方云祥
- 作品数：49 被引量：273H指数：9
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- 酶联免疫吸附法定量检测生物样品中的鼠神经生长因子
- 2008年
- 目的验证酶联免疫吸附（EUSA）法定量测定生物样品中的鼠神经生长因子（mNGF）。方法利用双抗体夹心原理，建立mNGF测定方法学，考察方法学特异性、灵敏度、线性范围、精密度与准确度；并用此法研究比格犬肌注mNGF后的药物动力学。结果方法特异性良好，线性范围31．2～2000Pg·mL^-1，可靠定量下限（LLOQ）为31．2pg·mL^-1批内及批间精密度均〈16％，准确度为-9．3％～12．1％。结论ELISA法灵敏度高、通量大、重复性、准确度及精密度好。适用于生物样品中mNGF的定量检测。
- 王婉灵邹佳陈方王清清方云祥
- 关键词：鼠神经生长因子酶联免疫吸附法药物动力学
- 脑脉泰对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤NOS和氧自由基的影响被引量：2
- 2009年
- 目的研究脑脉泰对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤NOS和氧自由基的影响。方法大脑中动脉线拴法(MCAO)制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型:60只雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham)、脑缺血再灌注模型组(MCAO)、脑脉泰大、中、小(2.24、1.12、0.56g/kg)剂量组和尼莫地平组(10mg·kg),每组10只大鼠。术后取梗死侧脑组织做成匀浆,检测脑组织中丙二醛(MDA)、乳酸(LA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)含量。免疫组化染色检测缺血半暗带iNOS和eNOS蛋白表达。结果脑组织匀浆生化指标检测发现缺血脑脉泰能显著降低脑组织中MDA和LA含量;升高SOD和GSH含量,脑缺血半暗带的eNOS蛋白表达明显增加,iNOS表达显著减少,与MCAO模型组比较,有显著性差异(P<0.05)。结论脑脉泰能减少脑缺血/再灌注损伤,其保护作用与增加脑组织的抗氧化能力和eNOS/iNOS有关。
- 邹节明王征吴建华方云祥
- 关键词：脑脉泰缺血再灌注损伤脑缺血NOS氧自由基
- PTE-ET-18-OCH_3诱导线粒体聚积并促发凋亡被引量：1
- 2007年
- 目的探讨PTE-ET-18-OCH3(ET-18-OCH3荧光拟似物)引起Jurkat细胞凋亡的作用机制。方法应用PTE-ET-18-OCH3染色、Mito Traker(red)染色和TUNEL试验检测药物的沉积部位及药物促发细胞凋亡的途径。结果应用PTE-ET-18-OCH3处理肿瘤细胞后,PTE-ET-18-OCH3染色和Mito Traker(red)共同染色可见,药物沉积于线粒体,并诱导线粒体的聚集;TUNEL试验可见,处理组细胞染色体DNA链断裂,Propidium iodide荧光显示细胞核发生碎裂并溶解。结论PTE-ET-18-OCH3主要沉积于肿瘤细胞的线粒体并诱导线粒聚集,随后通过线粒体诱导的凋亡通路促发肿瘤细胞的凋亡。
- 张辉方芳方云祥喻莉萍Faustino Mollinedo
- 电刺激丘脑底核对脑纹状体DA、Glu、GABA的影响被引量：1
- 2004年
- 目的 探讨电刺激丘脑底核对大鼠纹状体多巴胺能神经元递质释放的影响。方法 以深部电刺激术 (Deepbrainstimulation ,DBS)刺激 6 -OHDA损伤大鼠后 ,应用高效液相色谱 (highperformanceliquidchromatography ,HPLC)测定大鼠脑组织中的DA、Glu、GABA。结果 15 0Hz电刺激时 ,纹状体DA和GABA含量几乎达到正常对照组水平 ,与正常对照组差异无显著性 (10 .0 9± 1.4 7ng/mgvs 10 .6 5± 1.5 2ng/mg,P>0 .0 5 )。Glu的含量比较 ,在各种频率电刺激时 ,均显著低于正常组 ,但 15 0Hz电刺激组Glu含量较 5 0Hz、10 0Hz电刺激组有显著性升高 (2 .87± 0 .2 9μg/mgvs 2 .0 8±0 .2 2 μg/mg,2 .4 9± 0 .17μg /mg ,P <0 .0 1)。结论 DBS使纹状体多巴胺能神经元递质合成与分泌发生了改变。
- 张辉方芳张海涛方云祥
- 关键词：电刺激纹状体丘脑底核DA多巴胺能神经元
- 铅镉砷混合毒物对机体免疫功能的影响被引量：6
- 2004年
- 目的 探讨金属毒物对机体免疫损伤的敏感指标。方法 选择 2 8名重金属中毒的矿工作为毒物组 ,另选择 2 8名同期住院患者作为对照组 ,分别检测患者血、尿铅、镉、砷含量 ,及血免疫球蛋白含量。结果 毒物组血、尿铅、镉、砷含量较对照组显著升高 (P <0 .0 1 )。与对照组比较 ,IgG下降了 1 .1 6倍 ,IgM下降了 0 .51倍 ,而IgA升高了 0 .2 9倍 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 1 )。
- 张辉王向日周泽美周少平周勇方云祥
- 关键词：镉砷免疫功能免疫毒性
- 氟伐他汀对溶血性磷脂酰胆碱致动脉平滑肌细胞增殖和凋亡相关因子表达的影响被引量：1
- 2007年
- 目的:观察氟伐他汀对溶血性磷脂酰胆碱(LPC)诱导人脐动脉平滑肌细胞(HUASMC)增殖和凋亡作用的影响,探讨他汀类药物抗动脉粥样硬化的机制。方法:采用体外培养的HUASMC,待其生长到融合状态时用不同浓度(10-7～10-5mol/L)氟伐他汀和LPC(1、2.5、5mg/L)干预后用MTT法检测细胞增殖,Hoechst-33258染色法观察细胞凋亡,免疫组化染色方法和RT-PCR检测血管平滑肌凋亡相关因子Survivin、Fas的表达。结果:(1)MTT结果反映LPC作用24hHUASMC数量明显增多,增殖指数增大,氟伐他汀能抑制LPC促增殖的作用,使OD值降低,细胞数量明显减少;(2)免疫组化和RT-PCR结果显示:LPC对照组(5mg/L)和氟伐他汀处理组在作用早期(6～12h)Survivin因子表达明显,胞浆内可见大量棕黄色颗粒,随时间延长Survivin因子表达逐渐下降,72h时Survivin因子表达明显减弱,与LPC对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);而LPC对照组和氟伐他汀处理组在早期(6～24h)Fas因子表达不明显,晚期(48～72h)可检测到Fas因子大量表达,胞浆内可见棕黄色颗粒,晚期处理组与LPC对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:氟伐他汀抑制LPC对HUASMC的促增殖作用并诱导细胞发生凋亡,其凋亡作用主要与抑制Survivin因子和促进Fas因子表达有关。
- 陈颇静蔡志春黎敏李健哲王晨静吴建华方云祥
- 关键词：溶血性磷脂酰胆碱氟伐他汀人脐动脉平滑肌细胞SURVIVINFAS
- 小剂量阿司匹林与培哚普利合用对兔血中前列环素、血栓素A_2和去甲肾上腺素的影响被引量：3
- 2002年
- 目的 :检测小剂量阿司匹林 (ASA)与血管紧张素转换酶抑制剂 (ACEI)在单用或合用时兔血中前列环素(PGI2 )、血栓素A2 (TXA2 )和去甲肾上腺素 (NE)浓度的变化 ,探讨它们合用时相互作用的关系。方法 :将 4 0只健康新西兰兔随机分成 4组 ,于连续投药 4周前后分别心脏穿刺取血 ,放射免疫法检测PGI2 和TXA2 ,高效液相色谱法检测NE。结果 :不论是单用还是合用 ,ACEI均使PGI2 浓度增高 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,小剂量ASA则降低TXA2 的浓度 (P<0 .0 5 ,P <0 .0 5 ) ;ASA与ACEI合用组的PGI2 TXA2 明显升高 (P <0 .0 1) ,血清NE浓度明显下降 (P <0 .0 0 1)。结论 :小剂量ASA和ACEI单用时对兔血清NE浓度无明显影响 ,合用时PGI2 TXA2 比值上升 ,血清NE浓度下降 ,故二者有协同作用。
- 庄汉屏李兢方云祥
- 关键词：培哚普利前列环素血栓素A2去甲肾上腺素
- 深部电刺激诱导6-OHDA损伤鼠纹状体神经介质和KATP通道亚单位mRNA的改变
- 2008年
- 目的探索深部电刺激(deep brain stimulation,DBS)对6-OHDA损伤鼠纹状体神经介质的影响及其对纹状体KATP通道亚单位mRNA的改变。方法采用立体定向的方法将电极置于6-OHDA损伤鼠右侧脑丘脑底核(subthalamic nucleus,STN)进行深部电刺激,分离出大鼠脑纹状体后用高效液相法测定DA、Glu、GABA的浓度,并用RT-PCR检测KATP通道亚单位mRNA的改变。结果DBS显著增加6-OHDA损伤鼠纹状体中DA、Glu、GABA的浓度,同时RT-PCR检测也发现,DBS增强Kir6.1,Kir6.2mRNA的表达。结论DBS可能通过增强Kir6.1,Kir6.2 mRNA的表达而影响大鼠脑纹状体中DA、Glu、GABA的浓度。
- 张辉喻莉萍李旭李强国方芳方云祥李林珍
- 关键词：纹状体ATP敏感性钾通道
- 法舒地尔对大鼠脑缺血再灌注损伤炎症反应的影响被引量：19
- 2008年
- 目的:观察法舒地尔对大鼠脑缺血再灌注损伤炎症反应的影响,探讨其抗炎机制。方法:大脑中动脉线栓法(MCAO)制作大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,缺血1.5h再灌注24h。法舒地尔术前腹腔注射给药15mg/kg,术后12h再次给药。术后对大鼠神经功能进行评分,TTC染色观察脑梗死体积;用干湿重法测定脑含水量;分光光度法测定髓过氧化物酶(MPO)活性;伊文思兰法(EB)测定血脑屏障的损伤程度;免疫组化检测大鼠脑缺血区细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、NF-κB p65的表达;ELISA法检测IL-8的含量;Western blot法检测单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和核抽提物中NF-κBp65蛋白的表达;RT-PCR检测NF-κB p65mRNA的表达。结果:法舒地尔能明显改善脑缺血再灌注损伤大鼠神经缺陷症状,缩小脑梗死体积,明显降低缺血侧脑组织的含水量、EB含量及MPO活性;显著抑制ICAM-1、VCAM-1、IL-8和MCP-1蛋白的表达;降低NF-κB p65mRNA和蛋白的表达;减少脑组织核抽提物中NF-κB p65的蛋白量(P<0.05vsMCAO组)。结论:法舒地尔通过抑制NF-κBp65的活化,进而抑制黏附分子及趋化因子的表达,减轻脑缺血再灌注损伤的炎症反应。
- 吴建华方云祥
- 关键词：法舒地尔脑缺血NF-ΚB炎症
- 后适应对大鼠脑缺血-再灌注损伤线粒体结构和功能的影响被引量：5
- 2007年
- 目的观察后适应对大鼠脑缺血-再灌注损伤线粒体结构和功能的影响。方法雄性SD大鼠随机分为假手术组、缺血-再灌注模型组(MCAO)、MCAO+预适应组、MCAO+后适应组和MCAO+尼莫地平组。大鼠脑缺血-再灌注24 h后,取脑进行TUNEL染色,免疫组织化学检察Bcl-2,Bax,Casepase-3和p53的蛋白表达,测定大鼠脑组织线粒体肿胀度、膜流动性、膜磷脂(PL)和丙二醛(MDA)含量、测定线粒体Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶和超氧化物歧化酶(SOD)活性,并观察线粒体超微结构的改变。结果脑缺血-再灌注后半暗带线粒体的MDA含量明显增高,PL含量减少,膜脂流动性降低;ATP含量及Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、SOD活性明显降低。与MCAO组比较,后适应组大鼠凋亡细胞和Bax、Casepase-3、p53蛋白表达明显减少,ATP含量及Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、SOD活性明显升高。MCAO组大鼠脑线粒体肿胀,线粒体嵴断裂、溶解和消失,后适应明显减少缺血-再灌注引起的线粒体损伤程度。结论后适应对MCAO大鼠脑和线粒体的保护作用可能与其减少神经原凋亡,抑制p53、Bax、casepase-3表达,增加线粒体Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase、SOD活性有关。
- 方芳王婉灵余术宜谢立新詹志学王晨静吴建华李健哲方云祥
- 关键词：脑缺血CASEPASE-3
