孟凡华
- 作品数：30 被引量：43H指数：4
- 供职机构：内蒙古农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：内蒙古自治区自然科学基金国家科技重大专项内蒙古自治区高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学文化科学医药卫生更多>>
- Sox2基因真核表达载体的构建及转Sox2基因绵羊骨髓间充质干细胞系的建立被引量：2
- 2016年
- Sox2是多能干细胞的主要标记之一,有研究发现高表达Sox2基因的神经干细胞作为供体细胞进行核移植时具有较高的重编程能力。本研究旨在通过对绵羊骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)Sox2基因进行外源性增强表达,以期提高其重编程能力,从而改善动物体细胞克隆效率。试验提取绵羊胎儿生殖腺组织RNA,以其为模板克隆Sox2基因cDNA序列,装入真核表达载体pEGFP-N1,构建出pEGFP-N1-Sox2表达载体。经脂质体转染将重组质粒转染入绵羊BMSC,经G418与荧光标记双筛选后挑选单克隆并扩增培养。测序鉴定表明,克隆得到绵羊Sox2基因CDS区全长,重组质粒构建成功;荧光检测表明,成功建立表达Sox2基因的绵羊BMSC系。本研究得到了高表达Sox2基因的绵羊BMSC系,为提高体细胞克隆过程中的重编程效率提供了新思路。
- 刘怀禹李浩天苏小虎孟凡华刘春霞张焱如曹俊伟
- 关键词：骨髓间充质干细胞重编程
- 阿拉善双峰驼ENaCα亚基基因克隆及激素对肾皮质细胞中该基因表达的影响被引量：1
- 2019年
- 为探究阿拉善双峰驼上皮细胞钠通道的作用特点,试验采用深圳华大公司提供的ENaCα亚基基因片段序列设计PCR引物,提取阿拉善双峰驼肾皮质总RNA,反转录合成cDNA,PCR扩增获得双峰驼ENaCα亚基基因,构建克隆质粒pMD19-T-ENaCα,对重组质粒进行双酶切和测序分析;采集双峰驼肾皮质部分,细胞体外培养到P3代后,加入不同浓度的醛固酮(aldosterone)和血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ),实时荧光定量PCR技术检测细胞中ENaCα亚基基因的表达情况,以确定ENaCα对两种激素浓度变化的敏感性。结果显示,PCR扩增得到2.2kb的特异性条带,SmaⅠ和PstⅠ双酶切得到2.2和2.7kb的条带,表明重组质粒pMD19-T-ENaCα构建成功。实时荧光定量PCR结果显示,1×10^(-9) mol/L醛固酮和血管紧张素Ⅱ处理的双峰驼肾皮质细胞的ENaCα表达量显著高于对照组(P<0.05);1×10^(-6)、1×10^(-7)和1×10^(-8) mol/L醛固酮和血管紧张素Ⅱ表达量显著低于对照组(P<0.05)。本研究结果为揭示双峰驼水盐代谢的生理机制提供了试验依据。
- 朱纯霄孙睿张焱如张东刘春霞孟凡华
- 关键词：阿拉善双峰驼上皮细胞钠通道醛固酮
- 一种阿拉善双峰驼的超数排卵方法
- 本发明涉及一种阿拉善双峰驼的超数排卵方法，属于动物生产技术领域。本发明确定了技术方案的实施日程、用药成分和剂量，制订了一套阿拉善双峰驼超数排卵程序，填补了国内双峰驼没有超排程序的空白，动物同期发情整齐，每只实验动物都对超...
- 张立张东刘羿羿周欢敏王申元李璐孟凡华王峰刘彩云王丙萍
- 文献传递
- 骨髓间充质干细胞为核供体的克隆绵羊的生产与鉴定
- 2016年
- 本研究旨在采用骨髓间充质干细胞(BMSCs)为核供体进行体细胞核移植,以获得成体干细胞克隆绵羊。选择幼体绵羊BMSCs为核供体,构建重构胚进行克隆胚胎移植,克隆绵羊诞生后,选取IASG上公布的绵羊10个微卫星标记位点,PCR扩增克隆羊、供体细胞及代孕母羊微卫星DNA,利用Quantity One软件进行基因分型,计算供体细胞与克隆羊之间的父子关系相对机会(RCP)值。结果显示,以幼体绵羊BMSCs为核供体,与去核成熟卵母细胞进行核移植,构建重构胚进行电融合,其融合率达80.62%,重构胚发育至桑椹胚阶段,经手术植入20只代孕母羊,获得克隆绵羊5只,成活3只。克隆羊基因型与供体细胞一致,供体细胞与克隆羊之间的RCP≥99.999%,证明克隆羊来自幼体绵羊BMSCs。本试验最终成功获得了首例以BMSCs为核供体的克隆绵羊。
- 郭园刘宗正刘乐孟凡华张焱如周欢敏刘春霞
- 关键词：骨髓间充质干细胞体细胞核移植克隆绵羊
- 药用植物学微课设计及教学应用初探
- 2017年
- 本研究根据制药专业药用植物学课时设置及教学目标,进行了微课的初步设计和实施探索,结果表明:微课教学模式相比于传统教学模式优化了教学内容,实现了教学方法和教具的多样化,教学过程的生动化,激发了学生学习该课程的兴趣和主动性;全方位、多角度、有重点的知识传送方式,提高了教学质量和效率,使学生夯实了基础知识,提高了实践能力,较好的实现了该课程的教学目的。
- 肖红梅肖旭宝力道孟凡华刘慧燕
- 关键词：药用植物学
- 鲫鱼尾鳍细胞培养及冻存与复苏的初步研究
- 2009年
- 本文主要从鱼类种质资源保存的目的出发,一方面以鲫鱼尾鳍组织为材料,进行细胞培养,并对所获得的原代和传代细胞进行形态学观察;另一方面以传代细胞为材料,采用逐步降温法和悬于液氮罐口两种方法冻存细胞,每种方法均以甘油和DMSO为冻存剂,通过计算复苏率,找到最适宜的冻存方法与冻存剂。实验结果:成功培养了鲫鱼尾鳍细胞,现已传至第7代;细胞在传代过程中呈成纤维细胞增多的趋势;采用逐步降温法和使用DMSO为冻存剂细胞复苏率较高。
- 孟凡华狄栋栋黄凯
- 关键词：鲫鱼尾鳍细胞培养冻存
- 一种新型高强度羊毛
- 本发明公开了一种新型高强度羊毛，属于生物工程技术领域。本发明利用转基因技术和胚胎移植的方法，制备了以毛囊特异表达载体表达拟蜘蛛牵丝蛋白基因的克隆羊。将蜘蛛丝与羊毛的优点相结合，得到了平均拉伸度增加1.6倍的蛛丝毛羊。利用...
- 孟凡华张东王申元周欢敏刘羿羿张焱如刘春霞曹俊伟张立邢燕平李璐
- 文献传递
- 基于皮肤组织转录组数据研究水牛与黄牛温度适应性的差异被引量：1
- 2017年
- 为了找到与水牛和黄牛温度适应性差异相关的信号通路,本研究对3头成年水牛和3头成年黄牛的皮肤组织进行了转录组测序和生物信息学分析。结果显示,测序后水牛和黄牛皮肤组织分别得到59 369 167和69 837 009条reads,与参考基因组的唯一比对率分别为70.76%和75.55%。水牛和黄牛皮肤组织共有1 611个差异表达基因,其中801个在水牛皮肤中上调,810个在水牛皮肤中下调。GO分析结果显示,注释到细胞组分、分子功能、生物学过程的差异表达基因分别为316、263和278个。KEGG分析结果显示,差异表达基因共富集在33条信号通路上,其中神经活性配体—受体相互作用、氧化磷酸化、胆碱能突触、5-羟色胺能神经突触、GABA能突触、钙信号通路等信号通路可能与水牛和黄牛在温度适应性上的差异相关。综上所述,突触与氧化磷酸化可能与水牛和黄牛之间的温度适应性差异有关,本研究为进一步了解水牛和黄牛对温度适应性差异的分子机制和分子育种奠定基础。
- 齐昱邢燕平潘静凌宇曹宇孟凡华荆文魁
- 关键词：转录组差异表达基因皮肤水牛黄牛
- 农业院校生物化学双语教学方法探索被引量：5
- 2018年
- 生物化学是高等院校重要的专业基础课和专业课,尤其是农林和医学院校。生物化学也是生命科学的重点前沿学科之一。在生命科学相关的各个领域都涉及到了生物化学的理论知识及其技术。为适应教学改革的发展和需要,本文以内蒙古农业大学为例对本科生的生物化学课程进行英汉双语教学的方法进行了探讨,总结了适合于普通农林院校本科学生的几点教学方法,并提出了生物化学双语教学进一步改革计划。
- 丛靖宇王志林王光霞刘扬孟凡华
- 关键词：农林院校生物化学双语教学
- 鲤鱼(cyprinuscarpio)体细胞核移植的初步研究被引量：2
- 2006年
- 以黑龙江野鲤的吻端和尾鳍组织为材料进行细胞体外培养，所得原代细胞进行传代，并以传至4～10代的尾鳍继代培养细胞作为供体，以同种鲤及鲫成熟具核未受精卵作为受体，采用显微注射方法进行移核，最终获得了发育至原肠胚期的胚胎．
- 尹洪滨孟凡华孙中武薛淑群石连玉
- 关键词：鲤鱼体细胞核移植
