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张青
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1
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供职机构:
徐州医学院医学影像学院肿瘤研究所
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发文基金:
江苏省高校科研成果产业化推进项目
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
李彩红
徐州医学院第二附属医院
裴冬生
徐州医学院医学影像学院肿瘤研究...
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徐州医学院医学影像学院肿瘤研究...
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徐州医学院医学影像学院肿瘤研究...
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2013
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嵌合抗原受体G250-CD8-28BBZ的构建及表达
2013年
目的 构建嵌合抗原受体G250-CD8-28BBZ的慢病毒表达质粒,并研究该嵌合抗原受体在T细胞中的表达.方法 利用常规分子克隆技术将编码Igκ信号肽、抗G250单链抗体及信号结构CD8-28BBZ的编码序列拼接起来,并将得到的融合基因片段插入慢病毒表达载体pLVX-IRES-ZsGreen中,采用酶切及测序鉴定.慢病毒感染T细胞后,通过荧光显微镜、Western blot、流式细胞术检测G250-CD8-28BBZ在T细胞中的表达.结果 双酶切及测序结果显示重组质粒pLVX-G250-CD8-28BBZ构建正确;慢病毒感染后的T细胞能发出绿色荧光;T细胞表达的G250-CD8-28BBZ分子大小正确;慢病毒感染2周后,G250-CD8-28BBZ在T细胞中的阳性表达率为45.2%.结论 成功构建了嵌合抗原受体G250-CD8-28BBZ的慢病毒表达质粒,该嵌合抗原受体能够在T细胞内高效稳定表达.
张青
李彩红
杨洁
李慧忠
裴冬生
郑骏年
关键词:
肿瘤免疫治疗
G250
慢病毒
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