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张秀明
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1
被引量:7
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浙江大学医学院附属第一医院
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
姚根有
浙江大学医学院附属第一医院
王玲玲
浙江大学医学院附属第一医院
王洁心
浙江大学医学院附属第一医院
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浙江大学医学院附属第一医院
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浙江大学医学院附属第一医院
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2010
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Notch信号转导对小细胞肺癌的调控及其机制研究
被引量:7
2010年
目的探讨Notch信号转导对小细胞肺癌的调控作用及可能机制。方法应用重组质粒转染的方法,在小细胞肺癌细胞株NCI—H446中表达组成性活化的Notch1(NIC转染组),同时设立转染空质粒组和未转染组作为对照组,待筛选出稳定细胞株后,以MTT法检测细胞活力,应用半定量RT—PCR技术测定Notch1及其下游基因(HES1和hASH1)表达,并应用免疫细胞化学标记和Westernblot技术对神经内分泌标志物嗜铬粒素A(CgA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达行半定量[阳性单位(PU)值]分析。结果未转染组和转染空质粒组Notch1及其下游基因HES1表达不明显,而hASH1表达显著,转染组细胞Notch1及HES1表达升高,同时伴有hASH1表达明显降低。与两对照组比较,转染组细胞增殖速度显著降低,连续6d测得的吸光度(4)值均小于未转染组和转染空质粒组(均P〈0.05)。免疫细胞化学染色显示,NIC转染组、转染空质粒组、未转染组的CgA染色的PU值分别为8.81±0.77、38.10±1.55、38.97±0.80,NSE染色的PU值分别为7.21±0.59、28.25±1.46、30.57±1.31,NIC转染组CgA和NSE的PU值均小于转染空质粒组和未转染组(均P〈0.01)。Westernblot检测结果中,将未转染组的条带灰度值设为1.00,NIC转染组、转染空质粒组的CgA条带灰度值分别为0.54±0.03、0.99±0.05,NSE条带灰度值分别为0.43±0.02、1.07±0.09,NIC转染组CgA和NSE条带的灰度值均小于转染空质粒组和未转染组(均P〈0.01)。结论Notch信号途径对小细胞肺癌的调控可能是通过靶基因HES1对分化效应基因hASH1的转录抑制来实现的;Notch信号途径可以抑制小细胞肺癌细胞的增殖,降低其神经内分泌标志物的表达。
张秀明
王洁心
雷小光
程慧
王玲玲
姚根有
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肺肿瘤
小细胞
受体
NOTCH
肿瘤细胞
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