左洪亮
- 作品数：14 被引量：30H指数：4
- 供职机构：华南农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目霍英东青年教师基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 甜菜夜蛾铁硫亚基蛋白免疫印迹研究及功能鉴定
- 铁硫亚基蛋白(Rieske iron sulfur protein，RISP)是生物体呼吸链中重要的电子传递载体，是构成呼吸链复合物Ⅲ关键亚基蛋白之一。RISP在呼吸链电子传递过程中，负责将电子从还原型辅酶Q传递给细胞色...
- 左洪亮
- 关键词：甜菜夜蛾基因克隆原核表达免疫印迹RNA干扰
- 昆虫microRNAs功能研究进展
- microRNAs是小分子非编码的调控RNA,被认为是基因表达转录后水平上的潜在调控者。在黑腹果蝇中,microRNAs已被证实能够在各个阶段调控多个器官组织的发生和发育,如细胞凋亡、生殖干细胞分化和胚胎形成、信号转导、...
- 李海怡高璐左洪亮钟国华
- 关键词：MICRORNA昆虫
- 文献传递
- 甜菜夜蛾过氧化氢酶cDNA序列克隆、序列分析和表达特征被引量：4
- 2011年
- 过氧化氢酶(catalase,CAT)作为生物体内的重要物质,其主要功能是参与活性氧代谢过程,在清除H2O2、超氧自由基和过氧化物以及阻止羟基自由基形成等方面发挥着重要作用。本研究利用RT-PCR技术和RACE方法首次克隆和分析了甜菜夜蛾Spodoptera exigua(Hübner)CAT基因,命名为SexiCAT,GenBank登录号为JN051294,其cNDA序列全长为1755bp,开放阅读框长1524bp,推测编码507个氨基酸。经氨基酸序列比对,此多肽序列具有高度保守性,与其他昆虫CAT的序列一致性分别为:家蚕Bombyxmori(87%)、黑腹果蝇Drosophila melanogaster(73%)、埃及伊蚊Aedes aegypti(71%)和赤拟谷盗Tribolium castaneum(70%)。对该基因在甜菜夜蛾各个发育时期以及不同组织表达量的荧光定量PCR分析表明,SexiCAT基因在甜菜夜蛾各个发育阶段的表达水平存在显著差异,其中成虫期的表达量最高,是卵期表达量的7倍,幼虫期次之,卵期最低;SexiCAT基因在5龄幼虫体壁、中肠、脂肪体和马氏管组织中都有表达,但在脂肪体中表达量最高。甜菜夜蛾SexiCAT基因的成功克隆及同源建模将为今后对其功能研究以及作为靶标设计新型氧化酶抑制剂提供了基础。
- 胡振左洪亮李亚楠黄劲飞胡美英
- 关键词：甜菜夜蛾过氧化氢酶基因克隆同源建模表达谱
- 果蝇卵巢生殖干细胞BMP信号通路新进展
- BMP是迄今果蝇卵巢生殖干细胞(GSCs)研究最成熟的信号途径。以往的研究多数局限在BMP的两个配基体细胞Dpp和gbb产生的短距离细胞信号,及bam信号对GSCs自我更新和分化的影响。随着对BMP信号通路研究的深入,发...
- 高璐左洪亮李海怡钟国华
- 关键词：果蝇卵巢BMP
- 文献传递
- 苄嘧磺隆与丁草胺复配药肥对水稻抛秧田杂草的防除作用被引量：5
- 2011年
- 水稻抛秧田杂草危害重,生产实践迫切需要大量高效、广谱、经济、安全的抛秧田除草剂。复配药肥0.64%苄嘧磺隆.丁草胺颗粒剂可有效防除水稻抛秧田1年生杂草,以每667 m^2制剂用量5 000-12 000 g（有效成分32-76.8 g）施用后45 d内对各类目标杂草的株防效和鲜重防效均可达80%以上,整体防除效果良好,与10%苄嘧磺隆可湿性粉剂和50%丁草胺乳油单用相比,扩宽了杀草谱,提高了防效,减少了施肥量和劳动量,可选用防除南方水稻抛秧田杂草。
- 李海怡高璐左洪亮钟国华
- 关键词：水稻抛秧田杂草药肥
- 二甲四氯钠与莠灭净混用防除甘蔗田杂草的田间效果被引量：14
- 2010年
- 田间试验证明,48%二甲四氯钠·莠去净WP对甘蔗田杂草具有良好的防除效果。以剂量3000～7500g/hm2处理甘蔗田各类杂草,药后45d的株防效为88.26%～96.98%,鲜重防效为84.64%～97.91%,药后60d的株防效为82.00%～91.00%,鲜重防效为86.00%～98.00%。与56%二甲四氯钠WP和80%莠灭净WP单用相比,48%二甲四氯钠·莠去净WP扩宽了杀草谱,提高了防效,整体控制效果良好,对甘蔗安全。
- 左洪亮曾勇高璐李海怡钟国华
- 关键词：莠灭净甘蔗杂草防效
- RNAi作用机制及其在害虫防治领域的应用前景
- A干扰(RNA interference,RNAi)是近几年得到迅速发展的一项抑制基因表达的技术.RNAi能够切割特定信使RNA引起转录后基因沉默,从而抑制特定基因的表达,成为基因功能研究的新方法.近年来,RNAi导入方...
- 左洪亮李海怡高璐钟国华
- 关键词：植物保护害虫防治基因沉默
- 斜纹夜蛾蜕皮响应基因E75D的克隆、原核表达分析及microRNA作用位点预测被引量：3
- 2012年
- E75是昆虫蜕皮级联反应中的早期转录因子之一。本研究运用RT-PCR和RACE技术,首次获得了斜纹夜蛾Spodoptera lituraE75D基因,命名为Sli-E75D(GenBank登录号:JQ266225),其开放阅读框全长1836bp,编码611个氨基酸残基,3'非翻译区全长为358bp,同时获得其5'非翻译区共341bp。经核苷酸序列比对分析,E75在鳞翅目昆虫间保守性较高,尤其3'非翻译区具有高保守性,但由于启动子不同,E75异构体mRNA5'端序列存在差异;经氨基酸序列比对,Sli-E75D与棉贪夜蛾Spodoptera littoralis、烟草天蛾Manduca sexta、家蚕Bombyx mori E75D的一致性分别为98.4%,79.3%和76.5%。基于E753'非翻译区的高保守性,利用PITA和RNAhybird程序预测了最有可能调控鳞翅目昆虫E75基因的3种miRNAs:miR-14,miR-33和miR-87。构建pET28a-Sli-E75D表达载体,分别转化BL21(DE3)和Transetta(DE3)菌株,检测大肠杆菌Escherichia coli稀有密码子对E75D原核表达的影响,SDS-PAGE结果显示,转化Transetta(DE3)菌株的pET28a-Sli-E75D可高效表达大小约74.79kD(含预测的67.19kDSli-E75D,7.6kDT7·Tag和His·Tag)的重组蛋白,与其理论分子质量基本吻合,而转化BL21(DE3)菌株的pET28a-Sli-E75D质粒只见微量重组蛋白表达。由于Transetta(DE3)菌株可补充大肠杆菌6种稀有密码子的tRNA,较BL21(DE3)更适合于E75D的外源表达。qPCR检测了斜纹夜蛾从末龄幼虫到成虫发育过程中各时间点Sli-E75的相对表达水平:Sli-E75在6龄幼虫期的表达量较低,从预蛹开始,表达量急剧升高,并在蛹中期达到最高峰,之后迅速下降,但成虫期表达水平又出现回升。这些结果有助于深入研究E75在昆虫蜕皮级联反应中的作用。
- 高璐左洪亮姜春来刘海远钟国华
- 关键词：斜纹夜蛾克隆MICRORNA
- 昆虫microRNAs功能研究进展
- croRNAs是小分子非编码的调控RNA,被认为是基因表达转录后水平上的潜在调控者.在黑腹果蝇中,microRNAs已被证实能够在各个阶段调控多个器官组织的发生和发育,如细胞凋亡、生殖干细胞分化和胚胎形成、信号转导、组织...
- 李海怡高璐左洪亮钟国华
- 关键词：昆虫学功能分析
- 斜纹夜蛾铁硫亚基蛋白的表达及功能鉴定
- 2012年
- 铁硫亚基蛋白(rieske iron-sulfur protein,RISP)是线粒体复合物Ⅲ的关键蛋白亚基之一,在呼吸链电子传递过程中起到重要作用。本研究通过RT-PCR克隆得到斜纹夜蛾Spodoptera litura RISP基因SlitRISP的ORF,构建了pET32a-SlitRISP原核表达载体,SDS-PAGE和Western blot检测结果显示,SlitRISP原核表达蛋白以包涵体的形式存在于菌体沉淀中,且RISP抗体可成功用于该蛋白的免疫印迹检测。为了进一步鉴定SlitRISP在斜纹夜蛾离体细胞系SL-1中的功能,通过向细胞内转染siRNA,利用RNAi技术沉默SL-1中的SlitRISP。qRT-PCR结果表明,分别经50nmol/L和100nmol/L siRNA处理48h后,SL-1中SlitRISP的表达均几乎完全被抑制;Western blot结果显示,SL-1中SlitRISP含量显著低于CK。当SL-1SlitRISP被成功沉默后,通过检测SL-1线粒体膜电位、细胞ATP含量和细胞增殖抑制率鉴定RISP在线粒体电子传递过程中的重要作用。流式细胞仪测定结果表明,经50nmol/L和100nmol/LsiRNA处理24h后,SL-1线粒体膜电位相对于CK分别降低23.52%和11.32%,而处理48h后,SL-1线粒体膜电位则分别升高5.58%和27.66%;siRNA处理24h和48h后,SL-1ATP含量相对于CK分别降低82.71%和84.50%,最终导致SL-1细胞增殖抑制率分别为53.64%和67.94%。这些结果表明SlitRISP在SL-1中参与线粒体膜电位的形成和细胞ATP的合成。介于RISP在线粒体电子传递链中的重要作用,其可能成为新型杀虫作用靶标,这可为研制新型呼吸抑制剂提供参考。
- 左洪亮陈永高璐刘海远钟国华
- 关键词：斜纹夜蛾原核表达蛋白功能
