方杰
- 作品数：34 被引量：80H指数：5
- 供职机构：浙江省医学科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金浙江省中医药科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 基于CRISPR技术和水动力尾静脉注射建立肝脏特异性敲除小鼠模型的方法
- 基于CRISPR技术和水动力尾静脉注射建立肝脏特异性敲除小鼠模型的方法，属于生物技术领域。该方法通过水动力尾静脉注射输送CRISPR系统在肝脏特异性表达建立肝脏特异性敲除小鼠模型。本发明不仅可以针对性使用CRISPR/C...
- 马月余陈欢应华忠张欢欢方杰莫丽
- 文献传递
- 石荠苧总黄酮对博来霉素致大鼠肺纤维化的治疗作用及其机制被引量：5
- 2017年
- 目的观察石荠苧总黄酮(MSF)对博来霉素致大鼠肺纤维化的干预作用,并初步探讨其机制。方法 60只SD大鼠随机分为正常组,模型组,阳性对照组,MSF低、中、高剂量组,气道注射博来霉素(5 mg·kg^(-1))制备大鼠肺纤维化模型。造模14 d后,阳性对照组给予2 mg·kg^(-1)醋酸泼尼松,MSF低、中、高剂量组分别给予40,80,160 mg·kg^(-1),正常组和模型组给予等量生理盐水,每天1次,连续28 d,于造模42 d后检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、白细胞介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和透明质酸(HA)含量,Masson染色观察纤维化发展情况,免疫组化检测α-肌动蛋白(α-SMA)表达,蛋白印迹检测核因子-κB(NF-κB)、TGF-β1、TNF-α、Smad2/3和p Smad2/3表达情况。结果与模型组相比,MSF干预后大鼠血清SOD、GSH活性显著增加;IL-4、TNF-α、TGF-β1和HA含量显著降低(P<0.01);α-SMA表达明显下调,纤维化程度减轻;NF-κB、TNF-α、TGF-β1、Smad2/3和pSmad2/3表达显著降低(P<0.01)。结论 MSF对肺纤维化具有一定的治疗作用,其机制可能与抑制NF-κB和TGF-β1通路信号转导有关。
- 吕昂王海红俞文英张欢欢方杰金晓音余陈欢
- 关键词：肺纤维化博来霉素NF-ΚBTGF-Β1
- 槲皮素对大鼠非酒精性脂肪肝炎的治疗作用及其机制被引量：6
- 2017年
- 目的观察槲皮素对大鼠非酒精性脂肪肝炎(NASH)的治疗作用,以及槲皮素对NASH大鼠肝组织核因子-κB(NF-κB)及其下游转录因子表达水平的影响。方法采用高脂饲料喂食6周,建立NASH大鼠模型。灌胃给予40~160 mg/kg槲皮素治疗4周。采用生化检测仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平。采用Western blotting法检测各组肝脏中NF-κB蛋白表达情况。采用RT-PCR技术检测各组肝脏中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素1β(IL-1β)mRNA的表达情况。结果与高脂模型组相比,槲皮素各剂量组大鼠血清LDL-C、TC、AST水平显著降低。病理组织学检查结果表明,给予槲皮素治疗后,可明显减轻NASH大鼠肝脏脂肪变性和炎性细胞浸润;同时,还可明显降低TNF-α、IL-6和IL-1β mRNA以及NF-κB p65蛋白的表达,并呈一定的量效关系。结论槲皮素对高脂饮食诱导大鼠NASH有明显治疗作用,作用机制可能与其抑制肝细胞脂质沉积和调控NF-κB通路有关。
- 李剑波余陈欢王志远方杰应华忠
- 关键词：炎症反应高血脂
- 石荠苧总黄酮的大孔树脂吸附纯化及其体外抑菌活性研究被引量：2
- 2014年
- 目的:确定石荠苧总黄酮的大孔树脂吸附纯化工艺条件及其体外抑菌活性。方法:采用静态吸附和解吸实验考察不同型号大孔树脂对石荠苧总黄酮的吸附和解吸性能,确定其最佳分离纯化条件。采用二倍稀释法,检测石荠苧总黄酮对7种常见致病菌的抑菌效果。结果:HPD300大孔树脂对石荠苧总黄酮的吸附量最大,吸附率和回收率也最高。在室温下,将浓度为5.55 mg/mL(pH=3.0)的石荠苧总黄酮提取液,以2.0 mL/min速上经预处理后的HPD300大孔树脂柱,吸附后先以80 mL蒸馏水洗脱树脂柱,再用70 mL 60%乙醇(pH=8.0)以2.0 mL/min流速洗脱。此工艺条件下石荠苧总黄酮的回收率达89.12%,纯度为90.77%。纯化所得的石荠苧总黄酮对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、痢疾杆菌具有较强的抑菌作用,其MIC分别为0.31 mg/mL、0.63 mg/mL、0.63 mg/mL。结论:HPD300大孔树脂适用于石荠苧总黄酮的分离纯化。石荠苧总黄酮对金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌具有较强的抑菌作用。
- 余陈欢臧家娜方杰俞文英吴晓宁
- 关键词：黄酮大孔树脂抑菌活性
- 一种特异性靶向FOXO1基因的CRISPR-Cas纳米载药系统及其应用
- 一种特异性靶向FOXO1基因的CRISPR‑Cas纳米载药系统及其应用，属于基因工程及生物医药技术领域。本发明一方面提供了一种特异性靶向FOXO1基因的CRISPR‑Cas纳米载药系统，另一方面提供了该系统在制备用于治疗...
- 王志远张欢欢余陈欢俞文英方杰谢珲钟宇森应华忠
- 文献传递
- 一种治疗肺部感染性疾病的药物及其应用
- 一种治疗肺部感染性疾病的药物及其应用，属于药物技术领域。该药物包含从四方蒿或风轮菜提取的总黄酮、新橙皮苷二氢查耳酮、柚皮苷二氢查耳酮、7-甲氧基汉黄芩素、6,7-二甲氧基黄芩素或其药学上可接受的盐中任意1种物质或任意2种...
- 余陈欢应华忠陈勤钟宇森臧家娜方杰
- 文献传递
- CRISPR系统特异性敲除目的基因在肝病小鼠模型中的应用
- 2017年
- 目的利用腺相关病毒（AAV）转导和CRISPR技术建立肝脏相关疾病小鼠模型。方法AAV-绿色荧光蛋白（GFP）表达系统（AAV-GFP）和CRISPR靶向基因敲除质粒系统（px330-sgGFP—Cas9），三组FVB／NJ小鼠采用尾静脉高压水动力注射技术分别注射生理盐水（对照组）、AAV-GFP（AAV-GFP组）、AAV—GFP＋px330-sgGFP-Cas9（sgGFP组），采用小动物活体成像仪检测小鼠肝脏GFP表达情况。结果生理盐水对照组小鼠肝脏不表达GFP；AAV—GFP组小鼠肝脏72h后开始表达GFP，2周后GFP表达稳定；sgGFP组在第9、12天均表达GFP蛋白，但2周后GFP蛋白明显减弱。结论本研究所构建的AAV—GFP表达系统能够在小鼠肝脏中稳定表达GFP。所构建的CRISPR质粒系统可以特异性敲除小鼠肝脏所携带的目的基因，建立合适的肝脏疾病研究模型。
- 马月莫丽方杰张欢欢余陈欢
- 筋骨草提取物及其有效成分抑制乙酰胆碱酯酶活性的研究被引量：2
- 2013年
- 目的:研究筋骨草抑制乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的有效部位及有效成分。方法:通过改进的Ellman比色法测定,测定不同极性溶剂梯度提取物对AChE活性的抑制率。并对有效部位进行LC-MS分析。结果:各提取物在体外对AChE均具有一定的抑制作用,其中乙酸乙酯部位的半数抑制浓度最小,IC50值为0.0997 mg/mL,LC-MS分析其主要含有木犀草素和槲皮素等成分,其中木犀草素对AChE活性具有较强的抑制作用。结论:筋骨草提取物中木犀草素等黄酮类成分,为其抗AD有效成分。
- 徐颖方杰余陈欢叶海潮
- 关键词：筋骨草乙酰胆碱酯酶挥发油木犀草素
- 米碎花药效微小核糖核酸的鉴定及其靶基因功能分析被引量：4
- 2015年
- 目的筛选米碎花Eurya chinensis茎叶的微小核糖核酸(Micro RNAs,mi RNAs)类药效物质及其靶基因功能分析。方法采用高通量测序法,测定米碎花、正常小鼠和喂食米碎花匀浆液小鼠肝组织及血浆中mi RNAs的表达丰度,并与Gene Bank上的植物mi RNAs数据库比对,结合实时荧光定量PCR(RTFQ-PCR)验证,鉴定吸收进入体内的米碎花mi RNAs。以人类m RNA为靶标,采用Target Scan与Mi Randa预测米碎花mi RNAs的靶基因,并通过基因功能聚类(GO)与KEGG分析靶基因的相关功能。结果共鉴定出5个米碎花mi RNAs可吸收进入体内,其主要在生化过程、细胞成分和分子功能3大区域发挥作用,并影响肿瘤、代谢、炎症等相关信号通路。结论 mi RNAs可能是一类新型的中药药效物质。
- 方杰胡毅翔应华忠俞文英金晓音余陈欢
- 关键词：药效物质微小核糖核酸MAPK信号通路高通量测序
- 薄层色谱生物自显影技术对筋骨草提取物及其有效成分活性的研究被引量：2
- 2014年
- 目的:研究筋骨草提取物及其有效成分对乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的抑制作用。方法:薄层色谱生物自显影法和比色法,检测筋骨草提取物及其有效成分抗AChE活性的作用。结果:筋骨草乙酸乙酯提取物及其有效成分木犀草素对AChE活性具有较强的抑制作用。结论:筋骨草中木犀草素为其抗阿尔茨海默病有效成分。
- 徐颖方杰吴晓宁
- 关键词：筋骨草乙酰胆碱酯酶木犀草素阿尔茨海默病
