快速检测耐异烟肼结核分支杆菌方法的研究 本研究采用multi-PCR技术一次性特异地扩增出与耐INH相关的这三个基因,并将此扩增产物直接进行SSCP,检测基因突变的情况,并与测序结果相比较,参照药敏结果,探讨该方法的实用性和可行性. 程晓东 别良峰 苏明权 张荣 岳乔红 于文彬 郝晓柯关键词:结核分支杆菌 耐药基因 基因检测 基因突变 聚合酶链反应 文献传递 新甲型H1N1流感和季节性流感临床快速诊断试剂介绍 程晓东 郝晓柯 袁权 岳乔红 马越云 张荣 刘家云 苏明权 陈毅歆 夏宁邵快速检测耐异烟肼结核分支杆菌方法的研究 被引量:1 2006年 【目的】应用多重聚合酶链反应-单链构象多态性分析(multiple-Polymerase Chain Reaction-SingleStrand Conformation Polymorphism,multi-PCR-SSCP)方法,快速、特异地同时检出耐异烟肼(isoniazid,INH)结核分支杆菌aphC启动子i、nhA、katG基因的突变情况,并与直接测序(derict sequencing,DS)结果相比较,参照药敏试验,探讨该方法的可行性。【方法】根据结核分支杆菌的aphC启动子序列i、nhA序列、katG序列,分别设计出3对特异性寡聚核苷酸引物,采用multi-PCR-SSCP技术,同时检测对结核分支杆菌耐INH起作用的这三个基因的突变情况;同时进行耐药株的测序分析。【结果】对H37 Rv标准株、临床分离INH敏感株(23株)及INH耐药株(35株)进行multi-PCR-SSCP分析,突变检出率82.9%(29/35);耐药株测序分析突变检出率为85.7(30/35)。两种方法的符合率为97.1%[(29+5/)/35]。【结论】耐药基因检测指导治疗是一种新探索,multi-PCR-SSCP方法敏感、特异,能同时快速有效地检测结核分支杆菌aphC启动子i、nhA、katG三个INH耐药基因的突变,提高检验效率,有望成为临床指导用药的好方法。 程晓东 别良峰 苏明权 张荣 于文彬 郝晓柯关键词:药物耐受性 新甲型H1N1流感和季节性流感临床快速诊断的研究 目的:考核一种新通过认证的甲型流感病毒抗原快速检测试剂的临床应用效果.方法:选用BD公司的Directigen EZ Flu A+B流感检测试剂做为对照试剂,并以实时荧光RT-PCR结果为标准,进行比对试验.结果:实验试... 程晓东 郝晓柯 袁权 岳乔红 马越云 张荣 刘家云 苏明权 陈毅歆 夏宁邵关键词:新型甲型H1N1流感 逆转录聚合酶链反应 快速检测耐异烟肼结核分支杆菌方法的研究 目的应用多重聚合酶链反应-单链构象多态性分析(multiple-Polymerase Chain Reaction-Single StrandConformation Polymorphism,multi-PCR-SSC... 程晓东 别良峰 苏明权 张荣 岳乔红 于文彬 郝晓柯文献传递 西安地区17705例甲型H1N1流感病毒核酸检测结果的分析研究 杨柳 苏明权 马越云 张荣 韩若冰 文静 芦露 肖凤静 郝晓柯新甲型H1N1流感和季节性流感临床快速诊断的研究 被引量:2 2010年 目的考核北京万泰生物药业有限公司生产的甲型流感病毒抗原检测试剂(斑点ELISA)的临床应用效果。方法选用BD公司的Directigen EZ Flu A+B流感检测试荆作为对照试剂,并以实时荧光RT—PCR结果为标准,进行比对试验。结果万泰试剂对于64份新甲型H1N1流感病毒的检测敏感度达92.2%,对季节性流感患者的检测敏感度为91.1%。特异度为99.8%。作为对照,BD试剂检测新甲型流感病毒的敏感度为78.1%,明显低于万泰试剂(P=0.016)。结论万泰斑点ELISA试剂对于新甲型H1N1流感和季节性流感的检测灵敏度都超过90%,同时具有很好的特异度,显示了其在临床使用中的巨大潜力。 程晓东 袁权 苏明权 张荣 马越云 陈毅歆 夏宁邵 郝晓柯关键词:逆转录聚合酶链反应 多重聚合酶链反应-单链构象多态性分析检测耐异烟肼结核分枝杆菌 被引量:9 2004年 目的 建立耐异烟肼 (isoniazid ,INH )结核分枝杆菌多重聚合酶链反应 单链构象多态性分析 (multiple polymerasechainreaction singlestrandconformationpolymorphism ,multi PCR SSCP)方法 ,快速、特异地同时检出aphC启动子、inhA、katG基因的突变情况 ,用于快速诊断结核分枝杆菌对INH的耐药性。方法 根据结核分枝杆菌的aphC启动子序列、inhA序列、katG序列 ,分别设计出 3对特异性寡聚核苷酸引物 ,采用multi PCR及SSCP技术 ,同时检测对结核分枝杆菌耐INH起作用的这 3个基因的突变情况。结果 对H3 7Rv标准株、临床分离INH敏感株 (2 3株 )及INH耐药株 (3 5株 )分别采用常规PCR和multi PCR同时进行扩增 ,两种扩增方法均能扩增出预期的目的片段 ,且结果符合率达10 0 % ;采用单基因PCR SSCP ,aphC启动子序列突变检出率 17% (6/3 5)、inhA序列突变检出率 2 0 % (7/3 5)、katG序列突变检出率 66% (2 3 /3 5) ;multi PCR SSCP突变检出率 83 % (2 9/3 5)。结论 耐药基因检测指导治疗是一种新探索 ,multi PCR SSCP方法敏感、特异 ,能同时快速有效地检测结核分枝杆菌aphC启动子、inhA、katG 3个INH耐药基因的突变 ,提高检验效率 ,有望成为临床指导用药的好方法。 程晓东 于文彬 别良峰 苏明权 张荣 郝晓柯关键词:多重聚合酶链反应 单链构象多态性分析 耐异烟肼 结核分枝杆菌 药物耐受性 实时荧光定量聚合酶链反应技术对结核性脑膜炎的诊断价值 被引量:9 2015年 目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应技术(RT-PCR)对结核性脑膜炎的诊断价值。方法分别采用涂片法、RT-PCR法对结核性脑膜炎、疑似结核性脑膜炎以及非结核性脑膜炎患者的脑脊液标本进行检测,并对检测结果进行比较分析。结果涂片法共检出10例阳性,其中结核性脑膜炎7例(70.00%),疑似结核性脑膜炎3例(30.00%);RT-PCR法共检出46例阳性,其中结核性脑膜炎31例(67.39%),疑似结核性脑膜炎15例(32.61%)。对结核性脑膜炎患者检测,涂片法阳性率(12.28%)低于RT-PCR法阳性率(54.39%),差异有统计学意义(P<0.05);对疑似结核性脑膜炎患者检测,涂片法阳性率(2.91%)低于RT-PCR法阳性率(14.56%),差异有统计学意义(P<0.05);脑脊液涂片法检测结核性脑膜炎的灵敏度为12.28%,漏诊率为87.72%,RT-PCR法检测的灵敏度为54.39%,漏诊率为45.61%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 RT-PCR法诊断结核性脑膜炎具有灵敏度好,准确度高等特点,临床有重要的指导意义。 杨柳 苏明权 马越云 辛毅娟 韩若冰 张荣 文静 郝晓柯关键词:结核性脑膜炎 脑脊液 汉族非亲缘男性个体Y染色体STR基因座遗传多态性分析 韩若冰 苏明权 芦露 文静 张荣 郝晓柯