孙静
- 作品数：7 被引量：7H指数：2
- 供职机构：中国科学院沈阳应用生态研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 超抗原SEA与抗黑色素瘤ScFv融合基因的构建及表达
- 2003年
- 采用酶切连接和重叠PCR连接两种方法将抗黑色素瘤单链抗体基因和去除N端信号肽的金黄色葡萄球菌肠毒素A基因进行融合 ,并将融合基因克隆于pET2 8 a表达载体上 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3)。用Ni NTA系统对表达产物进行分离、纯化。MTT法检测融合蛋白对黑色素瘤细胞的体外抑制率。结果表明 6His ScFv SEA融合蛋白可在E .coliBL2 1(DE3)中稳定表达 ,表达量占菌体蛋白的 30 % ,主要以包涵体的形式存在。融合蛋白可通过激活效应细胞对表达相关抗原的黑色素瘤细胞发挥抑制作用。
- 孙静吕安国吴文芳白向阳任秀宝刘虹
- 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素A靶向治疗
- 用改进的重叠PCR引入血管内皮生长因子基因突变被引量：4
- 2004年
- 血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的PCR产物克隆于T载体上 ,经转化JM1 0 9感受态菌株后 ,随机挑取 8个白斑菌落 ,混合后制成混合模板 .采用 3条引物 ,做两轮重叠PCR反应 ,获得了VEGF的突变基因 ,经PCR鉴定 ,酶切鉴定和测序分析表明所得基因为目的产物 .实践证明这种突变方法简单快速 。
- 白向阳吕安国吴文芳孙静牛瑞芳
- 关键词：点突变血管内皮生长因子重叠PCR基因突变
- SEA突变基因及其与ScFv基因的融合蛋白的应用
- 2005年
- 该发明专利涉及SEA突变基因及其与ScFv基因融合蛋白的应用，属于制药技术领域。
- 吴文芳孙静时成波吕安国
- 关键词：SEA突变基因融合蛋白制药技术
- 特异性结合血管内皮生长因子受体2的融合毒素
- 2005年
- 目的制备特异性结合血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2)的融合蛋白,阻断新生肿瘤血管内皮细胞和某些VEGFR-2阳性肿瘤细胞内的蛋白合成,引起细胞死亡。方法运用基因定点突变技术,制成VEGF D63A、E64A、E67A突变体。利用这个可以和VEGFR-2特异性结合的VEGF突变体,代替白喉毒素上的受体结合区,制成了特异性结合VEGFR-2的融合蛋白。结果以去除了受体结合区的DT391作为对照,以VEGFR-2阳性肿瘤细胞做实验,验证了这个融合毒素对VEGFR-2阳性细胞的选择性杀伤作用。结论制备了特异性杀伤血管内皮生长因子受体2阳性细胞的融合毒素。
- 白向阳吴静怡孙静马丁吕安国
- 关键词：白喉毒素血管内皮生长因子血管内皮生长因子受体
- 双特异性抗体N1M1及N2M2融合蛋白及其编码基因
- 本发明属于制药领域，具体的说是一种新型的抗CD16/抗黑色素瘤双特异性抗体N1M1及N2M2融合蛋白及其编码基因(在大肠杆菌中的表达和应用)。双特异性抗体N1M1融合蛋白，具有序列表SEQ ID No：4中氨基酸序列；其...
- 吴文芳倪剑锋孙静吕安国
- 文献传递
- 噬菌体呈现技术筛选抗黑色素瘤单链抗体被引量：3
- 2003年
- 目的 :制备黑色素瘤单抗的单链可变区片段 ,用于肿瘤的诊断或靶向治疗。方法 :从杂交瘤细胞提取总RNA,分别扩增出轻重链可变区基因(variableregionofheavychain,VH和variableregionoflightchain,VLDNA) ,连接形成单链抗体 (singlechainfragmentvariableregion,ScFv)DNA,将ScFv与载体pCANTAB5E的连接产物转化大肠杆菌TG1 ,经M13K07超感染后 ,获得噬菌体抗体ScFvcDNA文库 ,用黑色素瘤细胞LiBr对重组的噬菌体抗体进行3轮吸附 -洗脱 -扩增亲和筛选后 ,随机挑选克隆经ELISA筛选鉴定。结果:VH、VL和ScFv分别约为360、330、750bp,从随机筛检的30个克隆中获得10个高亲和性噬菌体呈现型ScFv单克隆。结论:用噬菌体呈现技术制备的黑色素瘤ScFv 。
- 孙静吕安国吴文芳白向阳任秀宝张斌
- 关键词：黑色素瘤单克隆抗体单链抗体噬菌体呈现
- 抗黑色素瘤ScFv-超抗原SEA重组免疫毒素的构建与表达
- 采用酶切连接和重叠PCR连接两种方法将抗黑色素瘤单链抗体基因和去除N端信号肽的金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因进行融合,并将融合基因克隆于pET28-a表达载体的His标签下游.SDS-PAGE分析表明,两种构建方法...
- 孙静
- 关键词：融合蛋白靶向治疗
