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宣宁: 作品数：47 被引量：39H指数：4; 供职机构：山东省农业科学院更多>>; 发文基金：现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金国家自然科学基金山东省农业良种工程项目更多>>; 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程环境科学与工程更多>>

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与水稻紫色叶鞘QTL紧密连锁的SSR分子标记与应用: 本发明涉及与水稻紫色叶鞘QTL紧密连锁的SSR分子标记与应用。与水稻紫色叶鞘QTL紧密连锁的SSR分子标记PSH10，上游标记核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，下游标记核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。以及与...; 姚方印陈高柳絮张华宣宁杨永义; 文献传递

玉米锌指蛋白基因ZmAN14过表达转基因烟草对非生物胁迫的响应被引量：8: 2015年; 【目的】Zm AN14是玉米A20/AN1型锌指蛋白基因家族成员,该家族在水稻中广泛参与非生物胁迫应答。通过分析玉米旱21(H21)及转Zm AN14烟草在非生物胁迫下的表达情况,为玉米Zm AN14及其家族的功能和分子机制的全面解析提供新信息。【方法】通过对Zm AN14进行序列分析,发现其属于玉米A20/AN1型锌指蛋白基因家族。以玉米自交系H21为研究材料,在三叶期时对其进行非生物胁迫和ABA诱导处理,0、1、3、6、12和24 h时取整株样品,同时在玉米不同生长期取根、茎、叶、胚芽鞘、雌蕊、雄蕊、花丝、苞叶等不同组织样品,利用实时荧光定量PCR方法对Zm AN14的组织表达谱和非生物胁迫及ABA诱导的表达谱进行分析,并结合启动子区顺式作用元件分布情况进行对比分析。将Zm AN14编码序列克隆至GFP表达载体p MDC85,利用亚细胞定位技术验证Zm AN14在胞内的定位情况。将Zm AN14克隆至GAL4 DNA结合结构域载体,并转化酵母,将其涂布在缺陷培养基上观察酵母生长情况,分析其有无转录激活活性。将Zm AN14编码区与植物表达载体p1300-221连接构建超表达载体,并将其转入烟草,选择Zm AN14 m RNA表达量高的T2纯合体株系进行盐、干旱胁迫和ABA诱导,观察其对非生物胁迫的应答。【结果】序列分析表明,Zm AN14开放阅读框(ORF)为516 bp,编码一个171个氨基酸的蛋白,预测分子量为18.3 k D,等电点是8.28。Zm AN14具有A20和AN1结构域,属于玉米A20/AN1型锌指蛋白基因家族。实时定量荧光PCR结果表明Zm AN14在叶中大量表达,受Na Cl、干旱胁迫和ABA诱导上调。Zm AN14与GFP融合蛋白定位于细胞质和细胞核中,定位结果与ZNF216和Zm AN13类似,而Zm AN14本身并没有核定位信号,暗示Zm AN14与其他蛋白结合进入细胞核中发挥其生物学功能。Zm AN14在酵母中表达时不能在酵母缺陷培养基(SD/-Leu-His medium)上生长,因此,未发现其具有转录激活活性。将Zm; 宣宁柳絮张华陈高刘国霞边斐姚方印; 关键词：玉米锌指蛋白非生物胁迫转基因烟草

利用单片段代换系研究水稻抽穗期等位基因变异: 2021年; 为了研究水稻单片段代换系(Single segment substitution line,SSSL)与受体亲本HJX74(Huajingxian 74)抽穗期差异的原因,以HJX74和5个具有抽穗期差异显著性的SSSLs WY18(W06-15-18-3-11)、WY24(W08-16-3-2)、WY26(W11-15-7-1-1)、WY60(W15-3-1-38)、WY61(W17-10-5-5-35-9-2)为试验材料,对其代换片段上已知的抽穗期等位基因进行克隆,获取其CDS序列,用多种生物信息学方法进行序列比对,包括CDS序列、氨基酸序列,比较其氨基酸理化性质的异同及表达的差异。田间抽穗期表型性状调查结果表明,WY18、WY60、WY61相对于HJX74表现为晚抽穗,WY24、WY26表现为早抽穗。与HJX74相比,WY18代换片段上抽穗期等位基因DTH8存在4个SNP的差异、WY26中OsDof12存在7个SNP的差异、WY60 DTH8存在6个SNP的差异,但以上SNP的突变均未改变其氨基酸序列的亲水性及理化性质,表明这些抽穗期等位基因的突变可能并不是引起其抽穗期变化的原因。进一步通过qRT-PCR技术分析发现,WY18中DTH8、WY26中OsDof12的表达水平整体高于HJX74中的相应基因,表明该等位基因上游调节区域对其基因的表达进行了调控,可能是导致其抽穗期变异的原因。WY24中se14、WY61中Hd1存在明显的序列片段缺失,造成se14和Hd1等位基因功能缺失,可能是WY24、WY61抽穗期变异的主要原因。; 高瑞钰张华宣宁柳絮张浩张梦琦姚方印; 关键词：水稻抽穗期单片段代换系等位基因遗传分化

磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶基因过量表达对集胞藻PCC6803脂肪酸合成的影响: 2022年; 磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶(phosphopantetheinyl transferases,PPTase)是细菌脂肪酸合成中的关键酶。本研究利用同源重组手段构建集胞藻PCC6803 PPTase基因(slr0495)过量表达重组质粒,在集胞藻PCC6803中进行表达研究,并在DNA和RNA水平进行验证,同时利用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)检测不同条件下突变藻株脂肪酸组分及含量。结果表明:在温度为30℃、光照强度为50μmol·m^(-2)·s^(-1)的培养条件下,过量表达slr0495基因突变藻株中C12:0、C16:0和C18:0的含量分别为1.31 mg·g^(-1)、8.07 mg·g^(-1)和1.35 mg·g^(-1),比野生型藻株分别提高了23.58%、25.31%和13.45%;在温度为20℃、光照强度为50μmol·m^(-2)·s^(-1)、50%NaNO_(3)的培养条件下,与野生型相比,突变藻株中C16:0和C18:0含量分别提高了44.71%和41.51%。以上结果表明,过量表达slr0495基因增加了集胞藻PCC6803中长链饱和脂肪酸的含量,并且在低温(20℃)和缺氮(50%NaNO_(3))双重胁迫培养条件下中长链饱和脂肪酸含量得到进一步提高。本研究为探究slr0495基因功能以及在逆境中基因产生的应激反应提供了理论依据,为微藻高产多不饱和脂肪酸代谢研究奠定了基础。; 李燕乐钟怀荣宣宁张燕陈高季祥; 关键词：集胞藻PCC6803 脂肪酸同源重组

花生AhDGAT2a基因启动子的克隆和功能验证被引量：7: 2016年; 二酰甘油酰基转移酶(DGAT)是三酰甘油(TAG)合成途径的限速酶,对脂肪酸合成的调节具有关键作用。为了研究AhDGAT2a的表达调控,利用Genome Walking方法从鲁花14基因组中克隆了AhDGAT2a上游5￠侧翼调控区1200 bp序列,即AhDGAT2a启动子(pAhDGAT2a)序列,并利用生物信息学软件分析其包含的调控元件,发现其含有多个TATA-box和CAAT-box、光调控元件、胁迫防御相关元件和激素响应元件。用pAhDGAT2a构建pAhDGAT2a:GUS植物表达载体并转化烟草品种SR1。利用组织染色法鉴定转基因烟草的GUS表达模式,发现在转基因烟草的各个器官均有GUS酶活,在柱头、花药和幼嫩种子中表达量较高,说明pAhDGAT2a具有一定的组成型启动子活性。; 郑玲史灵敏田海莹单雷边斐郭峰宣宁万书波彭振英; 关键词：花生启动子

基于单片段代换系的水稻抽穗期QTL上位性互作分析被引量：1: 2015年; 抽穗期是水稻(Oryza sativa)重要的农艺性状,它决定着水稻品种的地区和季节适应性。本试验利用以华粳籼74为受体亲本发展的带有抽穗期基因的15个单片段代换系为试验材料,通过两两杂交,筛选出15个不同亲本组合的双片段聚合系,结合分子标记辅助选择进行水稻抽穗期QTL鉴定,并研究QTL的聚合及其互作关系。; 刘书旖张华柳絮宣宁杨永义李军李广贤姚方印; 关键词：水稻单片段代换系

水稻抽穗期基因Hd7m的定位及遗传分析被引量：3: 2015年; 以红旗16为受体、明恢63为供体,经杂交和回交得到BC4F1。利用643对SSR分子标记对所构建的抽穗期基因早晚池和亲本进行多态性筛选,得到4对多态性标记。将筛选出的杂合单株进行自交,获得BC4F2,并从中筛选出抽穗期分离较明显的群体进行田间表型调查和基因型检测。发现目标基因与标记PSM391连锁,位于第7染色体长臂末端,命名为Hd7m。在标记PSM391与第7染色体末端之间合成10对新SSR标记,其中多态性标记RM22156与目标基因相距4.1 c M。该结果为Hd7m基因的精细定位、基因克隆和分子标记辅助育种奠定了基础。; 曾莲张华柳絮宣宁李军李广贤杨永义姚方印刘开启; 关键词：水稻抽穗期基因定位 SSR标记

水稻抽穗期基因DTH6‑1及其应用: 本发明公开了水稻抽穗期基因DTH6‑1及其应用。水稻抽穗期基因DTH6‑1，一个来自受体亲本圣稻16，一个来自其导入系；圣稻16的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；其导入系的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示；...; 姚方印刘书旖张华柳絮曾莲宣宁杨永义丁汉凤; 文献传递

水稻抽穗期基因DTH10‑1及其应用: 本发明公开了水稻抽穗期基因DTH10‑1及其应用。水稻抽穗期基因DTH10‑1，一个来自受体亲本圣稻16，一个来自其导入系；圣稻16的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；其导入系的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所...; 姚方印曾莲张华柳絮宣宁刘书旖丁汉凤杨永义; 文献传递

与水稻高杆QTL紧密连锁的SSR分子标记与应用: 本发明涉及与水稻高杆QTL紧密连锁的SSR分子标记与应用。与水稻高杆QTL紧密连锁的SSR分子标记L06，上游标记核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，下游标记核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。以及与水稻高杆QT...; 姚方印陈高张华柳絮宣宁杨永义; 文献传递

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