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孙红亚: 作品数：30 被引量：51H指数：5; 供职机构：扬州大学医学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省普通高校研究生科研创新计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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肉苁蓉多糖对衰老小鼠大脑神经元影响的形态学研究被引量：11: 2001年; 目的：探讨新疆肉苁蓉多糖对衰老小鼠大脑神经元形态学的影响。方法：120只小鼠分为对照组、模型组和给药组。应用组织化学方法和电子显微镜观察肉苁蓉多糖是臭氧造成衰老小鼠大脑皮质神经元的作用。结果：臭氧使小鼠大脑皮质神经元内单胺氧化酶（MAO－B）、乳酸脱氢酶（LDH）、脂褐素均有明显升高，电镜下血管基底膜增厚。给药组对小鼠大脑皮质神经元内MAO－B、LDH、脂褐素明显下降，尼氏小体、溶梅体增多，与对照组和模型组比较，差异非常显著（P＜0．01）。结论：从细胞水平证明了肉苁蓉多糖对衰老小鼠具有抗神经元损伤和延缓衰老的作用。; 王德俊孙红亚等; 关键词：肉苁蓉多糖神经元超微结构抗衰老动物试验

人外周血树突状细胞-乳腺癌细胞融合细胞被引量：5: 2003年; 目的:探讨树突状细胞-肿瘤细胞融合细胞的形态特性,为研制融合细胞疫苗提供形态学依据。方法:将免疫磁珠法分离的人外周血树突状细胞与人乳腺癌细胞株MCF7融合,瑞氏-姬姆萨染色观察;扫描电镜观察树突状细胞、融合细胞的表面超微结构。结果:树突状细胞与MCF7细胞接10:1比例融合后,一个乳腺癌细胞可以与一个或多个树突状细胞相融合;扫描电镜下可见分离的树突状细胞表面有突起,树突状细胞/MCF7融合细胞具两种亲代细胞的表面超微结构特点。结论:树突状细胞与人乳腺癌细胞融合后无明显的形态改变。; 伊焕发唐军民唐岩孙红亚甄昱戴燕秦屹; 关键词：乳腺癌细胞树突状细胞融合细胞免疫磁珠法扫描电镜

兔抗小鼠含SET结构域(赖氨酸甲基转移酶)8(Setd8)多克隆抗体制备和应用被引量：8: 2017年; 目的在大肠杆菌表达小鼠含SET结构域(赖氨酸甲基转移酶)8(Setd8)蛋白并制备兔抗Setd8多克隆抗体。方法将p GADT7-Setd8质粒和p ET-30a载体分别双酶切后连接、转化和鉴定,构建p ET-30a-Setd8原核表达质粒。将p ET-30a-Setd8质粒转化到E.coli BL21中,用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达,通过镍亲和层析柱进行蛋白纯化。应用纯化的Setd8蛋白免疫新西兰大白兔,获得Setd8多克隆抗体。利用ELISA、Western blot法及免疫组织化学染色法对所得多克隆抗体进行效价测定及特异性鉴定。结果应用限制性内切酶双酶切后电泳及序列测定法,成功构建的p ET-30a-Setd8重组质粒在大肠杆菌中IPTG诱导下能够高效表达重组Setd8蛋白。免疫获得的多克隆抗体经ELISA检测其抗体效价为1∶1 000 000,Western blot法结果显示制备的多克隆抗体能特异性识别细胞和组织中的Setd8蛋白,免疫组织化学染色法显示多克隆抗体识别的Setd8主要表达于成年小鼠睾丸组织中的精原细胞。结论成功获得较高纯度Setd8蛋白,制备的Setd8多克隆抗体具有较高反应性和特异性。; 马海涛郭佳倩夏静牛长敏申雪沂孙红亚郑英; 关键词：多克隆抗体

人BRDT-NY多克隆抗体的制备及其在消化道肿瘤中的表达检测: 2012年; 目的:构建人BRDT-NY原核表达载体,表达人BRDT-NY原核蛋白,制备其多克隆抗体,检测其在消化道肿瘤中的表达。方法:以质粒pTriplEx2-BRDT-NY为模板,用PCR法扩增人的BRDT-NY基因。将其克隆到原核表达质粒pET28a+中,构建重组质粒pET28a+-BRDT-NY。将该重组质粒转化BL21菌,以IPTG诱导原核蛋白的表达。应用纯化的原核蛋白免疫小鼠,制备多克隆抗体,ELISA测定滴度,并用免疫组织化学法分析该蛋白在消化道肿瘤组织中的表达。结果:成功构建了用于原核蛋白表达的重组质粒,在BL21菌中表达BRDT-NY重组蛋白,用亲和层析Ni柱进行纯化得到人BRDT-NY蛋白。用纯化的BRDT-NY蛋白免疫小鼠2个月后,得到相应的多克隆血清抗体,经ELISA检测,滴度均能达到1/10万。免疫组织化学染色显示BRDT-NY蛋白在消化道肿瘤中有较高的表达率。结论:该抗体的制备为进一步研究BRDT-NY在消化道肿瘤中的发病机制奠定了基础。; 丁卫民杨丽郑英孙红亚梁虹王建军; 关键词：多克隆抗体消化道肿瘤

亚硒酸钠对实验性胃癌大鼠垂体ACTH、GH和TSH细胞的影响: 2014年; 目的:观察亚硒酸钠在大鼠实验性胃癌发生过程中对垂体远侧部ACTH细胞、GH细胞和TSH细胞的免疫组织化学影响。方法:用断乳雄性Wistar大鼠62只,分正常对照组、N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)实验对照组、MNNG低硒组和MNNG高硒组。43周时取大鼠垂体和胃组织。用免疫组织化学ABC法显示垂体ACTH细胞、GH细胞和TSH细胞,结果进行图像分析。结果:MNNG实验对照组和加硒组均有数只大鼠胃浆膜面出现肿块,且光镜下显示为肠上皮化生,其中加硒组的肠化生率明显高于实验对照组(P<0.05)。图像分析结果显示,MNNG实验组、低硒组、高硒组大鼠垂体远侧部ACTH阳性细胞的平均光密度(MOD)分别为0.0623±0.02024、0.0680±0.08948和0.0574±0.01949;GH阳性细胞MOD分别为0.0380±0.01311、0.0415±0.01559和0.0293±0.01323;TSH阳性细胞数MOD分别为0.0943±0.18606、0.1272±0.05389和0.1044±0.04166。结论:在实验性大鼠胃癌形成过程中,低剂量亚硒酸钠组的大鼠腺垂体远侧部ACTH、GH和TSH阳性细胞反应增强;而高剂量亚硒酸钠的作用则完全相反。; 陈瑶瑶唐军民唐岩柯嘉毛卓孙红亚甄昱苏衍萍; 关键词：硒垂体免疫组织化学ABC法

硒、肾上腺皮质和脑垂体ACTH、TSH细胞在大鼠结肠癌形成中的作用: 目的:近年来,硒和维持机体内环境稳态的神经-内分泌-免疫调节网络在肿瘤发生、发展中的作用日益受到人们关注.该实验以实验性大鼠结肠癌为动物模型,探讨大鼠结肠癌形成及硒干预其形成过程中,机体肾上腺皮质、垂体远侧部ACTH细胞...; 孙红亚; 关键词：结肠癌硒肾上腺皮质 ACTH细胞

AOM所致大鼠结肠癌形成过程中垂体远侧部ACTH阳性细胞免疫组织化学观察: 2008年; 目的观察氧化偶氮甲烷(azoxymethane,AOM)所致大鼠结肠癌形成过程中,大鼠脑垂体远侧部ACTH细胞的免疫组织化学变化并探讨其意义。方法用断乳SD(Sprague Dawley)雄性大鼠30只,分为AOM实验组和盐水对照组。用AOM(15mg/kg)每周腹腔注射,连续2周,诱导大鼠结肠癌的形成。分别于实验第10、30、34周取材,用免疫组织化学、图像分析法观察大鼠实验性结肠癌形成过程中脑垂体远侧部ACTH阳性细胞的变化。结果亚甲基蓝染色光镜下观察,可见AOM腹腔注射的大鼠结肠黏膜出现异常隐窝(aberrant crypt,AC)和异常隐窝灶(aberrant crypt foci,ACF)。免疫组织化学显示,与同期正常对照组相比,对照组大鼠垂体远侧部ACTH阳性细胞阳性反应显著性增强(P<0.01)。结论在大鼠实验性结肠癌形成过程中脑垂体远侧部ACTH细胞可能参与了机体抗肿瘤的内分泌调节。; 孙红亚唐军民唐岩甄昱盛树青; 关键词：结肠癌垂体氧化偶氮甲烷

小鼠Stra8相互作用蛋白的筛选被引量：2: 2012年; 目的采用酵母双杂交法,从小鼠胚胎干细胞cDNA文库中筛选与Stra8(stimulated by retinoic acid8,Stra8)相互作用的蛋白。通过对相互作用蛋白的筛选和研究,探讨Stra8在胚胎干细胞分化中的作用机制。方法以pGBKT7-Stra8为诱饵质粒,从小鼠胚胎干细胞cDNA文库中筛选出与Stra8相互作用的阳性克隆,对验证后的阳性克隆进行测序及生物信息学分析,进一步采用直接酵母双杂交进行相互作用的验证。结果经过筛选、测序、同源性分析及直接酵母双杂交验证,发现了Setd6及DEK 2种与Stra8相互作用的蛋白。结论应用酵母双杂交系统,筛选得到了与Stra8相互作用的蛋白Setd6及DEK,它们可能与Stra8一起调控胚胎干细胞的增殖与分化,对Stra8相互作用蛋白的筛选有助于揭示其在胚胎干细胞中的作用机制。; 郑英张露萍王海燕孙红亚梁虹王建军; 关键词：酵母双杂交相互作用蛋白

PIAS-NY稳定转染小鼠精母细胞株的构建与鉴定: 2013年; 目的:构建PIAS-NY基因慢病毒质粒,并将包装所得慢病毒感染小鼠精母细胞,获得稳定过表达PIAS-NY的细胞株。方法:应用PCR技术扩增目的基因,并将扩增产物插入慢病毒载体质粒pGC-FU上,对阳性克隆进行PCR筛选及测序鉴定。将重组质粒与两种辅助包装原件载体质粒共转染293T细胞,获得含慢病毒颗粒的细胞上清,用慢病毒感染小鼠精母细胞,并用Western印迹方法检测细胞中PIAS-NY蛋白的表达。结果:成功构建了pGC-FU-PIAS-NY慢病毒表达质粒,获得了稳定过表达PIAS-NY的小鼠精母细胞株。结论:PIAS-NY过表达慢病毒质粒及稳定转染小鼠精母细胞株的构建,为进一步体外研究PIAS-NY基因在精子发生中的功能奠定了基础。; 郑英王海燕张露萍孙红亚梁虹贾筱琴胡艳秋朱永泽; 关键词：慢病毒载体

MicroRNA参与调控睾丸支持细胞的增殖与粘附功能被引量：4: 2018年; 精子发生过程需要生精细胞及睾丸体细胞的共同参与,这两种细胞也决定着睾丸的发育及雄性生育力。支持细胞是生精小管中唯一的体细胞,在正常精子发生过程中发挥重要的作用。支持细胞增殖与粘附功能的异常将导致精子发生异常,进而引发雄性不育。近年来研究发现,micro RNA(mi RNA)可调控支持细胞的增殖与粘附功能,其表达水平在激素、内分泌干扰素和营养状况等多种因素作用下发生特异性变化。本文总结了与睾丸支持细胞增殖与粘附功能相关的mi RNA及其作用机制,以期发现并鉴定更多与支持细胞相关的mi RNA,进而为探索与支持细胞相关不育症的病因提供理论依据。; 夏蒙蒙申雪沂牛长敏夏静孙红亚郑英; 关键词：MIRNA 支持细胞增殖粘附

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