方志刚
- 作品数：37 被引量：101H指数：5
- 供职机构：中山大学附属第三医院更多>>
- 发文基金：广州市科技计划项目广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程冶金工程更多>>
- 去甲氧柔红霉素联合阿糖胞苷治疗非-M3型急性髓细胞白血病疗效观察
- 目的：柔红霉素联合阿糖胞苷(Ara-C)方案是治疗急性髓细胞白血病常用的诱导缓解治疗方案,初治完全缓解率可达50～70％。柔红霉素糖苷基C4位上去掉甲氧基而形成去甲氧柔红霉素(Ida),提高了亲脂性,并能透过血脑屏障及胎...
- 黄仁魏李旭东胡元李晓青王文文何易肖若芝方志刚
- c-Myc抑制剂10058-F4对伊马替尼耐药细胞的增殖抑制作用被引量：4
- 2014年
- 目的:探讨c-Myc小分子抑制剂10058-F4对慢性粒细胞白血病细胞K562及伊马替尼耐药的K562/G细胞的影响,为克服耐药提供新的治疗策略。方法:Western blotting测定细胞中c-Myc蛋白表达水平,PI染色检测细胞周期。MTT法及克隆形成实验测定K562及K562/G细胞的增殖情况,Annexin V-PI染色检测细胞凋亡。结果:MTT结果显示,耐药细胞K562/G与K562细胞相比,对伊马替尼的敏感性明显降低;Western blotting检测结果表明耐药细胞具有c-Myc蛋白高表达的特点。进一步MTT结果显示,与对照组相比,c-Myc小分子抑制剂10058-F4可抑制K562及K562/G细胞的增殖,并呈剂量及时间依赖性。重要的是,K562/G细胞比K562细胞对10058-F4敏感性更高。细胞周期检测显示,10058-F4可使K562及K562/G细胞周期阻滞于G0/G1期,表明抑制cMyc导致的增殖抑制与细胞周期阻滞相关。Annexin V-PI染色结果显示10058-F4可促进K562及K562/G细胞发生凋亡。克隆形成实验表明K562/G耐药细胞的克隆形成数目明显高于K562细胞。同时,与对照组相比,10058-F4可抑制细胞的克隆形成能力,并增强伊马替尼的毒性作用。结论:耐药细胞K562/G具有c-Myc高表达的细胞遗传学特点;10058-F4可抑制K562及K562/G细胞增殖,促进凋亡,并抑制细胞的克隆形成能力;c-Myc抑制剂10058-F4可逆转c-Myc高表达引起的耐药。
- 龙梓洁方志刚潘晓娜范蕊芳林东军
- 关键词：C-MYC伊马替尼耐药慢性粒细胞白血病
- 抗原冲击致敏树突状细胞诱导特异性CTL杀伤Jurkat细胞实验研究被引量：3
- 2006年
- 本研究以健康人外周血单核细胞为前体细胞,体外诱导其为树突状细胞(DC),分别负载Jurkat细胞冻融抗原及WT1多肽抗原,产生特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL),以探讨其对白血病Jurkat细胞的杀伤作用。联合应用rhGM-CSF、rhIL-4、rhTNF-α及rhsCD40L等细胞因子,密度梯度离心法、贴壁法从外周血获取单核细胞并进行诱导扩增,培养出DC,分别用冻融抗原及WT1多肽抗原冲击致敏DC。实验分4组冻融抗原致敏DC组为实验组A,WT1多肽致敏DC组为实验组B,未致敏DC组为对照组A,单核细胞组为对照组B,观察CTL对Jurkat细胞的杀伤作用。结果表明培养出了具有典型特征的DC,它高表达CD40、CD80、CD1a及CD86等表面标志,能体外诱导强烈的同种异基因混合淋巴细胞增殖反应。实验组显示高水平杀伤率,与对照组比较均具有统计学意义(P<0.01),实验组A、B间比较无统计学意义。结论Jurkat细胞冻融抗原及WT1多肽抗原冲击致敏DC能有效诱导T细胞抗白血病作用,为临床研制DC疫苗提供了实验依据。
- 林东军方志刚李旭东刘加军陆英
- 关键词：树突状细胞JURKAT细胞冻融抗原细胞毒作用
- 去甲氧柔红霉素联合阿糖胞苷治疗非M3型急性髓系白血病疗效观察
- 目的：观察IA方案治疗非M3型急性髓系白血病(AML)的疗效.方法：①患者资料：非M3-AML19例,其中初治16例,难治复发3例.男12例,女7例.平均年龄37.9(16～64)岁;AML类型：M11例,M24例,M4...
- 黄仁魏胡兀李晓青王文文李旭东何易肖若芝方志刚
- 关键词：去甲氧柔红霉素阿糖胞苷急性髓系白血病疗效观察
- 文献传递
- 健康人外周血树突状细胞诱导培养及鉴定
- 2005年
- 【目的】从健康人外周血中分离出单个核细胞(PBMC),经体外诱导培养获取树突状细胞(DC)并鉴定其表型。【方法】应用 GM-CSF、IL-4、TNF-α等细胞因子自外周血单个核细胞诱导扩增,培养出 DC,动态观察细胞形态,流式细胞仪检测其表面标志,采用混合淋巴细胞培养法检测其刺激同种异体淋巴细胞增殖能力。【结果】经诱导培养出具有典型特征的 DC,高表达 CD86、CD80,DC 特征性标志 CD1a 平均为49.28%,在体外能诱导强烈的同种异体混合淋巴细胞增殖反应。【结论】该方法能可靠地诱导培养出 DC,为 DC 的进一步研究提供实验依据。
- 林东军方志刚华佳叶刘相富黄仁魏
- 关键词：树突状细胞表面分子
- 地西他滨联合造血干细胞移植治疗骨髓增生异常综合征转化急性白血病一例临床疗效分析
- 目的：观察地西他滨联合造血干细胞移植治疗骨髓增生异常综合征转化急性白血病的临床疗效及并发症。方法：骨髓增生异常综合征转化的急性髓系白血病患者1例，先后予以2个疗程地西他滨及异基因造血干细胞移植治疗，观察临床疗效、地西他滨...
- 李旭东何易胡元肖若芝方志刚郑永江刘加军林东军
- 关键词：地西他滨造血干细胞移植骨髓增生异常综合征急性白血病临床疗效
- 文献传递
- WT1致敏树突状细胞激活CTLs对HL60细胞作用的研究被引量：1
- 2006年
- 目的研究分别负载WT1多肽抗原及HL60细胞冻融抗原的树突状细胞(DCs)产生的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)对HL60细胞的杀伤效应。方法联合应用rhGM-CSF、rhIL-4、rhTNF-α及rh-sCD40L等细胞因子,诱导扩增自健康人外周血获取的单核细胞,培养出DCs,分别用WT1多肽抗原及冻融抗原冲击致敏,激活淋巴细胞。实验分4组WT1多肽致敏DCs为实验组A,HL60细胞冻融抗原致敏DCs为实验组B,未致敏DCs组为对照组A,单核细胞组为对照组B,LDH释放法检测CTLs对HL60细胞的杀伤作用。结果培养出具有典型特征的DCs,表达CD40达96%,CD80达77%,CD1α达69%,CD86达97%,体外能诱导强烈的同种异体混合淋巴结胞增殖反应。在效靶比为20∶1时,WT1多肽致敏DCs组时HL60细胞杀伤率为89.1%,冻融抗原负载DCs组为90.6%,未致敏DCs组为32.8%,单核细胞组为26.1%。以下多肽或冻融抗原负载DCs与对照组相比显示更强的杀伤效应,P<0.01。结论WT1多肽抗原及HL60细胞冻融抗原冲击致敏DCs均能有效诱导T细胞抗白血病作用,为临床研制DCs疫苗提供实验依据。
- 林东军李旭东黄仁魏刘加军方志刚
- 关键词：树突状细胞HL60细胞冻融抗原
- 成人急性B淋巴细胞白血病CD20表达及临床意义被引量：3
- 2015年
- 目的:本研究分析成人急性B淋巴细胞白血病(B ALL)中CD20表达情况,探讨CD20表达与其临床特点、疗效及预后的关系。方法:采用流式细胞术检测44例初诊B ALL患者CD20抗原表达,并分析其临床特点和生存情况。结果:CD20+组bcr abl融合基因表达阳性率低于CD20-组,差异有统计学意义(P<0.05)。2组患者在初诊白细胞数、血红蛋白水平、血小板数、骨髓原始细胞比例、血清乳酸脱氢酶水平、染色体异常、首疗程完全缓解率(CR1)、生存率方面差异无统计学意义。结论:CD20阳性ALL临床特点、疗效和预后与CD20阴性ALL差异无统计学意义,提示CD20尚不能作为ALL的预后监测指标。
- 张玲范蕊芳龙冰方志刚赖文兴林东军
- 关键词：CD20流式细胞术
- 自体造血干细胞移植治疗急性髓系白血病的疗效观察被引量：3
- 2018年
- 目的观察自体造血干细胞移植对完全缓解期的急性髓系白血病(AML)患者的疗效。方法回顾性分析14例行自体造血干细胞移植的AML患者的临床资料,其中低危7例,中危6例,高危1例。预处理后予回输预先冻存的自体外周血造血干细胞,并予成分输血、升白细胞、预防感染等治疗,观察患者的自体干细胞造血重建情况,并了解移植相关并发症的发生情况;绘制生存曲线并计算术后1年和3年的存活率和无病存活(DFS)率。结果 14例患者均获得造血重建,白细胞植入中位时间为12(9~28)d,血小板植入中位时间为29(8~158)d。2例患者粒细胞缺乏期出现大肠杆菌败血症,1例发生普通变形杆菌败血症,1例患者在移植后29 d出现巨细胞病毒血症,其余患者预处理后出现感染或胃肠道反应,经抗感染及其它对症支持等治疗后均治愈。随访时间29.8(5.3~61.5)个月,14例患者中共有5例复发(35.7%),11例患者存活,3例死于复发。术后1年、3年的存活率分别为86%和79%,术后1年、3年的DFS率分别为64%和57%。结论自体造血干细胞移植是大部分低、中危AML患者的有效治疗方法。
- 孙燕玲张競文方志刚
- 关键词：造血重建外周血造血干细胞
- 急性白血病患者骨髓细胞中TIMP3、RUNX3蛋白表达情况检测及其临床意义被引量：4
- 2010年
- 目的:检测急性白血病(AL)患者骨髓细胞中的TIMP3、RUNX3蛋白表达的情况及其与基因甲基化的关系,并探讨其与AL患者预后的关系。方法:采用Western blotting检测50例AL患者骨髓单个核细胞(BM-MCs)及10例健康供者外周血单个核细胞(PBMCs)中TIMP3、RUNX3蛋白表达的情况,结合前期实验中TIMP3、RUNX3启动子区域甲基化检测结果,对与AL患者预后有关的因素进行统计分析。结果:50例AL患者BMMCs中RUNX3甲基化组该蛋白表达明显少于未甲基化组及正常对照组(P<0.05),AL患者完全缓解(CR)率与RUNX3蛋白表达及骨髓中原始细胞比例有关,RUNX3蛋白失表达、骨髓中原始细胞比例高的患者CR率低,反之较高。结论:RUNX3启动子区域甲基化是导致该蛋白失表达的原因,其参与了AL的发病,并与不良预后有关,TIMP3甲基化与急性白血病发病无关。
- 范蕊芳方志刚刘相富郑永江刘彬彬林东军
- 关键词：甲基化白血病
