方杰 作品数:24 被引量:100 H指数:5 供职机构: 江苏大学附属医院 更多>> 发文基金: 镇江市科技支撑计划(社会发展)项目 国家自然科学基金 江苏省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
可视人流仪术中监测对瘢痕子宫取环妇女应激状态的影响 被引量:5 2017年 目的:研究可视人流仪术中监测对瘢痕子宫妇女取环术中的应激激素的影响及临床疗效。方法:按随机数字表法将拟行取环术再生育的瘢痕子宫妇女分为A、B两组,A组实验组采用可视人流仪监护下取环,B组对照组采用常规方法取环,比较两组取环手术的手术时间、术中出血量、术中疼痛程度、手术顺利情况、应激激素变化、术后第一次月经来潮时间及月经变化、术后妊娠等情况。结果:A组与B组相比,术中疼痛程度轻、一次性手术取环成功率高(98.95%vs 90%)、子宫穿孔发生例数少(0 vs 5例),术后阴道流血时间短(6.5±12.03 vs 10.34±10.34天),术后第一次月经来潮快(25.12±0.56 vs 30.45±1.87天),宫颈管粘连的发生病例数少(2 vs 8例)。B组术前和术中、术后的应激激素血液表达水平均高于A组,且两组术中血液表达水平均高于术前及术后,差异均具有统计学意义(P<0.05)。术后三月妊娠率高(11.45%vs 3.0%)差异有统计学意义(P<0.05).而术后一年妊娠率(36.45%vs 33%),差异无统计学意义(P>0.05)。结论:可视人流仪对瘢痕子宫取环术中监护对患者应激状态影响小,要好于常规方法,安全性更高。 王昊珏 方杰 陆显义 王蕾 张秋莹关键词:瘢痕子宫 节育环 应激激素 Ubi-p63E基因在果蝇睾丸生殖干细胞微环境中的功能研究 被引量:1 2019年 目的 Ubi-p63E基因是否调控精子发生和肿瘤形成过程还尚不清楚。文章讨论Ubi-p63E基因在果蝇睾丸生殖干细胞(GSCs)微环境中对GSCs的影响。方法利用UAS-Gal4系统实现果蝇睾丸细胞特异性敲减。实验分为对照组(W1118品系果蝇),nos>Ubi-p63E RNAi组(早期生殖细胞中敲减Ubi-p63E基因)和tj>Ubi-p63E RNAi组(包囊细胞中敲减Ubi-p63E基因),利用生育率测试观察雄性果蝇的生育能力。采用免疫荧光染色观察对照组和实验组雄性果蝇睾丸在GSCs微环境中的作用。结果生育率测试结果表明,与对照组生育率(97.26%)相比,nos>Ubi-p63E RNAi组(0)和tj>Ubi-p63E RNAi组生育能力(4.12%)明显降低(P<0.01)。光镜下观察,与对照组相比,nos>Ubi-p63E RNAi组和tj>Ubi-p63E RNAi组睾丸形态明显异常,长度分别为对照组的22.77%、18.86%,均出现小睾丸的表型。免疫荧光结果显示,与对照组睾丸比较,tj>Ubi-p63E RNAi组正常睾丸形态消失,且出现较多异常的细胞团块,这些细胞团大多为Vasa阳性细胞。结论 Ubi-p63E基因在果蝇睾丸GSCs微环境中影响GSCs的维持,并可以通过包囊细胞影响GSCs的分化过程,最终导致生殖细胞肿瘤的形成。 周美云 郑倩雯 栾晓瑾 颜一丹 陈万银 王敏 谢冰 乔晨 方杰 于骏 陈霞CG6015基因在果蝇睾丸生殖干细胞生命维持中的功能研究 2021年 目的CG6015基因作为RNA剪接体的调控因子,是否参与调控果蝇睾丸生殖干细胞(GSCs)尚不明确。文中旨在探讨CG6015基因在果蝇睾丸GSCs生命维持中的功能,并探索其中潜在的调控机制。方法利用UAS-Gal4系统实现CG6015基因在果蝇睾丸GSCs中的特异性敲减。以W1118品系为对照组,Nos>CG6015 RNAi为实验组,采用免疫荧光染色技术分别观察2组睾丸的形态和GSCs的改变情况。在果蝇S2细胞中,应用基因沉默技术分别敲减阴性对照(NC)与CG6015基因,作为NC组与CG6015 siRNA组,利用qRT-PCR检测CG6015基因及RNA剪接体亚基Prp8、SmG和U2A的mRNA表达水平。结果与对照组小睾丸的比例(0)比较,实验组(100%)明显升高(P<0.001)。与对照组睾丸中的生殖融合体数量比较,实验组明显减少[(19.67±0.88)个vs(0.00±0.00)个,P<0.001]。与对照组比较,实验组Eya阳性细胞数量明显增加[(9.67±0.67)个vs(25.67±5.21)个,P<0.05]。与NC组Prp8、SmG基因的mRNA相对表达水平(1.00±0.00)比较,CG6015 siRNA组Prp8基因(0.39±0.03)明显下调,SmG基因(1.60±0.07)明显上调(P<0.05)。结论CG6015基因在果蝇睾丸中可以通过介导RNA剪接体来调控GSCs的生命维持,为男性不育症的致病机理提供了新思路。 郑倩雯 陈霞 王敏 陈万银 栾晓瑾 颜一丹 方杰 胡兴 于骏关键词:生殖干细胞 基因沉默 机体应激水平与稽留流产的相关性研究 被引量:6 2014年 目的:观察妊娠妇女生活环境及生活事件对妊娠的影响,了解相关应激原与稽留流产的相关性。方法:采用问卷测量方法对稽留流产组和正常妊娠组应激水平进行评分,采用ELISA法检测血清肾上腺素和血管紧张素Ⅱ水平。结果:1稽留流产组机体应激水平较正常妊娠组明显增高(P<0.05)。2稽留流产组血清肾上腺素、血管紧张素Ⅱ水平较正常妊娠组明显增高(P<0.05)。3稽留流产组机体应激水平与血清肾上腺素水平呈正相关(r=0.698,P<0.05)。结论:机体应激水平是稽留流产的重要因素,生活应激指数和相关应激指标对于预防稽留流产有重要意义。 方杰 鲍婷郡关键词:应激 稽留流产 丹参素对乳腺癌MCF细胞株的作用 被引量:45 2003年 方杰关键词:丹参素 乳腺癌细胞株 稽留流产患者抗心磷脂抗体和抗β2糖蛋白I抗体的检测及临床意义 被引量:5 2016年 目的探讨抗心磷脂抗体(aCL)和抗β2糖蛋白I抗体(anti-β2GPI)与稽留流产之间的关系。方法选取14例稽留流产患者为试验组,20例自愿终止妊娠的正常早孕患者为对照组,采用化学发光免疫分析法(CLIA)定量检测两组患者血清IgG/IgM抗心磷脂抗体和IgG/IgM抗β2糖蛋白I抗体水平。结果试验组血清IgMaCL中位水平及血清IgManti-β2GPI中位水平与对照组比较差异均有统计学意义[IgMaCL中位水平:21.3(2.2~39.4)KU/L与6.0(1.5~10.7)KU/L,IgManti-β2GPI中位水平:11.9(1.2~25.4)KU/L与1.9(1.1—4.0)KU/L;U值分别为2.031、2.912,P均〈0.05]。两组血清IgGaCL水平及血清IgGanti-β2GPI水平比较差异均无统计学意义(P均〉0.05)。结论IgM抗心磷脂抗体和IgM抗β2糖蛋白I抗体与稽留流产有相关性,提示育龄期妇女,早期和动态检测抗心磷脂抗体和抗β2糖蛋白I抗体对降低稽留流产的发生率有一定临床意义。 陈芳 方杰 王婷 夏龙飞 马小艳 施卫东 眭建关键词:稽留流产 抗心磷脂抗体 抗Β2糖蛋白I抗体 宫颈癌肿瘤微环境中MDSC与HMGB1检测及相关性分析 被引量:6 2015年 目的检测HMGB1和髓系来源的免疫抑制性细胞(MDSC)在宫颈癌肿瘤微环境中的表达水平,分析它们在宫颈癌发生、发展中的作用及相互关系。方法用人宫颈癌Hela细胞系建立裸鼠皮下瘤模型,成瘤后取荷瘤小鼠的脾脏、肿瘤组织及外周血制成单细胞悬液,通过流式细胞术检测脾脏、外周血中MDSC细胞的百分比。分别采用Western blot、RT-q PCR方法检测肿瘤组织中HMGB1蛋白和m RNA的表达水平。结果与正常对照组相比,荷瘤鼠外周血和脾脏中CD11b+Gr-1+MDSC的比例明显增高(P<0.05)。与癌旁组织对照组相比,荷瘤鼠肿瘤组织中HMGB1呈明显高表达,具有统计学意义(P<0.05)。荷瘤鼠脾脏中CD11b+Gr-1+MDSC增高与肿瘤组织中HMGB1的高表达呈正相关。结论宫颈癌肿瘤微环境中HMGB1可能通过调控MDSC参与宫颈癌的发生、发展。 方杰 包婷郡 陈蒙晔 刘月琴 倪萍 林新 朱宸娴 沈慧玲 许文林 苏兆亮关键词:HMGB1 MDSC 宫颈癌 重组人血管内皮抑素联合低氧诱导HeLa细胞自噬和凋亡 被引量:1 2014年 目的观察重组人血管内皮抑素(rhES)联合低氧对人宫颈癌HeLa细胞自噬和凋亡的影响。方法取对数生长期HeLa细胞在低氧的基础上分别给予以下处理:PBS、rhES、rhES联合3-甲基腺嘌呤(3-MA)。处理24 h后,Hochest33528染色及annexin V-FITC/PI染色集合流式细胞术检测细胞的凋亡率,Western blot法检测微管相关蛋白轻链3(LC-3)、Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果 Hochest33528染色提示低氧联合rhES组可以诱导细胞出现核碎裂;Annexin V-FITC/PI染色结合流式细胞术检测发现3组细胞的凋亡率分别为:(2.94±0.45)%、(21.38±0.92)%、(6.87±0.58)%,低氧联合rhES诱导细胞凋亡比率明显高于其他2组;Western blot法检测结果显示,与其他2组比较,低氧联合rhES处理HeLa细胞后LC-3Ⅱ及Bax表达水平明显升高,而Bcl-2明显降低。结论 rhES联合低氧可以促使HeLa细胞发生自噬和凋亡。 方杰 包婷郡 周红林 王念 王颖 黄文思 吴荧荧关键词:自噬 重组人血管内皮抑素 低氧 小鼠T2细胞特异性转录因子GATA3基因的克隆和序列分析 被引量:1 2008年 目的:克隆小鼠Th2细胞分化转录因子GATA3基因的全长编码区cDNA。方法:利用RTPCR方法,从Balb/c小鼠脾细胞的mRNA中扩增GATA3基因全长cDNA,并将其连接到pMD18-T载体上,进行测序和核酸分析。结果:扩增得到的小鼠GATA3基因cDNA全长1332bp,编码444个氨基酸,其结构含有识别和结合DNA所需的高度稳定的蛋白区;blast结果分析表明,该cDNA与Genbank中发表的序列(BC062915)具有100%的同源性。结论:获得小鼠GATA3基因的克隆,为进一步研究转基因免疫干预奠定了基础。 方杰 郑金旭 张雅琴 林小涛 吴燕 许化溪 眭建关键词:GATA3 基因克隆 RTPCR 长链非编码RNA及其与疾病相关性的研究进展 被引量:1 2019年 人类基因组中,用于蛋白质编码的核酸序列约占1.5%,另外98.5%的非蛋白编码基因被视为"噪音"序列,并未引起人们的注意。随着测序技术的发展,人们发现大部分的基因被转录成RNA,其中多数为长度大于200nt且不编码蛋白质的长链非编码RNA(Long non-coding RNA, lncRNA),其作用机制包括支架分子、引导分子等,广泛参与细胞发育、增殖及迁移过程,且其水平的改变又与肿瘤、代谢性疾病等相关。本文主要对lncRNA的分类、作用机制及涉及的疾病等进行综述,为进一步研究lncRNA的功能机制奠定基础。 郭雪珂 周林 谢冰 刘佳佳 刘佳佳 方杰关键词:长链非编码RNA 结构特征 生物学功能