夏洪丽
- 作品数：11 被引量：29H指数：2
- 供职机构：广东海洋大学水产学院更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项深圳市科技计划项目广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鱼诺卡氏菌培养条件及培养基的优化被引量：16
- 2013年
- 对鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolea)ZJ0503的增菌培养基和生长条件进行优化。研究了温度、盐度、初始pH对鱼诺卡氏菌生长的影响,并通过单因素试验对培养基的碳源、氮源和无机盐成分进行了筛选,采用正交试验法对培养基各主要成分的添加量进行了优化。结果表明,鱼诺卡氏菌最适宜生长条件为温度25℃、盐度5、pH 6.5±0.2;经筛选,鱼诺卡氏菌培养基中最佳碳源是葡萄糖,最佳氮源是酵母粉,促生长作用最强的2种无机盐是磷酸氢二钾(K2HPO4)和氯化钙(CaCl2);确立了培养基优化配方为葡萄糖20 g·L-1,酵母粉15 g·L-1,K2HPO40.75 g·L-1,CaCl20.2 g·L-1(单独灭菌),氯化钠(NaCl)5 g·L-1,pH 6.5±0.2。
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- 关键词：培养基
- 鱼类致病杀鲑诺卡氏菌(Nocardia salmonicida)特异性PCR检测方法的建立被引量：11
- 2014年
- 鱼类诺卡氏菌病是全球性的鱼病,杀鲑诺卡氏菌(Nocardia salmonicida)是引起鱼类诺卡氏菌病的主要病原之一。根据杀鲑诺卡氏菌16S-23S转录间隔区(ITS)序列设计引物,建立特异性PCR检测杀鲑诺卡氏菌的方法。结果表明,筛选的PCR引物可特异性地扩增出杀鲑诺卡氏菌的ITS片段,检测灵敏度(DNA浓度)为28.3 pg·μL-1。检测人工感染杀鲑诺卡氏菌的鱼组织,结果显示,该方法可从未分离到病原菌的病鱼组织中检出阳性片段,较传统细菌分离鉴定方法更为高效灵敏。
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- 关键词：转录间隔区聚合酶链式反应
- 一株大鲵虹彩病毒的分离及鉴定
- 2022年
- 2020年5月,广东广州某野生动物保护基地爆发疑似病毒引发的疾病。现场采样发现,病鲵体长约2 m,反应迟钝,体表有出血点或溃疡症状。本研究采用胖头鲤肌肉细胞系(fat head minnow epithelial cells,FHM)培养、超薄切片透射电镜观察、病毒主要衣壳蛋白(major capsid protein,MCP)克隆与测序分析等方法,从患病大鲵中分离得到一株病毒,鉴定其属于虹彩病毒科蛙病毒属,命名为大鲵虹彩病毒广州分离株(CGSIV-GZ)。FHM经患病大鲵组织匀浆液接种后出现细胞圆缩、死亡、脱落等典型的细胞病变症状。将感染后的FHM细胞制作超薄切片,通过电镜观察发现,FHM细胞中存在大量直径约100~120 nm具囊膜的正六边形成熟病毒粒子,形态与虹彩病毒相似。根据虹彩病毒MCP基因保守区域序列设计特异性引物对病鲵组织样本进行PCR扩增,获得了431 bp的目的基因片段,测序后经采用BLAST软件分析,发现其与GenBank中的蛙病毒衣壳蛋白基因同源性达96%~99%。确认本次野生动物保护基地大鲵发生大规模死亡是蛙病毒感染所致。
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- 关键词：透射电镜
- 检测鰤鱼诺卡氏菌的引物、试剂盒及方法
- 本发明公开了一种检测鰤鱼诺卡氏菌的引物、试剂盒及方法。检测鰤鱼诺卡氏菌的引物包括上游引物和下游引物，上游引物的核苷酸序列如SEQ.ID.N0.1所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ.ID.N0.2所示。本发明解决了现有的鰤...
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- 重组酶介导等温扩增技术检测鰤鱼诺卡氏菌方法的建立被引量：2
- 2023年
- 为建立一种基于重组酶介导等温扩增技术(recombinase-aided amplification,RAA)的快速检测鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)的方法,针对鰤鱼诺卡氏菌的特异性基因组片段,设计重组酶介导扩增引物,通过检测7株鰤鱼诺卡氏菌近缘菌和9种水产养殖过程中常见病原菌,筛选出特异性RAA检测引物,并通过将含有目的片段的重组质粒进行梯度稀释以分析该检测方法的灵敏度,最后采用RAA方法检测患病鱼、健康鱼及11种不同来源的鰤鱼诺卡氏菌菌株,以评价该检测方法的应用性和覆盖度。结果表明:本研究中设计的引物仅针对鰤鱼诺卡氏菌可以扩增出目的条带,检测灵敏度为100 pg/μL,人工感染鰤鱼诺卡氏菌的杂交鳢(Channa maculate♀×C.argus♂)肝脏、体肾和脾脏等组织基因组DNA能够扩增出阳性条带,不同来源的鰤鱼诺卡氏菌菌株可以扩增出阳性条带。研究表明,本研究中所建立的鰤鱼诺卡氏菌重组酶介导等温检测方法具有准确、简便的特点,可对鰤鱼诺卡氏菌进行快速检测。
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- 红笛鲷TRAF3基因的克隆、表达及功能研究
- 红笛鲷是我国南方重要的海水经济养殖鱼类之一，近年来多种疾病的发生，对红笛鲷养殖业造成了巨大的危害，目前对于病原感染时红笛鲷的免疫机制及其免疫信号的转导过程还缺少深入的了解。TRAFs是在多个物种中都高度保守的一类信号接头...
- 夏洪丽
- 关键词：红笛鲷免疫应答酵母双杂交
- 文献传递
- 乌鳢烂身病病原的分离鉴定及病理组织观察
- 2021年
- 为探究乌鳢Channa argus烂身病的病因及患病乌鳢的体表组织病理学变化,从广东中山某养殖场患烂身病乌鳢病灶处分离到一株优势菌ZS20200317,通过形态学特征、革兰氏染色、16S rRNA及生理生化特性对分离菌株进行鉴定,并检测了该菌株的药物敏感性,最后采用回归感染试验确认分离菌株为导致乌鳢烂身病的病原菌。结果表明:患病乌鳢烂身处的肌肉组织出现了明显变性、坏死和炎症细胞浸润;LB琼脂培养平板培养结果显示,该菌呈边缘光滑有光泽的圆形白色菌落,为革兰氏阴性菌;16S rRNA基因进化分析显示,菌株ZS20200317与维氏气单胞菌Aeromonas veronii的亲缘关系最近,一致性高达98.5%;生理生化试验显示,该菌的赖氨酸脱羧酶、甘露醇、覃糖、蔗糖、氧化酶和VP等生理生化反应为阳性;药敏试验显示,该菌对氯霉素、头孢他啶、头孢氨苄、头孢唑林和头孢拉定沙星等20种抗生素药物敏感,对氨苄西林、苯唑西林、羧苄西林、青霉素G、麦迪霉素、万古霉素和克林霉素7种药物具有耐药性;人工回归感染试验证实,该菌能引起健康乌鳢死亡。研究表明,维氏气单胞菌是广东中山地区乌鳢烂身病的病原,本研究结果为乌鳢维氏气单胞菌病的防控提供了理论依据。
- 喻大鹏唐怀庆丘金珠宋海霞梁富夏洪丽夏洪丽鲁义善
- 关键词：乌鳢维氏气单胞菌组织病理药敏试验
- 红笛鲷TRAF3基因的克隆、表达及其功能研究
- TRAF3(Tumor Necrosis Factor receptor-associated factor 3)是TRAF家族成员之一,能够与胞内多种受体如TNFR、NLR、TLR/IL-1R等相互作用,进而调节NF-...
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- 关键词：红笛鲷免疫
- 文献传递
- 红笛鲷p38β MAPK基因的克隆及原核表达被引量：2
- 2014年
- 鱼类p38 MAPK基因在宿主免疫调控及抵御病原侵染的过程中具有重要作用。利用RACE技术克隆了红笛鲷p38βMAPK基因(Ls-p38β,Gen Bank登录号为KJ502277)。序列分析结果显示,Ls-p38βc DNA全长1 628 bp,开放阅读框1 086 bp,可编码361个氨基酸,预测其编码蛋白的分子量为41.6 k D,理论等电点为5.74。该基因推导的氨基酸序列含有p38 MAPK家族保守的双磷酸化激活环(TGY),与尼罗罗非鱼的p38β有97%的相似性。将此基因定向插入原核表达载体构建重组表达质粒p ET32-p38β后导入BL21(DE3)菌株,利用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE与Western blot分析显示约在60 k D出现特异蛋白条带,与预期分子量大小相符,说明Ls-p38β融合蛋白表达成功。
- 夏洪丽蔡佳鲁义善简纪常吴灶和
- 关键词：红笛鲷丝裂原活化蛋白激酶原核表达
- 检测鰤鱼诺卡氏菌的引物、试剂盒及方法
- 本发明公开了一种检测鰤鱼诺卡氏菌的引物、试剂盒及方法。检测鰤鱼诺卡氏菌的引物包括上游引物和下游引物，上游引物的核苷酸序列如SEQ.ID.N0.1所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ.ID.N0.2所示。本发明解决了现有的鰤...
- 夏洪丽莫静怡夏立群鲁义善樊慧敏龙梦汪志文喻大鹏陈文捷
- 文献传递
