孙强
- 作品数:7 被引量:7H指数:1
- 供职机构:华南农业大学更多>>
- 发文基金:国家杰出青年科学基金公益性行业科研专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 亚洲玉米螟PGRP-SA的克隆、表达及其组织表达差异性分析
- 肽聚糖识别蛋白(peptidoglycan recognition proteins,PGRPs)是昆虫先天性免疫系统中重要的模式识别受体,在抵抗病原入侵的过程中发挥着重要作用。本研究以亚洲玉米螟(Ostrinia fu...
- 孙强
- 关键词:玉米螟分子生物学生物防治肽聚糖
- 一种小菜蛾溶菌酶Ⅱ及其制备方法与应用
- 本发明公开了一种小菜蛾溶菌酶Ⅱ及制备方法与应用。所述小菜蛾溶菌酶Ⅱ(lysozymeⅡ)基因的核苷酸如SEQ ID NO:1~2所示;其编码的蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。将小菜蛾溶菌酶Ⅱ基因的序列或其成...
- 金丰良许小霞孙强黄婉君
- 文献传递
- 死亡素与泛素在大肠杆菌中的高效融合表达被引量:5
- 2009年
- 死亡素是由21个氨基酸残基组成的广谱抗菌肽。为了高效表达可溶性的死亡素,本研究利用递归式PCR(recursive PCR,rPCR)扩增了死亡素基因thanatin,并将其和家蝇Musca domestica泛素基因ubiquitin构成嵌合基因,克隆到表达载体pET-32a,再与硫氧还蛋白融合后构建表达载体pET-TRX-UBI-THA。将酶切和测序鉴定正确的质粒转化表达宿主菌BL21,经0.6mmol/L IPTG诱导,TRX-UBI-THA融合蛋白得到了高效可溶性表达。SDS-PAGE和Western blot检测结果表明融合蛋白的分子量为28.9kD,与预期的结果一致,表达量占菌体总蛋白的46%。Western blot分析结果显示融合蛋白能与Ni-NTA鏊合物特异性的结合,表明在融合蛋白的N-端带有6×His标签。利用C-端带有6×His标签的泛素C-端水解酶对融合蛋白进行切割,切割产物经Ni2+-NTA亲和柱和HPLC纯化(纯化量为5.4mg/L),Tricince-SDS-PAGE电泳得到单一的泛素蛋白条带。电喷雾质谱(ESI-MS)分析表明,纯化的泛素分子量为2.57kD,与通过氨基酸预测的分子量完全一致。利用琼脂孔穴扩散法对泛素活性进行检测,结果显示纯化的泛素对大肠杆菌K12D31和金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus具有较强的活性抑制。本研究表明,利用泛素融合技术可以高效表达可溶性的死亡素。
- 金丰良张呈文许小霞孙强任顺祥
- 关键词:抗菌肽泛素纯化活性检测
- 斜纹夜蛾抗菌肽基因Moricin和Cecropin时空表达模式及微生物敏感性的分析被引量:1
- 2012年
- 抗菌肽是一类具有广谱抗菌活性的小分子多肽,包括抗细菌、病毒和真菌。本研究以斜纹夜蛾Spodoptera litura(Fabricius)为研究对象,利用Real-timePCR和半定量RT-PCR检测了其体内两个重要抗菌肽基因Cecropin和Moricin的时空表达模式及其对微生物的敏感性。Real-timePCR检测结果表明,抗菌肽基因Cecropin和Moricin在斜纹夜蛾各个龄期(1,2,3,4,5和6龄幼虫、蛹、成虫)都有表达,随着龄期的增长,表达量逐渐增加,6龄幼虫中表达量达到最高。半定量RT-PCR检测表明,抗菌肽基因Cecropin和Moricin在7个不同组织(气管、卵巢、马氏管、体壁、中肠、脂肪体和血细胞)中都有表达,Cecropin在脂肪体中表达量最高,而Moricin在血细胞中表达量相对较高;RT-PCR检测表明,Cecropin和Moricin的表达在大肠杆菌Escherichia coli诱导后迅速上升,其中诱导后8h达到高峰期,一直持续到48h。不同病原微生物(大肠杆菌E.coli、金黄色葡萄球菌Staphyloccocus aureus和白僵菌Beauveria bassiana)分别诱导后,Real-timePCR检测表明,斜纹夜蛾抗菌肽基因Cecropin和Moricin对大肠杆菌的刺激最为敏感。本研究结果为进一步研究斜纹夜蛾抗菌肽基因Cecropin和Moricin的功能奠定基础。
- 许小霞王爽张文庆孙强王超金丰良
- 关键词:斜纹夜蛾抗菌肽CECROPIN
- 两种水生昆虫的生活史及其次级生产力的研究
- 次级生产力是水生生物之间能量流动和物质循环的表现形式,在淡水生态系统中起着重要的作用。本论文以地处亚热带地区的广州从化流溪河的一条主要支流——鸭洞溪为研究地点,在长达9 km的河段上设置了9个采样点,对双突细蜉(Caen...
- 孙强
- 关键词:生活史次级生产力
- 文献传递
- 一种小菜蛾溶菌酶Ⅱ及其制备方法与应用
- 本发明公开了一种小菜蛾溶菌酶Ⅱ及制备方法与应用。所述小菜蛾溶菌酶Ⅱ(lysozymeⅡ)基因的核苷酸如SEQIDNO:1~2所示;其编码的蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO:3所示。将小菜蛾溶菌酶Ⅱ基因的序列或其成熟肽序列...
- 金丰良许小霞孙强黄婉君
- 文献传递
- 小菜蛾转录组分析和免疫玫烟色棒束孢相关基因的功能
- 玫烟色棒束孢Lsaria fumosorosea(Wize)是一种常见的重要昆虫病原真菌,在自然界分布广泛,可用来防治多种害虫。为了研究小菜蛾抵抗玫烟色棒束孢侵染的分子机制,本研究测定了小菜蛾的转录组序列,并用数字化基因...
- 孙强
- 关键词:小菜蛾溶菌酶天蚕素基因表达谱