张佳
- 作品数：15 被引量：42H指数：4
- 供职机构：华北制药集团新药研究开发有限责任公司更多>>
- 发文基金：微生物药物技术创新与新药创制产学研联盟国家科技攻关计划国家技术创新计划更多>>
- 相关领域：生物学化学工程轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 等离子体-紫外复合诱变选育四羟基环孢菌素衍生物高产菌株被引量：8
- 2014年
- 筛选可体内转化合成环孢菌素衍生物([γ-HyMeLeu4]CyA)的高产菌株。以稀有放线菌Nonomuraea dietziae为出发菌株,采用常温常压等离子体射流和紫外照射对其进行复合物理诱变。通过该诱变方法获得了具有稳定遗传性能的菌株,其转化效率比出发菌株提高了32%左右。结果表明,等离子体诱变可有效的用于该稀有放线菌,通过等离子体-紫外复合诱变筛选得到的突变菌株可用于工业生产。
- 章丽戴梦郑桂珍赵颖刘静张佳王富强
- 关键词：紫外复合诱变
- 丝状真菌的DNA转化方法被引量：10
- 2007年
- DNA遗传转化是人们进行菌种改良、有用基因克隆或基因功能研究的重要途径。丝状真菌的DNA转化方法有CaCl2/PEG介导的原生质体的转化、基因枪转化、电穿孔转化、限制酶介导(REMI)的转化、根癌农杆菌介导(ATMT)的转化等几种方法。
- 苏彩云靳发彬张佳丰枚枚张春珍王红怡代明伟
- 关键词：丝状真菌DNA
- 工业用产黄青霉菌基因组的RAPD多态性研究被引量：1
- 2013年
- 为寻找高产菌株的分子标记,尝试利用RAPD(random amplified polymorphic DNA)技术,对青霉素生产菌株进行基因组多态性分析,分别以9株不同产量的产黄青霉菌基因组DNA为模版,筛选引物23条,并且对一条高产菌株特异条带进行了克隆与杂交验证.
- 刘静戴梦章丽赵颖张佳王富强
- 关键词：产黄青霉RAPD基因组多态性
- 丝状真菌产黄青霉DNA提取方法的改进被引量：4
- 2010年
- 为探索提取产黄青霉基因组DNA的简便方法,采用起始菌体量0.2 g,10 g/L十六烷基三甲基溴化铵裂解液,通过液氮/65℃反复冻融对菌种破壁,代替了液氮研磨,且不需要玻璃珠,操作简便,重复性好,提取的DNA质量高,极大地方便了后续基因操作.
- 赵颖刘静戴梦郑桂珍章丽张佳王富强
- 关键词：十六烷基三甲基溴化铵
- 霉酚酸产生菌原生质体转基因方法的建立被引量：4
- 2013年
- 【目的】建立霉酚酸产生菌短密青霉菌的遗传转化体系。【方法】以腐草霉素抗性为选择标记,利用聚乙二醇介导原生质体融合,进行外源基因转化。【结果】聚乙二醇介导的短密青霉菌原生质体转化效率为每微克DNA 2-3个转化子;转化子的PCR检测结果显示外源基因已经整合到短密青霉菌基因组中,转化子抗性稳定。【结论】霉酚酸产生菌短密青霉菌转基因体系的建立为该菌进行分子生物学研究以及基因工程育种奠定了基础。
- 任志红苏彩云闫敬戴梦赵颍王红怡代明伟张佳
- 关键词：霉酚酸原生质体基因转化
- 产黄青霉原生质体融合及融合子初步分析
- 2014年
- 目的以青霉素工业生产菌株产黄青霉为研究对象,对丝状真菌原生质体融合及其融合子进行了初步的研究。方法通过紫外线诱变和基因转化筛选出具有不同遗传标记的2株亲本菌株,对供体亲本菌株原生质体热灭活后进行原生质体融合,并对融合子进行了分离及传代分离。结果在选择性培养基上筛选到5株融合子,融合率为2.97×10-5,融合子分离和传代分离后产生亲本菌株分离子和异核体。结论 5株融合子均为异核体,在自然条件下融合子很难形成杂合二倍体和重组子。
- 任志红张佳闫敬赵颖戴梦王红怡代明伟张志江
- 关键词：产黄青霉原生质体融合融合子
- 环孢菌素A生产菌原生质体转化系统的建立被引量：2
- 2013年
- 以腐草霉素抗性为选择标记,建立了环孢菌素A生产菌株的基因转化体系,成功将外源基因转入环孢菌素A生产菌,并整合到染色体上。传代实验表明,外源基因可以稳定表达。该体系的建立为环孢菌素A生产菌的基因工程育种奠定了基础。
- 戴梦刘静赵颖张佳章丽郑桂珍
- 关键词：环孢菌素A原生质体转化
- 四羟基环孢菌素衍生物转化菌株发酵条件优化被引量：2
- 2014年
- 目的对四羟基环孢菌素衍生物([γ-HyMeLeu4]CyA)转化菌Nonomuraea dietziae的发酵条件进行优化。方法采用均匀设计对发酵培养基进行优化,考察糊精、黄豆饼粉、葡萄糖、酵母粉和蛋白胨对发酵单位的影响,同时对底物环孢菌素A的添加时间、添加量和发酵培养时间进行了摸索。结果得到了最优培养基配方为:糊精1.2%、葡萄糖3.0%、酵母粉0.9%、蛋白胨0.5%、黄豆饼粉1.5%;底物添加最佳时间是36h,添加量是400μg/mL,最佳放瓶时间是96h。在优化后的培养条件下,[γ-HyMeLeu4]CyA的产量提高了63%左右。结论优化后的发酵条件更适合转化菌的生长,有利于目的产物产量的提高,该发酵条件的优化为[γ-HyMeLeu4]CyA的工业化生产奠定了基础。
- 章丽戴梦郑桂珍赵颖刘静张佳王富强
- 关键词：发酵条件优化均匀设计
- 新的产黄青霉苯乙酰辅酶A连接酶基因及提高青霉素产量的方法
- 本发明涉及分离的来自产黄青霉的新的苯乙酰辅酶A连接酶基因(pclB)、其氨基酸序列和表达载体，并证明了该基因的表达受苯乙酸的诱导，进而构建了含有本发明新基因的表达载体和产黄青霉工程菌菌株，该转基因菌株的青霉素产量明显提高...
- 王富强刘静戴梦任志红韦春玲张佳赵颖代明伟贾茜贺建功
- 文献传递
- 新的产黄青霉苯乙酰辅酶A连接酶基因及提高青霉素产量的方法
- 本发明涉及分离的来自产黄青霉的新的苯乙酰辅酶A连接酶基因(pclB)、其氨基酸序列和表达载体，并证明了该基因的表达受苯乙酸的诱导，进而构建了含有本发明新基因的表达载体和产黄青霉工程菌菌株，该转基因菌株的青霉素产量明显提高...
- 王富强刘静戴梦任志红韦春玲张佳赵颖代明伟贾茜贺建功
- 文献传递
