徐纪明
- 作品数：8 被引量：30H指数：3
- 供职机构：杭州师范大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金杭州市技术创新项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 全雌性黄瓜中3个肌动蛋白基因片段的克隆和表达分析被引量：11
- 2008年
- 通过1次PCR扩增从全雌性黄瓜中同时获得了长度分别为1186bp、955bp和870bp的3个肌动蛋白基因片段Act1、Act2和Act3(GenBank登记号:DQ115881、DQ115882和DQ115883)。序列分析表明,3个肌动蛋白基因片段与GenBank中收录的肌动蛋白基因序列高度同源,与GenBank中收录的全长肌动蛋白基因(如AF386514.1、AF059484.1和AB010922.1等)的第2、第3个外显子和第2个内含子相对应。Act1中1￣580bp、984￣1186bp,Act2中1￣580bp、753￣955bp,Act3中1￣580bp、668￣870bp为外显子编码区,其余为内含子序列,3个基因内含子的两端序列均符合典型的"GT-AG"规则。RT-PCR分析表明,Act1仅在根中表达,Act2在根和雌花中表达,而Act3在所有检测的器官(包括根、茎、叶、卷须、雌花和幼果)中都表达,提示黄瓜根的生长发育需要多种肌动蛋白基因的参与,而Act2和Act3可能与黄瓜雌性系的形成发育有关。
- 徐纪明向太和
- 关键词：黄瓜肌动蛋白基因克隆
- 一种含绿色荧光蛋白基因的植物转基因表达载体及其构建方法和应用
- 本发明涉及生物技术中的基因工程领域，公开了一种含绿色荧光蛋白基因的植物转基因表达载体，以及其构建方法和应用。即利用pBIN19、pGFP和pCHS质粒，通过酶切和重组等方法，构建CaMV 35S启动子驱动的gfp基因的植...
- 向太和徐纪明
- 文献传递
- 黄瓜肌动蛋白基因及矮牵牛花特异性启动子的克隆和分析
- 雄性不育在植物界中是一种常见现象，由于雄性不育是杂种优势利用的基础，对雄性不育机理的探索具有重要的应用价值。已有研究表明，植物肌动蛋白与雄性不育有关，而黄瓜性别决定形式复杂多样，其中全雌株只开雌花而无雄花，类似于雄性不育...
- 徐纪明
- 关键词：基因克隆
- 一种含绿色荧光蛋白基因的植物转基因表达载体及其构建方法和应用
- 本发明涉及生物技术中的基因工程领域，公开了一种含绿色荧光蛋白基因的植物转基因表达载体，以及其构建方法和应用。即利用pBIN19、pGFP和pCHS质粒，通过酶切和重组等方法，构建CaMV 35S启动子驱动的gfp基因的植...
- 向太和徐纪明
- 文献传递
- 含gfp植物转基因表达载体的构建及在矮牵牛转基因不定根中的高效表达被引量：10
- 2008年
- 利用pBIN19、pGFP和pCHS质粒,成功构建了CaMV35S启动子驱动的gfp基因的植物转基因表达载体pBIN-35S-GFP,并导入野生型发根农杆菌K599。矮牵牛的转化实验表明,矮牵牛离体叶片被发根农杆菌K599(带pBIN-35S-GFP质粒)感染生根率达45%。对诱导的不定根基因组DNA的PCR检测表明,不定根基因组中含有发根农杆菌K599Ri质粒中的rolB基因和外源gfp基因;转基因不定根在蓝色光激发下能发出强烈的绿色荧光,表明构建的转基因载体pBIN-35S-GFP能实现gfp基因的高效表达。该载体在CaMV35S启动子的两端各有一个多克隆位点,可以方便地进行启动子替换,用于研究不同启动子的功能。此外,该载体在gfp基因的5′端含有多克隆位点,在3′端含有EcoRⅠ和BsmⅠ两个单一酶切位点,可以方便地在5′端连接上目标基因,表达含GFP的融合蛋白,进行目标基因编码蛋白的亚细胞定位;也可以方便地切除gfp基因,连上需要的目的基因进行转化。
- 徐纪明向太和
- 关键词：绿色荧光蛋白基因转基因不定根
- 矮牵牛中查尔酮合成酶基因A (chsA)2个启动子的克隆和分析(英文)被引量：2
- 2011年
- 查尔酮合成酶(chalcone synthase,CHS)是类黄酮类物质生物合成途径中的第一个关键酶,其控制基因chs为超家族基因.根据前人报道的矮牵牛查尔酮合成酶基因A(chsA)启动子的保守序列设计1对特异性引物,从矮牵牛基因组DNA中通过1次PCR同时扩增出长为550 bp和354 bp的启动子(分别命名为PchsA-L和PchsA-S,GenBank登录号:EF199747和EF199748),其中PchsA-L与PchsA-S相比,除个别碱基有差异外,在88～269 bp多出一段182 bp的序列,其中103～201 bp含有典型的内含子特征.应用DNAStar软件分析表明2条序列均含有普通启动子的保守序列TATA box、CCAAT box、capsite(CCATAA),并含有花中特异表达启动子的特征序列TACPyAT box、anther box(TAGAAGTGACAGAAAT)、G-box(CACGTG)、box1元件(ATGTCACGTGCCATC)和box2元件(TGTGTTGAAGGTTTGCTA).对克隆启动子所用的矮牵牛后代群体进行分析,130个单株中只含有PchsA-S的有13株,只含有PchsA-L的有20株,同时含有2个启动子的有97株.2个启动子在后代中发生了分离,但其分离比并不符合1∶2∶1.克隆启动子所用的矮牵牛有14条染色体,为二倍体.DNA印迹表明2个启动子在基因组中均是多拷贝.qRT-PCR分析显示:未经过紫外光处理的花中以及经过紫外光处理的花中,PchsA-L启动子驱动的chsA基因与PchsA-S启动子驱动的chsA基因表达都未见明显差异;在紫外光处理的幼苗叶片中表达量相应地比紫外光处理的花中的表达量增高;在紫外光处理的幼苗叶片中,PchsA-L启动子驱动的chsA基因比PchsA-S启动子驱动的chsA基因表达量显著增高;而未经过紫外光处理的幼苗叶片中,PchsA-L启动子驱动的chsA基因、PchsA-S启动子驱动的chsA基因都没有检测到明显的表达信号.结果表明:在矮牵牛中chsA基因存在2个独立的启动子PchsA-L和PchsA-S;启动子PchsA-L中182 bp类内含子特征的序列具有显著提高chsA基因在紫外光处理的幼苗叶片中表达量的功能.
- 向太和徐纪明王琳林磊
- 关键词：矮牵牛查尔酮合成酶基因启动子克隆
- 利用基因工程和细胞工程创制菊花新异花色和花型
- 向太和胡江琴王利琳庞基良徐纪明王琳田璟鸾
- 获得菊花转F35H基因和chsA基因再生植株,并实现F35H基因和chsA在花器官的高效特异表达;从菊花组织培养后代中获得形态变异体5个;获得镶嵌式花色和新奇花型的菊花育种材料3个.研究结果为菊花的品质改良提供了重要基础...
- 关键词：
- 关键词：菊花基因工程
- 三种模式植物性别决定的研究进展(综述)被引量：8
- 2007年
- 综述白麦瓶草、玉米和黄瓜等模式植物性别决定的研究进展,并展望今后研究方向。
- 徐纪明向太和
- 关键词：模式植物性别决定性染色体性别决定基因
