夏小兵
- 作品数:4 被引量:8H指数:2
- 供职机构:军事医学科学院更多>>
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- 戊型肝炎病毒线性抗原表位克隆及表达的初步研究被引量:2
- 2000年
- 目的 探讨戊型肝炎病毒线性抗原表位的克隆表达策略。方法 合成HEVORF3羧基端 19个氨基酸编码DNA序列 ,在序列的 5′端加入了两个甘氨酸序列 ,通过基因扩增载体中的 5′GGGG/CCCC非对称粘性末端 ,实现线性表位序列的首尾串联排列。结果 获得了 2mer、4mer、6mer、8mer 4个首尾串联的重复序列 ;分别克隆到表达载体pQE30中后 ,在IPTG诱导下主要以包涵体形式表达 ,其中 4mer蛋白占细菌蛋白的 2 1 6 % ,6mer蛋白占细菌蛋白的 13 5 % ,而含 8mer的重组菌不表达目的蛋白 ,首尾串联后每一个线性表位的两端都存在被梭菌蛋白酶识别的特异序列 ,表达产物可以被重新酶解成小分子肽 ,经梭菌蛋白酶消化的表达产物可以检测到一定的抗原反应性。结论 通过首位串联可以实现HEV线性表位较高效的表达。
- 夏小兵黄如统李德荣
- 关键词:戊型肝炎病毒
- 戊型肝炎病毒亚基因组RNA的研究被引量:2
- 2000年
- 本文利用同位素代谢标记在HEV感染 8 5~ 1 0 5,6 5~ 7 5h分别检测到 1及 2个亚基因组RNA ,而感染 2 1h后及在成熟的病毒颗粒内未能检测到亚基因组RNA。通过杂交实验 ,发现HEV的亚基因组RNA具有典型的共 3′端的半套式结构 ,且基因组RNA与亚基因组RNA的 5′端不存在共同的引导序列。通过紫外转录图谱发现HEV的亚基因组RNA是通过独立转录的方式产生的。利用引物延伸反应发现两种亚基因组RNA的转录起始位点分别位于RNA聚合酶区及非结构区、结构区的基因间序列。
- 夏小兵黄如统李德荣
- 关键词:戊型肝炎病毒
- 我国厦门地区散发性戊型肝炎病毒部分核苷酸序列分析被引量:4
- 1998年
- 自新疆发生戊型肝炎(HE)暴发流行以来,已陆续报道我国其他地区存在散发感染〔1〕。本实验室已报道我国广州地区的散发性HEV与我国北方和国外HEV在基因结构上有明显不同〔2,3〕。最近又对从厦门地区急性HE病人的血清中检出的HEVRNA作序列分析,结果...
- 黄如统廖绵初李晓萸夏小兵夏小兵干侣仙苑锡同李德荣
- 关键词:戊型肝炎病毒核苷酸
- 基因工程疫苗的病毒载体
- 1998年
- 病毒基因工程疫苗是以活病毒为载体将一段外源基因导入机体细胞内,并使外源基因维持较高水平的表达。通过使用复制型或复制缺陷型载体能使表达的抗原诱生机体产生相应的体液抗体,并能引起机体产生细胞介导的免疫反应及粘膜免疫反应。本文主要介绍有可能用于基因工程疫苗的DNA及RNA病毒载体构建及其应用。
- 夏小兵李德荣
- 关键词:病毒载体