廖志红
- 作品数：18 被引量：43H指数：4
- 供职机构：广西医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金广西青年科学基金广西医科大学博士启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 利用CRISPR-Cas9技术敲除MAS1基因的质粒构建与酶切方案优化的研究
- 2019年
- CRISPR-CAS9技术是新一代基因编辑技术,可简便快捷地对哺乳动物细胞进行指定基因的敲除,实现沉默外源基因表达的目的。但传统的CRISPR-CAS9技术提供的酶切方案没有特异性,致使酶切效率不稳定,影响胶回收率以及后续实验。本实验通过改变酶切体系大小,以及酶切反应时间,继而通过胶回收率及测序检测的方法验证最佳酶切条件,最后通过荧光定量PCR和Western blotting实验检测目的基因的表达量,确认是否成功敲除目的基因。研究结果说明:BbsⅠ酶与px459质粒比值为1μL:500 ng,酶切体系为50μL,酶切时间为45 min时,酶切效果最佳、胶回收率最高,且此时目的基因在细胞内的表达量为0,确定该实验条件下目的基因被成功敲除。
- 孙芳廖维芳廖维芳赵瑞强张洋洋廖志红赵瑞强
- “雨课堂”和 “微助教”在生物化学与分子生物学教学中的应用
- 2024年
- “雨课堂”和“微助教”的应用能够给高校生物化学和分子生物学教学带来新的变革.首先,它们强化了教学资源建设,提供了丰富的预习资料和习题,进一步改善了高校学生的学习效果.其次,通过互动功能和数据统计,教师可以把握课堂教学节奏,促进学生积极参与,并及时答疑解惑.最后,高校教师还可以利用以上两个软件设计教学内容,引导学生的学习过程,提高教学质量.总体而言,应用“雨课堂”和“微助教”,可以推动生物化学与分子生物学教学的创新和发展,提升学生的学习成效和教师的教学效能.基于此,本文对“雨课堂”和“微助教”的应用进行了研究和分析.
- 廖志红韦雅肖
- 关键词：生物化学与分子生物学
- Ⅱ相代谢酶基因多态性联合烟酒习惯对肝癌易感性的影响被引量：4
- 2007年
- 目的探讨Ⅱ相代谢酶（GSTM1、EPHX1）基因多态性和烟酒习惯及其相互作用与肝癌的关系。方法采用多重PCR、PCR-RFLP对广西地区105例肝癌患者及151例健康对照的GSTM1、EPHX1基因型进行检测，并调查研究对象的烟酒习惯。结果GSTM1缺失基因型频率在病例组与对照组中分别为64．76％和50．99％（P〈0．05）；EPHX1Tyr／Tyr、Tyr／His、His／His三种基因型频率在病例组分别为27．62％、21．90％和50．48％，对照组则分别为21．19％、34．44％和44．37％，两组间无差异。GSTM1缺失基因型与吸烟、饮酒因素在肝癌的发生中有交互作用，OR分别为3．13（95％CI：1．48—6．61）和4．27（95％CI：1．82—10．02）；吸烟者EPHX1基因型为His／His的个体发生肝癌的危险性增加，其OR为2．99（95％CI：1．29—6．91）。结论GSTM1是肝癌的遗传易感因素，Ⅱ相代谢酶基因多态和烟酒习惯的联合在肝癌的发生中起交互作用。
- 贺菽嘉顾永耀廖志红
- 关键词：肝癌谷胱甘肽硫转移酶M1微粒体环氧化物水解酶多态性
- pUHD10-3-p53质粒的扩增及分离纯化被引量：1
- 2006年
- 目的:建立一种确实有效的pUHD10-3-p53质粒提取方法,为科学研究制备高纯度pUHD10-3-p53质粒奠定基础。方法:将克隆有Wt-p53基因的cDNA质粒(pUHD10-3-p53)转染感受态细菌E.coli DH5a菌株。经扩增,用小量碱裂解法提取质粒DNA,再纯化后,用紫外分光光度计测定其含量,并进行酶切电泳鉴定。结果:pUHD10-3-p53质粒用限制性内切酶BamH I酶切后在1.5%琼脂糖凝胶中电泳,可观察到3.15、1.8 kb两条区带。结论:用小量碱裂解法提取pUHD10-3-p53质粒,效率高,质量稳定,得到的质粒DNA的质量与纯度均符合实验要求。
- 廖志红赖祥进曹林枝黄文君
- 关键词：纯化酶切
- 野生型p53基因与双脱水二乙酰卫矛醇联合诱导肝癌HLE细胞凋亡的研究被引量：9
- 2004年
- 背景和目的:p53基因是抑癌基因,研究发现在人类肿瘤中p53基因常发生突变。实验证明野生型p53基因不但抑制肿瘤细胞增殖,而且诱导肿瘤细胞凋亡。但是,单独应用野生型p53基因诱导肿瘤细胞凋亡的作用不很明显。因此,野生型p53基因与药物的联合作用来提高肿瘤细胞凋亡率是目前对肿瘤研究的一新领域。本实验通过转染野生型p53基因联合双脱水二乙酰卫矛醇(1,2:5,6-dianhydro-3,4-diacetylgalactitol,DADAG)作用于肝癌细胞株HLE,研究联合诱导肿瘤细胞的凋亡作用。方法:野生型p53基因通过脂质体Lipofectamine介导转染人肝癌细胞株HLE,同时加入DADAG。96h后,用流式细胞仪、DNA电泳方法进行细胞凋亡分析。结果:流式细胞仪分析细胞凋亡结果:阴性对照组为1.4%、转染pUHD10-3组为3.5%、DADAG处理组为32.6%、转染pUHD10-3-p53组为43.4%、转染p53基因及DADAG处理组为74.6%。DNA电泳发现,转染p53基因及DADAG处理组有到DNA梯形条带。结论:野生型p53基因与DADAG均可诱导人肝癌细胞HLE发生凋亡,转染野生型p53基因与DADAG联合作用,有促进肝癌细胞凋亡的作用。
- 赖祥进曹林枝周瑛蓝秀万廖志红周素芳
- 关键词：野生型P53基因转染HLE肿瘤细胞凋亡肝癌电泳
- 抗原血清学识别重组表达克隆技术的优化
- 2012年
- 背景:抗原血清学识别重组表达克隆技术的应用有许多报道,但存在假阳性较高、稳定性欠佳等诸多问题。目的:优化抗原血清学识别重组表达克隆技术,建立灵敏且稳定的技术体系。方法:利用抗原血清学识别重组表达克隆技术,比较血清的处理方法、异丙基-β-D硫代半乳糖苷的加入方式、不同的封闭条件及培养基厚度对显色结果的影响,观察噬菌斑显色深浅、背景处理及假阳性的产生。结果与结论:直接法预处理血清、异丙基-β-D硫代半乳糖苷浸泡硝酸纤维素膜并干燥结合脱脂奶粉进行封闭,显色效果最佳。此外选择适当的培养基厚度可有效消除边缘效应。提示血清预处理、异丙基-β-D硫代半乳糖苷的加入方式、不同封闭条件及培养基厚度等因素,在利用抗原血清学识别的重组表达克隆技术进行抗原筛选中起关键作用。
- 乔玉莉张鹏苏家光陈志坚周素芳廖志红林文珍
- 关键词：抗原CDNA文库噬菌体
- 二乙酰去水卫矛醇对胃癌细胞系HGC27生长和凋亡的影响被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨二乙酰去水卫矛醇(DADAG)对胃癌细胞系HGC27生长的影响。方法:在培养的人胃癌细胞系HGC27中,加入DADAG作用24、48、72、96h后,用MTT法检测细胞生长情况,用BECKMAN COULTER流式细胞分析仪检测细胞的凋亡百分率。结果:DADAG对胃癌细胞系HGC27的半数抑制浓度(IC50)为6.29mg/L。加入浓度为8.0mg/L的DADAG,24、48、72、96h时HGC27细胞的生长抑制率分别为31.58%、43.04%、49.51%和63.91%;凋亡率分别为22.553%、29.331%、33.237%、35.117%。结论:DADAG在体外具有明显的抑制胃癌细胞系HGC27生长的作用。
- 曹林枝滕少康廖志红
- 关键词：胃癌
- 二乙酰去水卫矛醇联合野生型p53基因诱导肝癌BEL-7404细胞凋亡的作用被引量：1
- 2005年
- 目的 实验通过转染野生型p53基因与应用二乙酰去水卫矛醇(1，2：5，6-Dianhydro-3，4-diacetylgalactitol，DADAG)联合作用于肝癌BEL-7404细胞，来研究p53基因联合二乙酰去水卫矛醇诱导肝癌BEL-7404细胞的凋亡作用。方法野生型p53基因通过脂质体Lipofectamine介导转染人肝癌BEL-7404细胞，同时加入DADAG作用。96h后，用流式细胞仪进行细胞凋亡分析。结果流式细胞仪分析细胞凋亡结果：阴性对照组为1．6％、转染pUHD10-3组为3．9％、用DADAG处理组为29.4％、转染pUHD10-3-p53组为35.3％、转染p53基因及用DADAG处理组为59．8％。结论野生型p53基因与DADAG均可诱导人肝癌BEL-7404细胞发生凋亡，转染野生型p53基因与DADAG联合作用，有促进肝癌BEL-7404细胞凋亡的作用。
- 赖祥进曹林枝周瑛廖志红
- 关键词：细胞凋亡BEL-7404细胞LIPOFECTAMINE野生型P53基因流式细胞仪分析
- 野生型p53基因诱导人肝癌细胞系HuH-7凋亡的研究被引量：3
- 2005年
- 目的 通过转染野生型p5 3基因作用于肝癌细胞株HuH -7,来研究其诱导肿瘤细胞的凋亡作用。方法 野生型p5 3基因通过脂质体Lipofectamine介导转染人肝癌细胞系HuH 7,96h后,用流式细胞仪进行细胞凋亡分析。结果 流式细胞仪分析细胞凋亡结果:阴性对照组为2 . 8%、转染pUHD 10 3组为4 .1%、转染pUHD- 10 - 3 p5 3组为39. 6 %。结论 野生型p5 3基因可诱导人肝癌细胞系HuH 7发生凋亡。
- 赖祥进曹林枝廖志红翁国庆
- 关键词：肝癌P53基因凋亡
- 双脱水二乙酰卫矛醇对3种肝癌细胞生长的影响被引量：4
- 2007年
- 目的:探讨双脱水二乙酰卫矛醇(DADAG)对3种人肝癌细胞生长的影响。方法:在培养的人肝癌细胞HLE、BEL-7404和SMMC-7721中,加入DADAG作用1、2、3、4d后,用MTT法检测细胞生长情况。结果:DADAG对不同肝癌细胞其半数抑制浓度(IC50)不同,HLE为5.39mg/L;BEL-7404为7.49mg/L;SMMC-7721为14.30mg/L。加入浓度为8.0mg/L的DADAG作用4d后,HLE的生长抑制率分别为31.48%、16.05%、34.86%和48.20%;BEL-7404的生长抑制率分别为26.32%、25.88%、17.86%和29.40%;而加入浓度为16.7mg/L的DADAG作用4d后,SMMC-7721的生长抑制率分别为23.81%、36.62%、33.15%和50.83%。镜下可见药物作用后细胞形态变圆、固缩等现象。结论:DADAG在体外具有明显的抑制肝癌细胞生长的作用。
- 曹林枝滕少康廖志红赖祥进
- 关键词：肝癌
