孔义波
- 作品数：11 被引量：40H指数：4
- 供职机构：山东农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：山东省优秀中青年科学家科研奖励基金山东省科技攻关计划山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 源自SPF鸡群内源性ALV/SD0501全基因序列鉴定分析及感染性分子克隆pSD0501的构建
- 禽白血病(AvianLeukosis，AL)是由禽白血病病毒(AvianLeukosisVirus，ALV)引起的以禽类造血组织中某些细胞成分过度增生为主的各种肿瘤性传染性疾病，其中以禽淋巴细胞性白血病和肉鸡的髓细胞性白...
- 孔义波
- 关键词：白血病病毒
- 文献传递
- 鸭圆环病毒FJ0601株Rep蛋白的原核表达及其抗血清制备被引量：9
- 2010年
- 通过PCR方法扩增鸭圆环病毒(Duck circorirus,DuCV)FJ0601株Rep基因的完整ORF,按正确的阅读框架将其克隆入原核表达载体pGEX-6P-1中,重组质粒转化BL21宿主菌后,经IPTG诱导表达。诱导菌体裂解物经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)后,将表达产物从凝胶中回收,免疫4周龄小鼠,3次免疫后,采血分离血清。所得抗GST-Rep多克隆抗血清分别与经PCR检验为阳性的病鸭脾脏、胸腺、法氏囊组织的冰冻切片进行间接免疫荧光试验(IFA),结果在感染DuCV的发病鸭3种免疫器官中均可检测到由阳性细胞组成的局部病灶,表明大肠杆菌表达的Rep融合蛋白至少保留了部分天然Rep蛋白的抗原性。
- 刘少宁杨金保张兴晓陈智高继明孔义波朱岩丽姜世金
- 关键词：鸭圆环病毒REP原核表达IFA
- 副鸡禽杆菌单因子血清的制备与应用被引量：1
- 2008年
- 利用副鸡禽杆菌的A、B和C 3个血清型的参考菌株Hpg-8、CCM6075和Hpg-68分别制备相应的抗血清,然后对抗血清进行交叉吸收试验,得到A型、B型和C型3种单因子血清,不同血清型的单因子血清不与其他血清型菌株发生凝集。利用这3种单因子血清对临床上分离到的6株副鸡禽杆菌进行血清型的鉴定,结果表明6株地方分离株均为血清A型。
- 赵钦孙亚妮孔义波张兴晓姜世金
- 关键词：副鸡禽杆菌血清
- 鸭疫里默氏杆菌中国分离株的外膜蛋白A基因的克隆与序列分析被引量：5
- 2008年
- 为了对鸭疫里默氏杆菌（Riemerella anatipestifer,RA）中国分离株的外膜蛋白A（OmpA）基因的序列进行分析,根据GenBank中已发表的鸭疫里默氏杆菌（Riemerella anatipestifer,RA）的外膜蛋白A（Om-pA）基因序列,在其高度保守区设计一对特异性引物,应用PCR技术,分别扩增从中国广东、福建和山东等地分离的8株鸭疫里默氏杆菌中国分离株的OmpA基因,克隆测序后与GenBank中已发表的26株鸭疫里默氏杆菌进行序列比较,结果表明：所有菌株的OmpA基因均为由1164个碱基组成的ORF,编码387个氨基酸组成的蛋白质,起始密码子均为ATG,终止密码子均为TAA,其核苷酸序列非常保守,同源性高达88.2%-100%,氨基酸同源性达到88.9%-100%。试验表明,OmpA基因具有种内相对保守性,其核苷酸与氨基酸同源性与鸭疫里默氏杆菌的血清型、分离时间和地点之间无必然联系。
- 魏秀丽孙亚妮姜世金孔义波张兴晓
- 关键词：鸭疫里默氏杆菌外膜蛋白A
- 山东省樱桃谷病鸭圆环病毒感染情况的调查
- 对2006～2007年间山东省6个地区的70个樱桃谷肉鸭养殖场146个鸭群742只病死鸭的DuCV感染情况进行分析。通过PCR和Dot-blot检测方法对患病鸭法氏囊的组织DNA分析表明，DuCV DNA个体阳性率为44...
- 张兴晓姜世金赵钦孙亚妮孔义波柴同杰
- 关键词：兽医学鸭圆环病毒病毒感染
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型感染性克隆的构建
- 2011年
- 利用PCR方法从临床疑似PMWS症状猪的脏器中扩增出1株猪圆环病毒2型(PCV-2)的全基因组(1 767bp),命名为SDZQ-1,对其基因进行克隆测序并与GenBank中收录的21个PCV-2毒株的全基因组序列进行比较,同源性结果为95.0%～99.7%。将2个SDZQ-1的全基因组序列正向串联连接入PUC19载体质粒中,成功构建了PCV-2双拷贝质粒。体外转染PK-15细胞,盲传5代后,用PCR和间接免疫荧光方法检测,结果构建的PCV-2克隆具有感染性。
- 王明亮刁有祥纪巍孔义波高继明
- 关键词：猪圆环病毒感染性克隆同源性转染
- 我国自然发病鸭群中鸭圆环病毒的流行病学调查被引量：20
- 2009年
- 为了解鸭圆环病毒(Duck circovirus,DuCV)在我国鸭群中的感染状态,从我国养鸭业比较集中的山东、江苏、四川、福建、广东5个省份36个鸭群采集临床有发病表现的343只病、死鸭的病理组织样品,以提取的组织DNA为模板通过特异性斑点杂交和PCR方法检测DuCV的感染情况。结果显示上述5个省份的鸭均检出了DuCV,病、死鸭中DuCV的个体阳性率为81.63%(280/343),群体阳性率为94.44%(34/36)。结果表明我国鸭群中已普遍存在DuCV的感染。
- 刘少宁张兴晓陈智高继明魏秀丽孔义波朱岩丽姜世金
- 关键词：鸭圆环病毒流行病学调查
- 从SPF鸡胚中检出内源性白血病病毒及其全基因组核苷酸序列测定与分析
- 本研究以山东某SPF鸡场的SPF鸡胚成纤维细胞提取的基因组DNA为模板,参照已发表的序列,设计合成了8对引物,经PCR成功扩增出了8段连续的、相互部分重叠的目的DNA片段,分别连接入T载体进行克隆、测序.用DNAstar...
- 孔义波姜世金赵钦孙亚妮
- 关键词：同源性分析鸡胚
- 文献传递
- 一株Ⅹ型鸭疫里默氏杆菌GN52稳定性的研究
- 2008年
- 选取鸭疫里默氏杆菌的一株地方分离株GN52,按照生长的最适条件,在马丁固体培养基上连续传代。分别选取第3代、第11代、第21代、第31代、第41代、第51代和第61代的细菌,对其进行染色镜检、生化试验、药敏试验及动物实验。结果表明,随着代次的增加,该菌株染色形态、生化特性及抗药性均未发生明显变化,但毒力有逐渐下降的趋势。
- 孙亚妮赵钦姜世金张兴晓孔义波魏秀丽
- 关键词：鸭疫里默氏杆菌细菌代次
- SPF鸡胚中内源性白血病病毒全基因序列鉴定与分析被引量：8
- 2008年
- 以国内某3家SPF鸡场的SPF鸡胚成纤维细胞提取的基因组DNA为模板,参照已发表的序列,设计合成了4对检测内源性白血病病毒引物,分别检测gag基因、pol基因、env基因和LTR片段,结果显示4者检出阳性率很高(gag,29/46;pol,27/46;env,24/46;LTR,31/46)。设计合成了8对引物,选取4片段检测均为阳性的样品之一,经PCR成功扩增出了8段连续的、相互部分重叠的目的DNA片段,分别连接入T载体进行克隆测序。用DNAstar软件对测序结果进行拼接,从一个鸡胚得到了内源性白血病病毒前病毒全基因组序列。比较分析发现,该序列env基因与已知的E亚群内源性病毒代表株env基因的核苷酸序列同源性在98.5%以上,全基因组序列同源性在99.1%以上,而与其他亚群代表株同源性相对较低,env基因同源性仅为56.3%～91.5%。
- 孔义波张兴晓姜世金赵钦孙亚妮
- 关键词：同源性分析
