻病毒1型(BVDV1)和2型(BVDV2)的TaqMan双重实时荧光定量PCR方法。【方法】根据GenBank上收录的95株BVDV1和BVDV25′-非编码区设计特异性引物,构建含有BVDV1和BVDV2目的片段的阳性质粒,优化反应条件,构建标准曲线,进行双重实时荧光定量PCR方法的特异性、敏感性和重复性检测,并利用建立的实时荧光定量PCR检测方法对采自吉林省的临床样品进行检测。【结果】建立的双重实时荧光定量PCR方法最适退火温度为57.0℃,最适引物浓度为0.5μmol/L,最适探针浓度为0.3μmol/L,BVDV1和BVDV2型的标准曲线分别为:Y=-3.54X+37.36(R^(2)=0.990)和Y=-3.18X+35.95(R^(2)=0.997)。对牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)和牛副流感病毒3型(BPIV3)均无特异性扩增,批内和批间变异系数均<3%,检测下限为10拷贝/μL。临床样品检测结果显示,总体阳性率为23.1%(36/156),其中BVDV1阳性率为17.9%(28/156),BVDV2阳性率为5.1%(8/156)。【结论】本研究建立了可同时快速、准确鉴别BVDV1和BVDV2的TaqMan双重实时荧光定量PCR方法,为BVDV的防控与净化提供技术支撑。
- 麻宝艺盛陈艳刘宏莹马青霞汪婷婷李健明时坤杜锐冷雪
- 关键词：探针
- 肉牛无公害标准化“五良”配套技术的运用被引量：3
- 2020年
- "五良"配套技术基本上可以称为肉牛产业的必备技术,该技术可以促进肉牛的生产性能得到充分发挥。本文就结合笔者的亲身实践,探究了肉牛饲养"五良"技术的要点,希望可以推动各地肉牛养殖业的快速发展。
- 李男时坤姜涛韩志龙孙强寿宇涛
- 关键词：饲养肉牛
- 鹿茸及鹿血中布鲁氏菌实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：1
- 2021年
- 为建立可应用于快速检测鹿茸及鹿血中布鲁氏菌的方法,保证鹿产品的药用、食用安全,试验根据布鲁氏菌特异性基因IS711设计合成引物和探针,建立实时荧光定量PCR方法,对反应条件进行优化,并绘制标准动力学曲线,Y=-3.14X+37.62,R^(2)=0.997。结果表明:该方法具有良好的重复性、敏感性和特异性,组内、组间重复性试验Ct值标准差小于0.5,变异系数均小于2%,最小检测拷贝数为2.65×10^(1)Copies/μL。该方法对目的基因检测灵敏度高,可用于鹿茸及鹿血相关样本的检测,也可用于布鲁氏菌的定性和定量检测,为相关鹿产品的质量安全评估提供重要技术保障。
- 郭子奕任晓航杜锐李健明李健明刁乃超时坤
- 关键词：鹿茸鹿血布鲁氏菌实时荧光定量PCR
- 结核分支杆菌Rv3117基因的克隆与原核表达
- 2015年
- 以结核分支杆菌H37Rv株染色体DNA为模板,应用Rv3117基因特异性引物对该基因进行PCR扩增,获得约800bp的DNA片段。将PCR纯化产物克隆至pMD-18T Vector中,构建出重组质粒pMD-18T-Rv3117。以EcoRⅠ和SamⅠ双酶切pMD-18T-Rv3117重组载体和pGEX-4T-1原核表达载体,并将纯化的Rv3117基因亚克隆至pGEX-4T-1中,构建出原核重组表达质粒pGEX-4T-1-Rv3117。将pGEX-4T-1-Rv3117重组质粒转化至感受态E.coli BL21中,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见约30ku目的蛋白带。Western blot分析结果显示,该蛋白能与抗结核分支杆菌阳性血清发生特异性反应。研究结果为结核病临床诊断抗原的筛选奠定了基础。
- 刘杨宋纪伟曾范利时坤李健明杜锐
- 关键词：结核分支杆菌克隆原核表达
